« Baiheng Technology Class» Оптимизация программы реакции PCR
Дата:2025-06-17Читать:1
Болезнь воды, а что касается дрейфующих, то и потенция "-" Искусство войны внуков ". Сказал, что пока скорость достаточно быстрая, камень может плыть по воде. В прошлом месяце мы говорили о снижении температуры (Оптимизация процедуры реакции PCRОптимизация результатов PCR, сегодня в другом направлении, чтобы поговорить о том, как сжать время реакции PCR.
Прежде чем говорить о длительности сжатия, сначала нужно контролировать температуру пробирки (Tube) / модуля (Block); Общие / быстрые модели Несколько концепций для введения. Ниже приведен пример модели Q9606.
Диаграмма 1
Модуль контроля температуры:При повышении и падении температуры в зависимости от температуры модуля в реальном времени.
Контроль температуры в пробирке:При повышении и понижении температуры реакции в зависимости от температуры реагента в реакционной трубе в реальном времени.
Диаграмма 2
Диаграмма 3
После того, как экспериментальное редактирование будет завершено, щелчок кнопки запуска всплывает подсказка (как на рисунке 2), выбирая быстрый или обычный режим.
В качестве примера можно привести процедуру на рисунке 3:
Быстрый режим:Прибор работает со скоростью подъема и падения 8 °C / с, что указывает на полный эксплуатационный эксперимент скорости подъема и падения.
Обычная модель:Прибор работает со скоростью подъема и падения 4 ° C / s, что указывает на половину эксплуатационного эксперимента скорости подъема и падения.
Различные сценарии применения выбирают различные комбинации режимов реакции, и ниже мы рассмотрим, как отлаживать реагенты быстрого реагента.
Во - первых, параметры работы прибора выбирают комбинацию быстрого режима + модульного контроля температуры для сжатия времени реакции. Во - вторых, разумно распределить время дегенерации и удлинения отжига в цикле при условии, что общая продолжительность не изменится. Наконец, на основе вторичного отбора доступных реакционных процедур производится тонкая настройка, которая еще раз сокращает продолжительность реакционного сегмента или, если это допускается общим временем, соответствующим образом продлевает его для достижения эффекта реакции.
Поскольку амплификационные ферменты, используемые быстрыми реагентами, имеют более высокую скорость расширения по сравнению с ферментами обычных реагентов, они могут быть значительно сжаты при установке длительной реакции удлинителя отжига. При длительной реакции деформации сжатия следует обратить внимание, потому что выбран модульный контроль температуры, если время дегенерации слишком короткое, может привести к фактической температуре реагента менее 95°C или длительности поддержания 95°C, что приводит к недостаточному решению двойной цепи шаблона, что, в свою очередь, влияет на накопление сигнала, поэтому время фазы реакции дегенерации не должно быть чрезмерным.
Серия Q9600 будет доступнаСамый быстрый 8°C / secСкорость подъема и падения температуры, а также функция градиента изотермии (как показано на рисунке 4), чтобы удовлетворить разработку обычных реагентов, обнаружение также обеспечивает хорошую платформу для быстрого реагента.