Клетки выделяют различные типы мембранных пузырьков во внеклеточной среде. Эти мембранные пузырьки называются внеклеточными пузырьками (EV), включая экзосомы и микропузырьки. Экзосомы представляют собой относительно небольшие внеклеточные пузырьки (30 - 150 нм), которые переносят между клетками крупные биологические молекулы, такие как нуклеиновые кислоты, белки, ферменты и липиды, и являются важными моделями межклеточной связи. Кроме того, они могут использоваться в качестве биомаркеров различных заболеваний, а также в качестве естественных систем доставки лекарств для следующего поколения терапевтических агентов.

В этой статье мы описываем способ быстрого и простого разделения экзосом из жировых стволовых клеток путем сочетания высокоскоростных и сверхскоростных центрифуг. Клетки в Bioblu ® 0.3c Культивируется в одноразовом биореактивном резервуаре и производится DASbox ® Мини - биореактор системы управления. Мини - биореакторная система DASbox может культивировать большое количество стволовых клеток, чтобы получить высокую урожайность экзосом. Затем мы очистили условную среду с помощью центрифуги CR22N. Это высокоскоростная центрифуга с RCF до 32300 x g. В этой статье мы используем фиксированный угловой поворот R15A, который может одновременно вмещать 10 x 50 мл и 10 x 15 мл конических донных труб. Для дальнейшего обогащения экзосом мы использовали сверхскоростные центрифуги CP100NX с максимальным RCF 803000 x g и горизонтальные роторы P32ST, способные вмещать центрифуги 6 x 40 ml. Кроме того, по сравнению с контрольной группой, которая не использовала жидкость на основе сахарного тростника, чистая и однородная внешняя оболочка может быть быстро выделена путем использования жидкости на основе сахарного тростника на этапе сверхцентрифугирования. На протяжении всего процесса центрифугирования мы использовали роторы большой емкости, тем самым уменьшая повторяющиеся центробежные шаги и сокращая время разделения экзосом до 4 часов быстрее, чем другие методы разделения, такие как осаждение или фильтрация.