Строгое соблюдение вышеуказанных эксплуатационных норм может значительно повысить плотность бактерий (обычно до OD600 = 8 - 12), урожайность продуктов и срок службы оборудования. На практике необходимо установить стандартизированный процесс в сочетании с физиологическими характеристиками конкретных штаммов и вести журнал операций для ретроспективной оптимизации.

Ниже приводятся подробные сведения об использовании жидких штаммов и ключевые моменты:

I. Предварительная подготовка и обработка тары

1. Выбор тары и стерилизация

Предпочтение отдается треугольным бутылкам (обычно 250 - 500 мл) или лобовым ферментерам, наполняемым в пропорции, не превышающей 70% объема тары, в зависимости от объема культивирования. Стеклянная посуда должна быть стерилизована паром высокого давления 121°C в течение 30 минут, пластиковая бутылка может быть подвергнута фумигации эпоксиэтаном, чтобы избежать остаточных ингибиторов, влияющих на рост бактерий.

2. Составление питательных сред

Настройка подходящих питательных сред по свойству штамма (например, питательная среда LB для кишечной палочки), регулируя начальное значение pH (общая бактерия pH6.8-7.2, микобактерия). При необходимости обогащения определенных метаболитов могут добавляться индукторы или прекурсоры.

II. Нормы вакцинации и погрузки

1. Асептическая операция

Завершение вакцинации в шкафу биологической безопасности, удаление хлопчатобумажных пробок после того, как пламя сожгло отверстие бутылки, доступ к умеренному количеству штаммов (около 5% - 10% вакцинации), быстрое закрытие и переход через окно доставки в качалку. Обратите внимание, что продолжительность работы контролируется в пределах эффективного диапазона пламени алкогольной лампы.

2. Симметричная балансированная погрузка

Контейнеры, содержащие бактериальную жидкость, симметрично помещаются на качалку, чтобы обеспечить равновесие нагрузки. Эксцентрическая загрузка может привести к аномальной вибрации двигателя и сократить срок службы машины. При культивировании большой емкости рекомендуется использовать блок веса для заполнения свободных мест.

Настройка параметров и мониторинг

1. Контроль температуры

В соответствии с оптимальной температурой роста штамма (например, плесень 30°C, термофильная 55°C), активируйте функцию подогрева, чтобы разница температур в полости тела составляла ±0,5 °C. При длительной эксплуатации фактическая температура проверяется каждые 4 часа, чтобы избежать гибели бактерий из - за отказа термостата.

2. Регулирование оборотов

Принимая во внимание эффективность растворения кислорода и повреждение сдвига: обычные аэробные бактерии установлены на 200 - 300 rpm, шелковые грибы могут быть настроены ниже 150 rpm; Анаэробные культуры должны быть снижены до 80 - 120 rpm и заполнены азотом для замещения газа. Наблюдайте за образованием пеноматериалов и при необходимости добавляйте пеногасители.

3. Управление временными процедурами

Используйте стратегию сегментного контроля времени: период задержки (0 - 6h) низкоскоростная адаптация, логарифмический период поднимается до целевой скорости вращения, период стабилизации снижает скорость, чтобы продлить фазу образования ферментов / спор. Установите программу замедления на 15 минут вперед, чтобы предотвратить внезапную остановку, вызывающую вихревой удар.

IV. Управление операционным процессом

1. Проверка состояния

Каждые часы проверяется следующее: (1) ослабевает ли крепление; · Открытость выхода конденсата; Изменение высоты уровня жидкости в бутылке (определение скорости испарения); Появление необычного звука или запаха.

2. Контроль времени пополнения

Используя стратегию прерывистого потока плюс, источник углерода / азота дополняется стерильным силиконовым шлангом, когда электрод DO показывает резкое падение растворенного кислорода. Объем добавки не превышает 10% от рабочего объема в один раз, избегая мутаций осмотического давления.

3. Предотвращение загрязнения и борьба с ним

Было обнаружено, что аномальное повышение мутности немедленно прекратило культивирование, и зеркальное обследование образцов подтвердило загрязнение. При серьезном загрязнении внутреннюю стенку качающегося станка следует протереть дезинфицирующим раствором, а затем использовать ультрафиолетовое излучение в течение 30 минут.

V. Сбор урожая и переработка

1. Методы отбора проб

Для предотвращения возмущения донных отложений используются сифонный метод или боковой отбор проб шприцем. В ходе взвешивания до и после взятия проб регистрируются изменения в сыром весе, которые преобразуются в кривые накопления биомассы.

2. Обработка отходов

Контейнер под давлением должен быть открыт после снижения давления, а культуры, содержащие патогенные факторы, должны быть выброшены через 30 минут после инактивации при температуре 121°C. Металлические приспособления пропитаны и стерилизованы 75% этанолом, пластиковые детали заменяются специальными мешками для мусора, герметично выбрасываемыми.

3. Техническое обслуживание оборудования

Ежемесячная очистка фильтра вентилятора от накопления пыли, ежеквартальный ремонт эластичности приводного ремня. Долгое время без использования опорожнять резервуары для воды и наносить силиконовую антикоррозионную защиту, цифровой дисплей с защитным экраном от пыли.