В микроскопическом мире шифров жизни сложное устройство, известное как электрофорез уровня гексаксаксаксакса, помогает исследователям интерпретировать молекулярную информацию ДНК и РНК со стабильной и надежной способностью к разделению. В качестве одного из базовых устройств лаборатории молекулярной биологии горизонтальный электрофорез агарида выполняет важную задачу разделения и идентификации молекул нуклеиновой кислоты.

01 Принцип работы: молекулярный танец в электрическом поле

Основной принцип горизонтального электрофореза агара основан на синергии зарядового эффекта и эффекта молекулярного сита. Молекулы нуклеиновой кислоты (DNA / RNA) несут отрицательный заряд в растворе выше своей изоэлектрической точки, и при размещении в электрическом поле эти отрицательно заряженные молекулы перемещаются к аноду.

Трехмерная сетчатая структура, образованная агариновым гелем, выполняет роль « молекулярного сита». Под действием электрического поля молекулы нуклеиновой кислоты разных размеров перемещаются в отверстиях геля с разной скоростью: меньшие молекулы перемещаются быстрее, а более крупные - медленнее.

Этот эффект разделения позволяет исследователям определить молекулярный размер фрагментов нуклеиновой кислоты по их расположению на геле и определить молекулярную массу подлежащего измерению образца по сравнению с известными стандартными продуктами, скорость миграции обратно пропорциональна относительной молекулярной массе.

02 Дизайн приборов:

6 Уровень агарина электрофорез в дизайне включает в себя ряд практических инноваций. Его мостовая конструкция эффективно экономит количество буферной жидкости, обеспечивая равномерное распределение электрического поля. Прозрачная конструкция с открытой крышкой облегчает как охлаждение, так и наблюдение за электрофорезом в реальном времени во время эксперимента.

Электродная система является основным компонентом электрофореза, продукт Liui использует платиновую проволоку с чистотой ≥99,95%, чтобы обеспечить отличную электропроводность и долговечность. Электрическая рама спроектирована как съемная, удобная для очистки и ремонта, продлевающая срок службы оборудования.

Что касается характеристик безопасности, то электрофорез Liui оснащен высокогибким проводом и конструкцией безопасности отключения с открытой крышкой для обеспечения безопасности работы. Гелевый лоток имеет флуоресцентную линейку, которая облегчает наблюдение и запись результатов. Корпус изготовлен из поликарбонатного литья, высокотемпературного и не деформированного, без риска утечки.

Серия продуктов и технические параметры

Предлагаются различные типы горизонтальных электрофорезов агара для удовлетворения различных экспериментальных потребностей. Тип DYCP - 31CN имеет габариты 260×116×76 мм, спецификации гелевой пластины 100×70 мм или 50×70 мм, общая емкость буфера около 260 мл.

Тип DYCP - 31DN более разнообразен и может быть изготовлен из четырех типов гелей разных размеров: 120×120 мм (большой клей), 120×60 мм (широкий клей), 60×120 мм (длинный клей) и 60×60 мм (маленький клей). Этот многоразмерный выбор позволяет ему адаптироваться к различным потребностям.

Тип DYCP - 32A представляет собой электрофорез среднего размера, габарит 300 × 162 × 110 мм, спецификация гелевой пластины 160 × 100 мм, общая емкость буфера 650 мл. Модель оснащена платиновым электродом и симметричным электродом, расстояние между электродами фиксировано на 10 см, может выводить 0 - 150В стабильное напряжение постоянного тока, погрешность равномерности электрического поля составляет 5%, чтобы обеспечить четкое разделение полосы.

04 Операционный процесс: от клея до изображения

Процесс работы электрофореза на уровне агара начинается с подготовки геля. Прежде всего, нужно добавить в электрофоретический буфер (обычно TAE или TBE) умеренное количество агаринового порошка, охладить до 50 - 60°C при нагревании и растворении, налить в клеевую форму и вставить гребень.

После того, как гель застыл, расческа удаляется, чтобы сформировать отверстие для проб. При вытягивании гребенки следует обратить внимание на то, чтобы сначала слегка наклониться, чтобы вытащить сторону, а затем удалить ее в целом, чтобы избежать разрушения отверстия для добавления проб. Разложите гель в электрофорез, добавьте в него пропитанный гель буферной жидкостью, уровень жидкости должен быть выше поверхности геля на 1 - 2 мм.

Далее идет подготовка образца и взятие образца. После смешивания образца нуклеиновой кислоты с верхним буфером в отверстие добавляется микродетектор. Глицерин или тростниковый сахар в верхних буферных растворах увеличивают плотность образца, в результате чего образец оседает на дне отверстия с добавлением образца; Отмеченные красители (например, бромфеноловый синий) используются для индикации электрофореза.

Параметры электрофореза должны быть скорректированы в соответствии с экспериментальными потребностями. Обычно напряжение устанавливается на 5 - 10 В / см (длина геля), время электрофореза 30 - 120 минут. При подключении к источнику питания следует обратить внимание на полярность электрода: конец отверстия для проб принимает отрицательный полюс, а другой - положительный.

Наконец, наблюдение и анализ результатов. После электрофореза гель должен быть окрашен красителем нуклеиновой кислоты (например, EB или SYBR Green), а затем наблюдаться и фотографироваться в ультрафиолетовой гелевой системе визуализации. По сравнению с DNA / RNA Marker можно определить размер и содержание фрагментов нуклеиновой кислоты в образце.

5 Сценарии применения: многодисциплинарные базовые инструменты

В геномных исследованиях для разделения и идентификации фрагментов ДНК, раскрывающих структуру и функции генома, использовался электрофорез уровня акарицидов. В области клинической диагностики также не обойтись без этого инструмента. Благодаря электрофорезу агара на сыворотке крови, моче и других образцах можно быстро и точно обнаружить маркеры заболевания и улучшить раннюю диагностику заболевания. В эксперименте по клонированию генов и построению носителей модели, такие как DYCP - 32A, могут проверить эффективность ферментативного сдвига и целостность продукта, обеспечить успешность последующих экспериментов по соединению и преобразованию и являются « контролерами » экспериментов по клонированию генов. В области преподавания удобство работы электрофореза и стабильность результатов делают его идеальным выбором для экспериментальных курсов молекулярной биологии в колледжах и университетах, помогая студентам освоить принципы электрофореза и экспериментальные технологии.