В практическом применении химическая светоизлучающая гелевая система визуализации в области молекулярной биологии, которая часто используется для количественного и качественного анализа биологических макромолекул, таких как ДНК, РНК и белки. Например, в исследованиях экспрессии генов обнаружение фрагментов нуклеиновых кислот, отмеченных конкретными светоизлучающими субстратами, позволяет точно определить уровень экспрессии генов и понять транскрипционную активность генов в различных физиологических состояниях. В белковых исследованиях система может помочь исследователям определить молекулярную массу, чистоту и относительное содержание белка в различных образцах, обеспечивая важную основу для функциональных исследований белка и диагностики заболевания.
Кроме того, они играют важную роль в разработке лекарств. Он может использоваться для мониторинга взаимодействия лекарств с биологическими молекулами и оценки эффективности и безопасности лекарств. Наблюдая за световыми изменениями специфических белков в клетках после обработки лекарств, исследователи смогли получить представление о механизмах действия лекарств, отобрать кандидатов на лекарства с потенциальным терапевтическим эффектом и ускорить процесс разработки лекарств.
Методы калибровки системы получения изображений с использованием химического люминесцентного геля:
1. Калибровка интенсивности света:
- Использование стандартного источника света: размещение стандартного источника света с известной интенсивностью света в поле зрения системы визуализации, настройка параметров системы визуализации (например, время экспозиции, усиление и т. Д.) для достижения заданного значения яркости стандартного источника света в изображении. Затем образец химической люминесцентности был изображен с использованием этого калиброванного параметра для обеспечения точности измерения интенсивности света.
- Использование химических люминесцентных стандартных веществ: Выберите подходящий химический люминесцентный стандартный материал, интенсивность света которого была точно измерена. Стандартное вещество добавляется в гель или раствор в определенном количестве, чтобы он производил химическую люминесценцию. Калибровка интенсивности света осуществляется путем корректировки параметров системы визуализации, с тем чтобы интенсивность света стандартного вещества в изображении соответствовала известным значениям.
2. Калибровка разрешения:
- Использование контрольно - измерительной карты разрешения: использование специальной контрольно - измерительной карты разрешения для размещения ее в поле зрения системы визуализации, на которой обычно есть полосы или рисунки с различными интервалами. Получение изображений тестовой карты через систему визуализации позволяет оценить разрешение системы, наблюдая расстояние между полосами или детали рисунка, которые могут быть четко различимы на изображении. Если разрешение не соответствует требованиям, его можно улучшить, отрегулировав фокусное расстояние объектива, диафрагму и другие параметры.
- Использование микроскопических образцов: некоторые химически светящиеся образцы, способные наблюдать микроструктуры, такие как гели, содержащие наночастицы, могут использоваться в качестве ориентира для калибровки разрешения. Изображая эти микроскопические образцы, мы наблюдаем структурные размеры, которые можно различить на изображении, чтобы проверить, соответствует ли разрешение системы экспериментальным требованиям.
3. Калибровка однородности:
Тестирование на однородное световое поле: создание однородного химического светоизлучающего поля, например, равномерное распределение соответствующего количества химического светоизлучающего реагента в геле или растворе, что позволяет ему излучать относительно однородный свет по всему полю зрения. Затем это однородное световое поле визуализируется с помощью системы визуализации, которая оценивает однородность системы, анализируя разницу яркости в разных областях изображения. Если вы обнаружите неравномерность яркости, вы можете улучшить однородность, отрегулировав систему освещения (например, распределение яркости светодиодных ламп), оптические характеристики объектива или алгоритмы обработки изображений.
- Корректировка контрастности: путем корректировки параметров контрастности системы визуализации различия между различными областями яркости изображения становятся более очевидными, что повышает осведомленность системы о однородности. В то же время можно использовать функцию коррекции однородности в программном обеспечении обработки изображений для последующей обработки изображений и дальнейшего улучшения однородности.