I. Подготовка к регенерации

　　ultra жидкостная хроматография& Подготовка реагентов: подготовка растворителей хроматографического класса, таких как сверхчистая вода, метанол, ацетонитрил, изопропиловый спирт, а также подходящих бутылок для сбора отходов; Убедитесь, что корпус насоса и входной клапан жидкостной хроматографии не имеют утечки.

Проверка хроматографической колонны: перед регенерацией записывается текущая эффективность хроматографической колонны, пиковые данные, если в колонне есть сильно удерживаемые остатки загрязняющих веществ, необходимо сначала оценить, имеет ли хроматографическая колонна восстановительную ценность.

Безопасные операции: носить перчатки, защитные очки во время работы, чтобы избежать контакта органических растворителей с кожей; Убедитесь, что лаборатория хорошо проветривается.

II. Универсальные шаги регенерации (преимущественно антифазные хроматографические колонны)

Промоечный остаток фазы

Снимите хроматографические колонны и промывайте их сверхчистой водой с низкой скоростью потока (0,2 - 0,3 мл / мин) в течение 30 - 60 минут, чтобы удалить водорастворимые примеси, такие как буферная соль, и предотвратить выделение солей для блокирования наполнителя.

Если в проточной фазе содержится реагент ионной пары, его необходимо промыть 50% раствором метанола в воде в течение 1 - 2 часов, а затем переключить на чистый метанол.

Удаление сильных гидрофобных загрязнителей

Последовательно промывайте хроматографические колонны 100% метанолом, 100% ацетонитрилом, сохраняя скорость потока от 0,3 до 0,5 мл / мин, объем промывки каждого растворителя в 20 - 30 раз больше объема колонны.

Если загрязняющие вещества упрямы, вы можете выбрать промывку изопропиловым спиртом (обратите внимание на высокую вязкость изопропилового спирта, необходимо снизить скорость потока, чтобы предотвратить слишком высокое давление колонны), после промывки с переходом метанола.

Очистка полярных загрязнителей

Для хроматографических колонн, содержащих полярные примеси, промыть смесью метанол - вода (1: 1) в течение 60 минут, а затем промыть чистым метанолом до базовой плавности.

Равновесие после регенерации

Сбалансируйте хроматографическую колонну в фазе потока методом целевого анализа, балансируйте объем не менее чем в 10 раз больше объема колонны, пока исходный уровень не стабилизируется, прежде чем будет проведен анализ проб.

Внимание к регенерации специальных типов хроматографических колонн

Позитивная хроматографическая колонна: промывание растворителем, содержащим воду, запрещено, при регенерации последовательно промывается положительным гексаном, дихлорметаном, этилацетатом уксусной кислоты и, наконец, сохраняется в равновесии с положительным гексаном.

Ионно - обменная хроматографическая колонна: сначала промыть буферным раствором, соответствующим pH, затем промыть деионизированной водой до нейтральности и, наконец, сохранить с буфером, содержащим 5% метанола.

Ручная хроматографическая колонна: приоритет отдается регенеративным растворителям, рекомендованным производителями, избегая использования сильных полярных растворителей и предотвращая разрушение ручной фиксированной фазы.

Проверка и сохранение после регенерации

Проверка производительности:ultra жидкостная хроматографияПосле того, как регенерация завершена, инъекция стандартного продукта проверяет эффект колонны, пиковую симметрию, если пиковая форма улучшается, эффект колонны восстанавливается до более чем 80% от первоначального уровня, что указывает на успешную регенерацию.

Долгосрочное сохранение: антифазная хроматографическая колонна герметизируется чистым метанолом, положительная хроматографическая колонна сохраняется с положительным гексаном, оба конца затягивают заглушки, помещаются при комнатной температуре, светонепроницаемой среде.