Метод анализа подержанного масс - спектрометра с высоким разрешением в основном вращается вокруг его основных функций, включая подготовку образцов, работу прибора, сбор и обработку данных и другие аспекты, в то же время необходимо оптимизировать в сочетании с его характеристиками с высоким разрешением, следующие конкретные методы анализа:
I. Подготовка образцов
Адаптация состояния образца: в зависимости от того, является ли образец твердым, жидким или газом, выберите подходящий способ обработки. Например, если жидкий образец имеет низкую чистоту, необходимо удалить примеси путем фильтрации, экстракции, обогащения и т. Д.; Если твердые образцы термически стабильны и могут быть измельчены в порошок и растворены, нерастворимые твердые тела могут нуждаться в деривативах или использовании технологии прямого отбора проб твердых веществ; Образцы газа обычно обогащаются либо непосредственно через пробоотборный клапан газа, либо с помощью адсорбционно - десорбционного устройства.
Выбор растворителя: выберите растворитель, совместимый с источником ионизации, например, полярный растворитель, обычно используемый источником ESI, и неполярный растворитель, обычно используемый источником EI, чтобы избежать реакции растворителя с образцом или образования мешающих ионов.
Обработка биологических образцов: Для биологических образцов (например, крови, мочи) необходимо удалить крупные молекулярные помехи, такие как белки, такие как метод осаждения, центробежная фильтрация.
II. Эксплуатация приборов
Загрузочный подогрев: Загрузка в порядке инструкции прибора, как правило, сначала включить вакуумный насос, питание, затем включить хост и программное обеспечение рабочей станции, чтобы убедиться, что вакуумная система достигла рабочего вакуума, источник ионов, анализатор качества и другие компоненты стабильны, время подогрева обычно от 30 минут до 2 часов.
Параметры источника ионизации:
Выберите способ ионизации: выберите способ ионизации в соответствии с типом образца, таким как EI, ESI, MALDI и так далее.
Настройка параметров: Установите температуру источника ионов, ионизирующее напряжение, скорость воздушного потока (например, оболочечный газ ESI, вспомогательный газ) и так далее. Например, источник EI устанавливает электронную энергию (обычно 70 эВ), температуру источника ионов (150 - 300 °С); Источники ESI устанавливают напряжение распыления (3 - 5 кВ), температуру capillary (200 - 350 °С), давление распыленного газа.
Параметры анализатора качества:
Диапазон сканирования: Установите диапазон сканирования (диапазон m / z, например, 50 - 1000).
Скорость сканирования и разрешение: в соответствии с выбором спроса, качество требует высокого разрешения, количественное требует быстрого сканирования. Масс - спектрометр с высоким разрешением обеспечивает пиковые значения m / z до 4 - 5 десятичных знаков, что помогает идентифицировать соединения с более высокой степенью определенности и достоверности.
Параметры подключенного устройства: Если используется с хроматографией (например, GC - MS / LC - MS), необходимо синхронизировать настройки хроматографических условий (например, температура столба, скорость потока, соотношение фаз потока), чтобы обеспечить соответствие хроматографического разделения и масс - спектрометрического обнаружения.
III. Сбор и обработка данных
Режим ввода:
хроматографическое введение: образец сначала отделяется газовой хроматографией (GC) или жидкой хроматографией (LC), а затем входит в масс - спектрометрию через интерфейс, подходящий для сложных смесей (например, пищевых продуктов, образцов окружающей среды).
Автоматический ввод проб: серийные образцы могут последовательно вводиться с помощью автоматического ввода проб, что повышает эффективность и уменьшает человеческие ошибки.
Сбор данных: Запустить функцию « сборки» программного обеспечения рабочей станции, прибор автоматически сканирует ионы образца на отношение массы к грузу, создавая масс - спектрограмму в реальном времени (поперечная ось m / z, продольная ось - ионная прочность). Для количественного анализа необходимо сначала собрать масс - спектральный сигнал стандартного продукта, установить стандартную кривую (соотношение интенсивности и концентрации ионов), а затем проанализировать неизвестные образцы.
Обработка данных:
Качественный анализ: определение типов соединений путем сопоставления стандартных спектральных библиотек (например, библиотеки NIST) с характерными ионными пиками (например, молекулярными пиками ионов, пиками ионов фрагментов); Масс - спектрометрия с высоким разрешением может непосредственно дать точную молекулярную массу, вспомогательную структурную идентификацию.
Количественный анализ: отбор характерных ионов целевого соединения (например, пары родительских ионов - субионов, применимых к масс - спектру тройного квадрупольного стержня), расчет концентрации образца на основе стандартной кривой.
Проверка результатов: Экспорт результатов анализа (например, масс - спектрограмма, отчет о концентрации), проверка результатов (например, исключение ложноположительного, подтверждение пиковой чистоты).
IV. Особые соображения, касающиеся масс - спектрометров с высоким разрешением
Оптимизация разрешения: Основное преимущество масс - спектрометра с высоким разрешением заключается в его высоком разрешении, поэтому его необходимо в полной мере использовать в процессе анализа. Например, при различении соединений аналогичной массы масс - спектрометр с высоким разрешением может обеспечить более точные измерения массы, которые точно идентифицируют соединения.
Отношение чувствительности к сигналу / шуму: Масс - спектрометры с высоким разрешением обычно имеют более высокую чувствительность, но при анализе проб с низкой концентрацией все еще необходимо обратить внимание на отношение сигнала / шума. Соотношение сигнала и шума может быть улучшено путем оптимизации параметров прибора (например, температуры источника ионов, ионизирующего напряжения и т. Д.) и обработки образцов (например, обогащения, очистки и т. Д.).
Техническое обслуживание и калибровка: подержанные масс - спектрометры с высоким разрешением могут испытывать проблемы со снижением производительности из - за более длительного использования и поэтому требуют регулярного обслуживания и калибровки. Например, очистка входной системы, замена стареющих компонентов, калибровка точности отношения массы к лотосу и так далее.