С 1982 года на рынок выходит первый препарат с рекомбинантным белком (первый человеческий инсулин).¹С момента коммерциализации) биофармацевтический сектор стал свидетелем постоянного увеличения количества белковых терапевтических препаратов. Например, моноклональные антитела (mAb), факторы роста, гормоны в настоящее время используются для лечения рака, HIV、 Биотерапевтические препараты для многих заболеваний, таких как рассеянный склероз²А.Сложный процесс производства этих биотерапевтических препаратов включает в себя точную количественную оценку белка для обеспечения эффективности и качества конечной формулы.Кроме того, белки являются ключевыми компонентами различных биомолекулярных тестов для изучения активности ферментов, регулирования экспрессии генов, сигнальных путей и механизмов заболевания. Все лаборатории, которые проводят эти тесты, проводят количественный анализ белков, чтобы выявить сложные биомолекулярные механизмы.

В зависимости от требуемой точности, динамического количественного диапазона, совместимости с потенциальными загрязнителями (моющие средства, восстановители и растворители) и различий между белками, существует множество способов количественной оценки белка. Эти методы включаютИзмерение прямого ультрафиолетового поглощения белка (A)₂₈₀Определение на основе меди (BCA и Lowry), поглощение белково - красительских комплексов (Bradford), определение на основе флуоресценции и более сложные измеренияНапример, измерения ELISA или Western - Blot.

В этом исследовании флуоресцентный метод был выбран на основе его превосходной чувствительности, специфичности и обнаружения белков с низким содержанием, которые особенно подходят для сложных биологических образцов.Использование Perkin Elmer FL 6500 ™ Флуоресцентный спектрометр NanoOrange^®Улучшение флуоресценции, наблюдаемое при неконвалентном взаимодействии флуоресцентных групп с BSA, и построение стандартной кривой.