Капиллярная хроматографияВо время использования может возникнуть множество проблем, которые могут повлиять на эффект разделения, точность анализа и даже срок службы хроматографической колонны. НижеКапиллярная хроматографияПодробное резюме часто задаваемых вопросов и их решений:
I. Снижение эффективности столбика
Описание проблемы: Способность хроматографической колонны к разделению уменьшается, что проявляется в расширении пиков, снижении разрешения или уменьшении числа теоретических башен.
Возможные причины:
Фиксированная фазовая потеря: высокотемпературное или сильное действие растворителя приводит к выпадению фиксированного фазового покрытия.
Загрязнение колонны: в колонне накапливаются примеси или остатки предварительной обработки проб.
Недостаточное старение колонн: новая колонна недостаточно стареет, остаточные растворители или низкополимеры влияют на разделение.
Механическое повреждение: изгиб колонны, ослабление капюшона или засорение сита.
решение:
Периодическое старение: новые или давно не используемые колонны должны стареть в течение нескольких часов при температуре ниже максимальной эксплуатационной температуры 20 - 30°C.
Избегайте высоких температур: строго контролируйте температуру столбца, избегайте превышения максимальной толерантности к фиксированной фазе.
Очистка проб: удаление твердых частиц и примесей из проб с помощью твердофазной экстракции, фильтрации или центрифугирования.
Замена сита: если оно забито, необходимо заменить новое сито и переустановить цилиндр.
II. Пиковые аномалии
Описание проблемы: Возникновение пиковой асимметрии (перетаскивание или растяжение вперед), расщепляющегося пика или призрачного пика.
Возможные причины:
Чрезмерно большое количество проб: превышение емкости колонны приводит к расширению пиковой формы.
Неправильная технология подачи проб: если коэффициент шунтирования не подходит при подаче проб.
Загрязнение столбов: адсорбция примесей на поверхности фиксированной фазы влияет на перенос массы.
Мертвый объем слишком велик: мертвый объем присутствует в пробоотборнике, детекторе или соединительном трубопроводе.
решение:
Оптимизированный вход: регулировка входного количества в соответствии с емкостью колонны, как правило, для нанообновления до микрообновления.
Усовершенствованная технология отбора проб: корректировка коэффициента шунтирования или использование режима подачи проб без шунтирования.
Очистка хроматографической колонны: обратное промывание хроматографической колонны растворителем (например, метанолом, положительным гексаном) для удаления загрязнения.
Проверьте мертвый объем: убедитесь, что входной пробоотборник, детектор и соединительный трубопровод не имеют утечки или мертвого угла.
III. Изменение сроков хранения
Описание проблемы: время хранения одного и того же соединения в разных партиях или в одной и той же партии нестабильно.
Возможные причины:
Колебания температуры столбика: нестабильность системы контроля температуры приводит к изменению времени удержания.
Нестабильность скорости потока: утечка в газопроводе или ошибка расходомера.
Изменение свойств фиксированной фазы: например, старение фиксированной фазы или загрязнение.
Разница в обработке образцов: непоследовательность этапов предварительной обработки приводит к изменению матрицы образца.
решение:
Стабилизация температуры колонны: использование высокоточной системы управления температурой для обеспечения постоянной температуры колонны.
Проверьте газовые пути: регулярно проверяйте соединения газовых путей и заменяйте стареющие или поврежденные детали.
Регулярное старение: Избегайте чрезмерного старения фиксированной фазы, рекомендуемые условия использования в соответствии с инструкциями.
Стандартизированная обработка образцов: обеспечение последовательности этапов предварительной обработки и уменьшение эффекта матрицы.
Разрыв или утечка хроматографической колонны
Описание проблемы: разрыв хроматографической колонны, ослабление капота или утечка на стыке.
Возможные причины:
Неправильная установка: колонна изгибается или нажимная крышка не затягивается.
Механическое напряжение: цилиндр подвергается воздействию внешних сил во время перевозки или эксплуатации.
Усталость материала: старение материала задней колонны при длительном использовании.
решение:
Правильная установка: убедитесь, что колонна установлена прямо, нажимная крышка затягивается, но без чрезмерной силы.
Избегайте внешних сил: при транспортировке и эксплуатации возьмите легкое опускание и избегайте изгиба или удара колонны.
Периодический осмотр: периодический осмотр колонн, капот и соединений, своевременная замена стареющих деталей.
V. Пики призраков и фоновые помехи
Описание проблемы: В хроматографии появляется неизвестный пик или повышение фонового шума.
Возможные причины:
Загрязнение проб: образцы содержат примеси или остатки предварительной обработки.
Загрязнение с помощью пробоотборника: старение иглы, втулки или прокладки.
Загрязнение переносным газом: в переносном газе содержатся примеси кислорода, влаги или углеводородов.
Загрязнение детектора: старение нити лампы детектора или загрязнение из источника ионов.
решение:
Очищение образцов: удаление примесей с помощью твердофазной экстракции, фильтрации или центрифугирования.
Очистка входного отверстия: регулярная замена входной иглы, втулки и прокладки, промывка входного отверстия.
Очистка несущего газа: использование высокочистого переносного газа и установка устройства для очистки несущего газа.
Техническое обслуживание детекторов: регулярная очистка детекторов, замена стареющих компонентов.
VI. Неправильный выбор фиксированной фазы
Описание проблемы: Эффект разделения плох, целевое соединение удерживается нерационально долго или течет вместе.
Возможные причины:
Несоответствие с фиксированной полярностью: несоответствие свойствам образца (например, неполярные колонки для анализа полярных соединений).
Длина колонны или внутренний диаметр не подходят: слишком короткая колонна или слишком большой внутренний диаметр приводят к недостаточному разделению.
Толщина мембраны выбрана неправильно: слишком тонкая толщина мембраны приводит к низкой емкости колонны, а слишком толстая мембрана приводит к расширению пиковой формы.
решение:
Выбор фиксированной фазы в зависимости от свойств образца: неполярный образец выбирает неполярную колонну (например, DB - 5), а полярный образец выбирает полярную колонну (например, DB - WAX).
Оптимизируйте параметры колонны: выберите правильную длину колонны (например, 15 - 60m) и внутренний диаметр (например, 0,18 - 0,53 мм) в соответствии с требованиями разделения.
Корректировка толщины мембраны: выберите подходящую толщину мембраны (например, 0,1 - 5 мкм) в зависимости от концентрации образца и количества входящего образца.
VII. Сокращение срока службы колонны
Описание проблемы: хроматографическая колонка преждевременно выходит из строя и требует частой замены.
Возможные причины:
Неправильные условия эксплуатации: например, высокая температура, высокая скорость потока или сильный растворитель.
Образцы были сильно загрязнены: не была проведена полная очистка.
Недостаточное обслуживание: нерегулярное старение или чистка хроматографических колонн.
решение:
Оптимизация условий эксплуатации: строгий контроль температуры столба, скорости потока и типа растворителя.
Усиление очистки образцов: удаление примесей с помощью твердофазной экстракции, фильтрации или центрифугирования.
Периодическое обслуживание: старение, очистка и хранение в соответствии с условиями, рекомендованными в инструкции.