Полипептидный синтезаторКалибровка является основным звеном в обеспечении чистоты синтетических продуктов, производительности и повторения экспериментов, необходимо проводить систематическую калибровку ключевых модулей, таких как точность ввода жидкости, контроль температуры, стабильность давления и система обнаружения. Ниже приведен поэтапный процесс калибровки в соответствии с отраслевыми нормами, применимыми к основным твердофазным полипептидным синтезаторам.

I. Подготовка к калибровке: предварительная обработка окружающей среды и оборудования

Подтверждение условий окружающей среды: стабилизация лабораторной температуры на уровне 20 - 25°C (колебания ±1°C), контроль относительной влажности на уровне 40% - 60%, избегая оборудования для прямого продувания воздушного потока. За 1 час до калибровки включается подогрев оборудования, чтобы убедиться, что модули находятся в стабильном рабочем состоянии.

Инструменты и стандартная материальная подготовка: подготовка стандартных измерительно сертифицированных устройств (таких как электронные весы класса 0,01 мг, стандартные термометры, прецизионные манометры, 100 мкл стандартных пипеток), а также реагентов для калибровки, таких как безводный метанол (чистая хроматография), стандартный раствор трикетона (0,1 моль / л).

Очистка и проверка оборудования: разборка впускных трубопроводов, реакционных колонн, промывка безводным метанолом 3 раза после сушки; Проверьте давление баллона азота (≥ 0,5 МПа), замените стареющие уплотнительные прокладки и убедитесь, что в трубопроводе нет утечки.

II. Калибровка основного модуля: точный контроль ключевых параметров

(1) Калибровка системы подачи жидкости: обеспечение точности измерения реагента

Калибровка расхода впускного насоса: выберите обычный объем впускаемой жидкости (10 мкл, 50 мкл, 100 мкл), установите скорость впуска 10 мкл / с, вставьте конец впускного трубопровода в предварительно взвешенную чистую центробежную трубку и запустите процедуру впрыска. Каждый объемный градиент повторяется 3 раза, масса безводного метанола, собранная с помощью взвешивания электронных весов, рассчитывается на фактический объем впускаемой жидкости в соответствии с плотностью метанола (07918 г / мл при 20°C) с погрешностью, которая составляет ±2%, в противном случае регулируется давление корпуса насоса или заменяется уплотнительное кольцо.

Калибровка точности распределения реагента: подключение различных реактивных трубопроводов к стандартному интерфейсу переноса, установка одноразового распределения 50 мкл, повторное распределение 10 раз в емкой бутылке, проверка общей погрешности объема методом емкости, чтобы обеспечить ±1%; В то же время, чтобы проверить разницу во времени при распределении синхронизации нескольких каналов, требуется 0,5 секунды.

(2) Калибровка системы температуры и давления: стабильная реакционная среда

Калибровка температуры реакции: Вставьте стандартный термометр внутрь реактивного столба (вблизи области смолы), установите три общие точки температуры 25°C, 30°C, 40°C, соответственно, прочитайте значение температуры через 30 минут после изоляции, каждая точка повторяется 3 раза, ошибка должна составлять ±0,5 °C. В случае превышения нормы нагревательный элемент корректируется или заменяется параметрами модуля управления температурой оборудования.

Калибровка давления азота: Закройте выход реактивной колонны, подключите прецизионный манометр к азотному воздухозаборнику, установите давление 0,1 МПа, 0,2 МПа, 0,3 МПа, стабилизируйте показания через 5 минут, ошибка должна быть ± 0,01 МПа. После калибровки проверяется скорость продувания азота, чтобы убедиться, что смола вращается равномерно и без брызг.

(3) Калибровка модуля обнаружения и управления: обеспечение точного мониторинга процесса

Калибровка системы обнаружения трикетона: подготовка стандартного раствора трикетона с концентрацией 0,01 ммоль / л, 0,05 ммоль / л, 0,1 ммоль / л, автоматическая проверка проб с помощью оборудования, регистрация значения поглощения и построение стандартной кривой, коэффициент корреляции должен быть ≥ 0995. Если линейность плоха, очистите световой путь или замените источник света.

Калибровка с программным управлением: Напишите стандартную синтетическую программу (включая снятие защиты, стирку, сцепление 3 шагов), регистрирующую отклонение фактического времени выполнения каждого шага от заданного времени, повторяя каждый шаг 5 раз, отклонение должно составлять ±1 секунду. Проверьте реакцию переключения трубопровода при переключении шагов, чтобы убедиться, что нет остаточного перекрестного загрязнения реагента.

III. Проверка и регистрация после калибровки: обеспечение эффективности калибровки

Проверка работы на холостом ходу: Выполните программу синтеза холостого хода после калибровки, непрерывно выполняйте 3 цикла, проверьте рабочее состояние каждого модуля, чтобы убедиться, что нет утечки, изо - шума, дрейфа параметров и других проблем.

Стандартная проверка синтеза пептидов: выберите стандартный пентапептид (например, Leu - Enkephalin) для синтеза, чтобы проверить чистоту продукта с помощью HPLC, требуется ≥95% и отклонение от данных после исторической калибровки на уровне ±2%, чтобы подтвердить эффект калибровки.

Архив калибровочных записей: подробный отчет о дате калибровки, условиях окружающей среды, калибровочном персонале, стандартном номере оборудования, данных калибровки каждого модуля и значении отклонения, вставить знак соответствия калибровке, уточнить следующий цикл калибровки (рекомендуется каждые 6 месяцев или после синтеза 500 заранее калибровки).