Синтетические полипептиды представляют собой растущий класс биотерапевтических препаратов. агонисты инсулиноподобного пептида - 1 (GLP - 1) представляют собой класс синтетических полипептидов, имитирующих природный гормон GLP - 1, который играет важную роль в регуляции метаболизма, способствуя как секреции инсулина, так и снижению веса [1]. Поскольку молекулы GLP - 1 подвержены множеству путей разложения, оценка качества и стабильности терапевтических препаратов типа GLP - 1 имеет решающее значение для обеспечения их эффективности.

В настоящее время ультрафиолетовый спектр используется в основном для обнаружения изменений в спектре поглощения полипептидов и, следовательно, для мониторинга его стабильности [2]. Эта технология неразрушающего обнаружения дает значительные преимущества рабочим процессам: например, ценные образцы остаются нетронутыми после анализа и могут по - прежнему использоваться для дополнительного технического анализа, такого как гидравлическое соединение. Кроме того, ультрафиолетово - видимое спектральное обнаружение является быстрым и простым в эксплуатации и удобно для пользователей с различными уровнями навыков и профессиональным опытом.

Однако при мониторинге незначительных изменений биологических молекул, вызванных факторами окружающей среды, такими как окислительный стресс (например, небольшое смещение пикового положения поглощения или незначительное изменение интенсивности), традиционные спектральные данные видимого поглощения в ультрафиолетовом диапазоне часто трудно поддаются анализу. Кроме того, когда биомолекулярный спектр содержит несколько перекрывающихся компонентов, трудность распознавания спектральных пиков также является серьезной проблемой для анализа. Технология производной спектроскопии преодолевает эти ограничения, улучшая характеристики тонкого микроспектра и эффективно различая трудноразличимые перекрывающиеся пики в традиционном спектре поглощения.

Более 3500 пультов ультрафиолетового спектрофотометра Agilent с видимым спектрофотометром оснащены модулями с несколькими пулами, которые в сочетании с функциями измерения производной второго порядка обеспечивают мощный инструмент для биомолекулярного анализа. Этот прибор может одновременно измерять несколько образцов при одинаковых условиях, включая стандартные изделия, образцы и контрольные. Встроенная в программное обеспечение Agilent Cary UV Workstation функция вычисления уравнений, используемая для управления ультрафиолетовым спектрофотометром Cary более 3500 пулов, автоматически генерирует спектр производной второго порядка после измерения поглощения света, чтобы свести к минимуму ошибки вычислений и обеспечить эффективную обработку данных.

В этом описании применения показано, как использовать более 3500 пулов ультрафиолетово - видимого спектрофотометра Cary в сочетании с ультрафиолетово - видимой производной спектрометра второго порядка для эффективного повышения разрешения перекрывающихся пиков поглощения полипептидов и ароматических аминокислот.