I. СОДЕРЖАНИЕМногоугольный лазерный рассеиватель света WyattПодготовка к тестированию

Растворитель готов.

Водная фазовая система: Используйте сверхчистую воду или приготовьте солевой раствор (около 1 л), добавьте 0,02% ингибитора NANnenenebj и отфильтруйте его с помощью фильтрующей мембраны 0,22 мкм.

Органическая фазовая система: использование растворителя класса HPLC, также фильтрованного с помощью фильтрующей пленки 0,22 мкм (импортный реагент обрабатывается в соответствии с фактическими условиями).

Подготовка образцов

Концентрация в соответствии с диапазоном молекулярной массы (количественное кольцо 100 мкл):

Молекулярная масса ~ 1000kDa: 0.5 - 1mg / ml

Молекулярная масса ~ 100kDa: 1 - 2mg / ml

Молекулярная масса ~ 10kDa: 3 - 5mg / ml

Молекулярная масса ~ 5kDa: 5 - 10mg / ml

Образцы должны быть отфильтрованы с помощью фильтра 0,22 мкм или 0,45 мкм или удалены с помощью центрифугирования, по возможности, с использованием проточной фазы.

Контроль приборов

Убедитесь, что подключение к линии электропитания, выключатель питания и коммутатор (для подключения к сетевому сигналу) включены.

Включение и балансировка прибора

Порядок включения

Последовательно включайте насос, цилиндрический термостат (заданная температура), систему подачи проб (ручной / автоматический пробоотборник), детектор аберрации или ультрафиолетового излучения, детектор вязкости, источник питания многоугольного лазерного детектора рассеяния света и компьютер.

Системная промывка и балансировка

Включите насос, промывайте систему сверхчистой водой около 5 минут (насос purge) и выключите клапан purge.

Используйте новейшую систему промывки подвижной фазы (органическая система непосредственно использует подвижную фазу).

Регулируйте скорость потока до 0,1 мл / мин (если подключен детектор вязкости, включите насос после того, как он войдет в рабочий интерфейс, и IP & DP находится в состоянии purge on).

Если в системе не подключена колонка GPC / SEC, скорость потока может быть напрямую настроена до 0,1 - 1,0мл / мин (при отсутствии детектора вязкости клапан purge детектора разницы должен находиться в состоянии « Purge On»).

Если в системе подключена колонка GPC / SEC, начальная скорость потока 0,1 мл / мин должна быть увеличена на 0,1 мл каждые 1 - 2 минуты, скорость потока должна быть скорректирована до 0,4 - 0,5 мл / мин, чтобы полностью сбалансировать систему.

Время равновесия: система водной фазы рекомендуется промыть и сбалансировать на один день раньше и начать испытания на следующий день; Время равновесия органической фазовой системы обычно составляет 3 - 12 часов.

III. Испытательные операции и сбор данных

Сбалансированность системы и базовая стабильность

После того, как система полностью сбалансирована, постепенно корректируйте скорость потока до испытательной скорости.

Регулируйте клапан Purge дифференциального детектора в состояние "Purge Off" и возвращайтесь к нулю (Zero) после стабилизации сигнала.

Метод работы вискозиметра (Visco Star) описан в приложении, где исходный уровень стабилизируется.

Шаблон испытания вызова

Вызовите соответствующий тестовый шаблон в программном обеспечении Astra (рекомендуется использовать Template / Method, созданный инженером по установке).

Одноконтактный образец: File → New → Experiment from Template / Method → My Templates / Methods, выберите соответствующий шаблон испытания.

Автоматический ввод проб: File → New → sample set template / blank sequence → My templates / method, выберите соответствующий шаблон испытания.

Образцы и сбор данных

Переведите входной клапан из "load" в состояние "inject" и введите образец через входную систему.

Программное обеспечение Astra автоматически начинает сбор данных, и после завершения сбора данных программное обеспечение останавливается в соответствии с заданным временем или вручную (Experiment → Stop).

Сохранение данных

После завершения сбора данных нажмите поочередно File → Save as..., чтобы назвать файл и сохранить его.

IV.Многоугольный лазерный рассеиватель света WyattОбработка данных и просмотр отчетов

Процесс обработки данных

Коррекция базиса: двойной щелчок Baseline, галочка LS 11 (угол 90°), настройка базовой конечной точки, чтобы гарантировать базовый уровень, нажмите OK / Apply для сохранения.

Определение пика: Переместите мышь к началу пика, нажмите левую кнопку, чтобы перетащить к точке падения пика, отпустите левую кнопку, чтобы определить область пика, край области микромодуляции, нажмите OK / Apply, чтобы сохранить.

Ввод и нормализация значений d / dc: Введите значение d / dc и выберите normalise (если в шаблоне используется стандартный образец < 50kDa, такой как BSA, dextran, нормализованный в этой системе, повторные действия не требуются).

Просмотр отчета: После завершения вышеуказанных шагов просмотрите отчет, чтобы получить результаты теста.

Корректировка приборов (проводится регулярно)

Корректировка объема задержки: коррекция объема трубопровода между детекторами для обеспечения выравнивания положения вершины, как правило, выполняется инженером - установщиком, и результат сохраняется в шаблоне программного обеспечения Astra.

Коррекция сигнала под углом 90° (коррекция толуола): Получение коэффициента коррекции значений интенсивности света и напряжения при угловом рассеянии 90° рекомендуется ежегодно или каждые полгода.

Восемнадцать угловых нормализованных коррекций: калибровка 17 других детекторов под углом 90° с использованием стандартного продукта Rg < 10 нм (например, правоангидрида ангидрида ангидрида ангидрида ангидрида ангидрида ангидрида ангидрида Декстрана или белого белка BSA сыворотки крупного рогатого скота).