Помощь в публикации высококачественных документов

Для оценки способности ряда наночастиц на основе C3G, связываемых с соответствующими антагонистами или агонистами, пересекать гематоэнцефалический барьер, опосредованное воздействие рецепторов, а также противовоспалительные и антиоксидантные эффекты используется модель BBB. (Включая наночастицы CC, не имеющие рецепторных целевых рецепторов; наночастицы CCS, CCSQ, CCS18, CCBD, CCNC, модифицированные антагонистами) Наночастицы, модифицированные агонистом CCU4, CC1V

А) С помощью флуоресцентного мониторинга Cy3 клетки PC12 в нижней полости были интернализированы различными препаратами, что свидетельствует об успешном проникновении гематоэнцефалического барьера. Кроме того, группа антагонистов имеет значительно более сильные флуоресцентные сигналы, указывающие на то, что присутствие антагонистов способствует трансклеточному транспортированию через рецепторы;

В) С помощью мониторинга флуоресценции Cy3 клетки верхней полости bEnd.3 получают CC, CCS, CCSQ, CCS18, CCU4. Конкурентные ингибиторы поглощения наночастиц оцениваются путем совместного инкубации с соответствующими комбинациями свободных антагонистов. Значительное увеличение поглощения эндотелиальными клетками наночастиц, модифицированных антагонистами, подтверждает эффективное проглатывание через рецепторы;

C - F) Относительный уровень экспрессии факторов некроза опухолей - америция и аргинина - 1 в клетках PC12 после обработки свободными рецепторами или различными нанопрепаратами. Группы антагонистов значительно подавляли экспрессию воспалительного фактора TFN - α и повышали экспрессию противовоспалительного фактора Arg - 1, указывая на то, что они обладают иммуномодулирующим противовоспалительным действием одновременно с мишенью;

G) Уровень ROS в клетках PC12 после OGD и последующей обработки CCA оценивается путем окрашивания DCFH - DA. Значительное снижение флуоресценции, связанной с ROS, в группе антагонистов указывает на их сильное антиоксидантное действие.

Используя модель BBB клеточной имплантации, были изучены пути переноса и защитные эффекты наночастиц, модифицированных антагонистами воспалительных рецепторов, представленными CCS, на эндотелиальные клетки, а также восстановление целостности гематоэнцефалического барьера и его проницаемости после терапевтических вмешательств.

A) схема модели BBB, построенная с использованием клеточной чашки Петри; Схема пути транспортировки CCS в клетках (бегство лизосом, клеточная рвота, опосредованная гормональной матрицей, и реакция восстановления гематоэнцефалического барьера);

В) иммунофлуоресцентное окрашивание воспалительных рецепторов Tx2AR на клеточной мембране bEnd.3 и их сосуществование с CC и CCS. CCS демонстрирует более высокую интенсивность сигнала, указывая на антагонистический опосредованный механизм, который поддерживает передачу наночастиц, улучшая межклеточное действие трансгематоэнцефалического барьера;

C - E) Сфокусированные изображения показывают, что CCS сосуществует с лизосомами, горькими и митохондриями в эндотелиальных клетках. Подтвержден двойной путь транспортировки CCS: часть CCS NPS покидает лизосомные камеры для восстановления эндотелиальной структуры, а другая часть доставляется через тело Горького в нейроны, чтобы играть антиоксидантное и противовоспалительное действие;

F) Количественный анализ результатов экспериментов на рис. C, D и E;

G) Измерение трансэндотелиального клеточного сопротивления (TEER), отражающее целостность однослойного барьера bEnd.3. Группа CCS демонстрирует значительную восстановительность;

H) Изображение модели заживления царапин BECs. Реконструкция эндотелия группы CCS превосходит все остальные группы.