-
Электронная почта
jhxie9@yanjinyq.com
-
Телефон
13808898943
-
Адрес
Торговая площадь Хэнфэн, Цзиньша, район Байюнь, Гуанчжоу
Guangzhou Yanjin Instrument Equipment Technology Co., Ltd
Исследование влияния амплитуды и скорости возвратно - поступательного стола на эффект стирки Western Blot
Дата:2025-11-21Читать:2
В эксперименте Western Blot (WB) полная промывка мембраны была ключевым шагом в снижении фона и повышении отношения сигнала к шуму.возвратно - поступательный столПоскольку его линейное возвратно - поступательное движение может эффективно способствовать контактному обмену между моющим раствором и поверхностью мембраны, он широко используется в первом / втором противоинкубационном цикле стирки TBST. Однако настройка амплитуды и скорости напрямую влияет на эффективность стирки и целостность мембраны.
Эксперименты показали:
Слишком малая амплитуда (< 10 мм): недостаточное возмущение жидкости, много остатков антител, высокий фон;
Слишком большая амплитуда (> 30 мм): мембрана легко складывается, фрикционный кронштейн, что приводит к разрыву или выпадению полосы;
Слишком низкая скорость (< 30 rpm): медленная скорость обмена, необходимо увеличить время стирки;
Высокая скорость (> 80 rpm): создает турбулентность с пузырьками, которые мешают зоне связывания антигена - антитела.
Идеальное сочетание параметров: амплитуда 20 - 25 мм, скорость 50 - 60 rpm. В этом случае 3 × 5 минут стирки снижают неспецифическое связывание до низкого уровня, а пленка PVDF или NC остается ровной и невредимой. Сравнительные тесты показывают, что четкость целевой полосы при этом параметре увеличивается на 30%, а значение серого фона уменьшается более чем на 50%.
Кроме того, направление возвратно - поступательного движения должно быть параллельным длинной стороне мембраны, избегая поперечного растяжения. Использование специального лотка WB может фиксировать положение мембраны, чтобы предотвратить дрейф.
Стоит отметить, что фактические амплитуды возвратно - поступательных станков разных брендов могут иметь номинальные отклонения, и пользователям рекомендуется использовать линейку или видео замедленного действия для проверки. Некоторые новые устройства уже предлагают « специальный режим WB», который автоматически соответствует лучшим параметрам.
Итого, рациональные настройкивозвратно - поступательный столАмплитуда и скорость являются недорогими и эффективными стратегиями для повышения повторяемости и качества изображений Western Blot, которые заслуживают внимания и стандартизации экспериментаторов.