Полностью автоматизированная система иммунопринтинга белков (WesternBlotting System) является эффективным инструментом для обнаружения и количественной оценки конкретных белков в биологических образцах. Система сочетает в себе несколько автоматизированных технологий для повышения повторяемости, точности и эффективности экспериментов. Ниже приведены технические детали полностью автоматизированной системы гибридизации белкового иммуноотпечатка.
I. СОСТАВ СИСТЕМЫ
блок подготовки образцов
Модуль обработки проб: включает в себя крекинг, обогащение и разбавление проб, обычно оснащенных центрифугами и ультразвуковыми дробилками.
Модуль количественного анализа: определение концентрации белка с помощью спектрофотометра или другого аналитического оборудования.
Электрический элемент
Гели электрофорез оборудование: полностью автоматические системы обычно включают электрофорез, который автоматически загружает образцы в полиакриламидный гель и контролирует условия электрофореза (ток, напряжение, время и т.д.).
Модуль переноса
Трансмембранное устройство: перенос белка после электрофореза на PVDF или нитратную целлюлозу путем электрического или мокрого переноса. Полностью автоматизированная система может точно контролировать время передачи и напряжение.
Закрытые и инкубационные ячейки
Система инжекции закрытой жидкости: используется для предотвращения неспецифического связывания, автоматического добавления закрытой жидкости и инкубации.
Модуль инкубации антител: автоматически добавляются один и два сопротивления для обеспечения равномерного инкубации.
Мойка
Автоматизированная система промывки: путем перекачки моющего буфера автоматически проводится многократная промывка мембраны для удаления несвязанных антител.
Контрольный блок
Системы реакции цвета: модули обнаружения, которые обычно интегрируются в химическую люминесценцию или колориметрию, автоматически добавляют субстрат и контролируют реакцию.
Система визуализации: камера с высоким разрешением используется для захвата изображений белковых поясов и последующего анализа.
Программное обеспечение для анализа данных
Аналитическое программное обеспечение, подключенное к устройству, автоматически обрабатывает данные, включая количественную оценку белка, анализ полос и вывод результатов.
II. Принцип работы
Принцип работы полностью автоматизированной системы иммунопечати белка можно разделить на следующие этапы:
Подготовка образцов
Белки извлекаются из клеток или тканей и их концентрация определяется количественными методами.
Электрофоретическое разделение
Образцы были подвергнуты электрофорезу SDS - PAGE в полиакриламидном геле, чтобы выделить различные белки в зависимости от размера белка.
Процесс перехода
Выделенные белки переносятся через электрическое поле на мембрану, образуя белковый след.
Закрытие и инкубация
Используйте закрытую жидкость для обработки пленки, чтобы предотвратить неспецифическое связывание, а затем последовательно высиживайте один и два сопротивления.
Шаги стирки
Несколько раз промывайте пленку, чтобы удалить несвязанные антитела и уменьшить фоновый шум.
Обнаружение и визуализация
Добавьте субстраты для ярко выраженных цветовых реакций, используя систему визуализации для захвата изображений белковых полос.
Обработка данных
Обработка изображений с помощью аналитического программного обеспечения, количественное определение уровня экспрессии белка и создание отчетов.
III. Преимущества технологии
Высокий поток
Автоматизированные системы способны одновременно обрабатывать несколько образцов, повышать эффективность экспериментов и подходят для массового скрининга.
Сильное повторение
Автоматизация уменьшает человеческие ошибки и повышает повторяемость и надежность результатов экспериментов.
Управление данными
Программное обеспечение для анализа данных позволяет автоматизировать обработку и регистрацию данных и облегчает архивирование и последующий анализ данных.
Эффективность времени
Автоматизация процесса значительно сокращает время эксперимента и позволяет исследователям быстрее получать результаты.
Точное управление
Каждый параметр в системе (например, температура, время, концентрация и т. Д.) можно точно контролировать, оптимизируя экспериментальные условия.
IV. Области применения
Фундаментальные исследования: для исследований белковых функций, анализа каналов передачи сигналов и так далее.
Клиническая диагностика: для обнаружения и мониторинга маркеров заболевания.
Разработка лекарств: оценка влияния лекарств на экспрессию белков.
Генетически модифицированные растения и исследования на животных: обнаружение экспрессии трансгенных белков.
резюме
Полностью автоматизированная система иммунопринтинга белка значительно повышает эффективность и точность обнаружения белка, интегрируя различные автоматизированные технологии. Он широко используется в исследованиях в области наук о жизни и клинической диагностики и стал важным инструментом в современном биологическом анализе. Благодаря постоянному развитию и оптимизации эти системы будут способствовать дальнейшему прогрессу исследований в области биомедицины.