В нейронаучных исследованиях стабильные и надежные модели животных являются краеугольным камнем для изучения механизмов жизни и проверки стратегий лечения. Краниотомия у мышей, как основная технология построения различных моделей научных исследований мозга, имеет решающее значение для стандартизации и точности ее работы. Успешная операция не только минимизирует повреждения животных, но и является ключом к обеспечению точности и повторяемости последующих экспериментальных данных.

Знание краниотомии не может быть отделено от глубокого понимания анатомической структуры мозга и многократного совершенствования тонких методов работы. На практике многие исследователи часто сталкиваются со следующими типичными проблемами:

✅ Как безопасно удалить череп, чтобы убедиться, что ткань мозга не повреждена?

✅ Как сбалансировать фиксированную прочность с целостностью поля зрения изображения при фиксации стекла черепа?

✅ Какие детали следует учитывать при хирургической стерильности и послеоперационном уходе за животными?

Эта статья будет вращаться вокруг классического процесса краниотомии у мышей, систематически расчесывая основные методы технологии с помощью четкой демонстрации шагов и анализа ключевых моментов. В качестве первой статьи « Подготовка мышей к операции с двойной фотонной флуоресцентной визуализацией» эта статья предназначена для того, чтобы помочь читателям заложить прочную основу для операции. В будущем мы также подробно рассмотрим более тонкие хирургические операции, такие как имплантация GRIN Lens, открытие спинного мозга, двойные фотоны и погружение электродов EEG, чтобы сопровождать вас на пути к постоянному совершенствованию технологий.

　　Теплый совет:Учитывая ваши ощущения просмотра, мы мягко обработали часть хирургической картины, пожалуйста, будьте уверены в просмотре.

　　

　　Часть 01Предварительная подготовка.

1. Хирургические инструменты: два тонких пинцета, двухголовый миниатюрный скрепер и пружинный нож.

2. Экспериментальные расходные материалы: расходные материалы и физиологические растворы, необходимые для подготовки к эксперименту (1% цефтриаксона натрия).

3. Дезинфекция инструментов: Все инструменты или имплантаты, используемые во время операции, должны быть стерилизованы перед использованием, их можно дезинфицировать 75% этанола, условно можно регулярно стерилизовать под высоким давлением.

4. Дезинфекция операционного стола: Перед использованием операционного стола следует протирать и дезинфицировать 75% этанолом, операционный стол должен быть покрыт стерильной тканью, чистым абсорбционным ковриком или полотенцем, после каждой операции эти материалы должны быть заменены.

　　Часть 02Анестезия, фиксация

Мыши помещаются в помещение анестезиологического склада для индуцированной анестезии, а шкала расхода газа и анестезии устанавливается в соответствии с лабораторной пневматической машиной. Когда у мышей наблюдалось заметное замедление дыхания и расслабление конечностей, это свидетельствовало о том, что мышь впала в анестезию.

После анестезии мышей прикрепляют к стереолокатору мозга и поддерживают анестезию, постоянно наблюдая за дыханием мышей во время операции.

　　Часть 03Выпадение волос

Помазание глазной пасты эритромицином равномерно наносится на глаза мыши в количестве, которое должно полностью покрыть глаза мыши, чтобы глаза не подвергались воздействию.

2.Используйте медицинскую ватную палочку, окунутую в крем для удаления волос, равномерно нанесите его на корни волос против направления роста волос и вытрите волосы с головы ватной палочкой примерно через 2 минуты.

3. Использовать медицинские ватные палочки, окунутые в физиологический раствор, и очистить голову мыши от остатков крема для удаления волос.

4. Использовать йод - вольт для протирания очищенной кожи.

Часть 04Обнаружить и очистить череп

1. Отрезать кожу головы с помощью пружинных ножниц.

2. Удалить все излишки жира из слизистой оболочки и двух мышечных соединений, подвергшихся воздействию черепа.

3. Удаление остатков слизистой оболочки, соединительной ткани и т.д. с поверхности черепа с помощью миниатюрных двухголовых скребковых лопат.

4. Держать шарики для промывания ушей и дуть поверхность черепа до полной сушки.

　　Часть 05Открытие черепа

Используя отверстие для инъекции вируса или место локализации в качестве центра, держа тонкий пинцет, чтобы поместить круглые стеклянные пластины соответствующей спецификации на поверхность черепа.

2.Переместите скорость бурения черепа на низкую ступень, после шлифовки по размеру стекла, используйте шар для промывки ушей, чтобы мягко сдуть обломки, повторите эту операцию до тех пор, пока диапазон шлифовки не будет полностью соответствовать размеру стекла, а затем отрегулируйте скорость вращения до среднего и высокого класса, продолжайте шлифовку.

3. При появлении трещин в шлифованном черепе скорость сверления черепа переводится на низкую ступень, продолжается шлифовка, повторяется операция до полного разрыва всего окна черепа.

4. Держите тонкий пинцет и медленно раскрывайте фрагменты черепа.

　　Часть 06Избирать костные крошки

Используйте тонкий пинцет, чтобы спустить иглу с боковой стороны черепного окна, аккуратно выделите фрагменты вокруг него и повторите эту операцию до тех пор, пока вокруг черепного окна не будет полностью никаких фрагментов.

Часть 07Установка стекла

Используйте тонкий пинцет, чтобы аккуратно поместить очищенный стеклянный зажим на открытую ткань мозга; Осторожно нажмите на стекло пинцетом, чтобы оно плотно прилегало к шлифованной поверхности черепа и вставлялось под череп; Под микроскопом тела проверьте, есть ли пузырьки под стеклом, и если есть пузырьки, откройте стекло и добавьте физиологический раствор, повторите эту операцию до тех пор, пока не будет пузырьков.

2. Используйте кончик влагопоглощающей бумаги, чтобы отсосать лишнюю жидкость, просачивающуюся за пределы стекла, используйте шарик для промывания ушей, чтобы мягко высушить поверхность черепа, чтобы смочить небольшое количество биотканевого клея в порядке наружного внутреннего, и нанесите его на краевую кожу, весь череп и край окна черепа.

3. После того, как клей биологической ткани высохнет, окуните 406 клей зубной палочкой для нанесения, диапазон нанесения там же, ожидая сушки 406 клея.

4.Использовать кончик влагопоглощающей бумаги, чтобы окунуть 502 в смесь с зубным цементом, небольшое количество раз наносить на край черепного окна, на протяжении всего процесса работы не позволяйте клею течь в центр стекла.

Часть 08Монтажная головка

Использовать клей 502 для растворения смешивания зубного цемента, тонкого равномерного покрытия открытого черепа, полного закрытия открытого черепа и установки головки, когда зубной цемент не высох.

2. Надлежащее заполнение щелей или слабых соединений с головкой зубным цементом для повышения надежности головки.

3. После того, как зубной цемент просох, поместите мышь в термос и ждите, пока мышь проснется.

ЧАСТЬ 09Послеоперационный уход

Обеспечить хорошие условия жизни для животных, рекомендуется выращивать в одной клетке и посыпать корм в клетке, чтобы избежать трения головы при съедении или драке животных, что приводит к смещению поля зрения или падению головы.

2. Через 1 - 7 дней после операции вводится раствор цефтриаксона натрия в брюшную полость животного 1 раз в день.