Первый шаг:Полипептидный синтезаторПодготовка к операции - закладка фундамента успеха

Инспекция окружающей среды и оборудования

Выберите сухое, чистое, стабильное с температурой место (20°C ±5 °C), чтобы избежать влаги, высокой температуры или пылевых помех.

Обеспечить, чтобы установка прибора была плавной, напряжение питания, частота соответствовали требованиям оборудования (например, для таблицы давления сжатого воздуха « AIR» требуется 60 - 100psi, для таблицы « N2» требуется 5 - 10psi).

Проверьте, плотно ли соединены резервуары для хранения раствора и газопроводы, чтобы предотвратить утечку.

Подготовка материалов и реагентов

Приготовьте аминокислоты высокой чистоты, реактивы для активации (например, HBTU), растворители (DMF, DCM) и смолы, чтобы обеспечить отсутствие примесей.

Реакторы взвешиваются в соответствии с синтетической схемой и смешиваются строго пропорционально (например, 3 - кратное превышение аминокислот для сцепления реакций).

Добавьте смолу в реактор, высушите после растворения DCM и удалите примеси с помощью DMF.

Настройка и калибровка параметров

Введите полипептидные последовательности, установите условия реакции (температура, время, отношение растворителя).

Пример: снятие защиты Fmoc (20% пиперидин / DMF, 5 минут × 2 раза); Связанная реакция (3 - кратное превышение аминокислот, 1 час).

Запустите программу самоконтроля оборудования, откалибруйте температуру, давление, иглу отбора жидкости и другие параметры, чтобы обеспечить точность датчика.

Шаг 2: Операция синтетического процесса - анализ основных шагов

Запустить синтетическую программу

Включите источник питания синтезатора и переключатель сжатого воздуха и запустите предустановленную программу.

Инструмент автоматически завершает снятие защиты (например, удаление группы Fmoc), сцепление (соединение аминокислот), цикл стирки, полный мониторинг температуры реакции, давления и pH.

Ключевые оперативные элементы

Де - протекция: удаление защитной группы аминокислот с использованием щелочных растворителей (например, 20% пиперидина / DMF) требует повторения 2 раз для обеспечения тщательности.

Связанная реакция: активированный раствор аминокислоты вводится в реакционную камеру, пополняется DMF до соответствующей концентрации, перемешивается в течение 1 часа, чтобы сформировать пептидные связи.

Промывание: промывание DMF после каждой реакции, удаление непродуктивных веществ и побочных продуктов, уменьшение накопления примесей.

Мониторинг и настройка в реальном времени

Процесс реакции контролируется с помощью УФ - абсорбции или масс - спектрометрического анализа, чтобы гарантировать, что каждый шаг выполняется в соответствии с ожиданиями.

При обнаружении неравномерности реакционной жидкости отрегулируйте скорость смесителя; Если температура аномальная, проверьте положение нагревательного диска.

Шаг 3: Постсинтетическая обработка и обслуживание - обеспечение долгосрочной стабильности

Сбор и очистка продуктов

Добавьте крекинговый раствор (например, TFA / вода / триизопропилсилан = 95: 2.5: 2.5), перемешайте при комнатной температуре в течение 2 часов, чтобы разложить полипептиды от смолы.

Фильтр удаляет смолу, концентрированный крекинг осаждает грубые пептиды эфиром, через центрифугу, промывку, чтобы получить твердые продукты.

Используйте высокоэффективную жидкостную хроматографию (HPLC) для очистки, удаления примесей и получения полипептидов высокой чистоты (> 95%).

　　Полипептидный синтезаторОчистка и техническое обслуживание оборудования

Мгновенная очистка: сразу после синтеза очистите реактивный контейнер, иглу, насосную головку и трубопровод этанолом или деионизированной водой, чтобы избежать коррозии оборудования остаточным реагентом.

Периодическое обслуживание: ежемесячная замена изношенных деталей (например, уплотнительных колец, игл), калибровка точности датчика; Ежеквартально смазывать механическую часть, чтобы поддерживать бесперебойную работу.

Долгосрочное хранение: если оборудование простаивает, после очистки демонтаж и хранение в сухом, вентиляционном месте, чтобы предотвратить ржавчину или влагу.

Выявление и регистрация неисправностей

Общие проблемы: утечка жидкости из головки насоса (замена уплотнительного кольца), высокая температура реакционного контейнера (регулировка положения нагревательного диска), невозможность включения оборудования (проверка питания и панели управления).

Запись и отчет: детальная запись каждого шага эксплуатационных параметров (количество реагента, время реакции, температура) и чистоты продукта, создание экспериментального отчета, чтобы обеспечить основу для последующей оптимизации.