Готовность оборудования: Проверьте правильность подключения источника питания и источника газа (стальной баллон CO2b) в режиме качалки CO2b и убедитесь, что давление редуктора CO2b стабильно (обычно 0,1 ~ 0,2 МПа). Включите питание устройства, предварительно разогрейте до заданной температуры (например, 37°C) и подогрейте внутренний водяной диск инкубатора для поддержания влажности.

Параметры: Установить концентрацию CO2 (обычно 5%) в соответствии с потребностями клетки, калибровать с помощью инфракрасного или термопроводящего датчика; Установленный диапазон температур обычно составляет комнатную температуру до 50°C, необходимо предварительно нагреть, чтобы избежать колебаний температуры; В соответствии с емкостью для культивирования регулировать скорость вращения (50 ~ 300 rpm) и амплитуду (обычно 5 ~ 50 мм), чтобы избежать разбрызгивания жидкости; В водяной диск добавляют асептическую дистиллированную воду, поддерживая ≥95% влажности.

Размещение образцов: контейнер должен быть герметичным (например, с использованием мембраны воздухопроницаемой крышки или затягивания крышки бутылки), чтобы предотвратить утечку CO2z и загрязнение; Балансируйте образец, чтобы избежать смещения центра тяжести, влияющего на работу качающегося станка.

Эксплуатационный мониторинг: регулярная проверка концентрации углекислого газа, стабильность температуры, регистрация эксплуатационных параметров; При использовании баллонов для культивирования или герметичных баллонов с воздухопроницаемой крышкой необходимо сбалансировать проницаемость CO2b.

Конечная операция: выключите источник CO2б, выключите устройство после снижения концентрации до 0%, чтобы избежать повреждения датчика; Очистите водяной диск и полость, чтобы предотвратить размножение микроорганизмов.

II. Руководство по лучшей практике выращивания клеток

Тип клетки и выбор питательной среды: выбор подходящей питательной среды в зависимости от типа клетки, такой как DMEM для быстрорастущей клеточной линии, MEM для нескольких типов клеток; Протогенные клетки должны добавлять специальные факторы роста.

Восстановление и замораживание клеток: быстрое размораживание клеток при восстановлении, уменьшение повреждения кристаллов льда; При замораживании добавляются хладагенты (например, 10% DMSO), которые медленно охлаждаются до - 80°C и переходят на жидкий азот.

Асептические операции: все операции выполняются в сверхчистом рабочем столе, в лабораторных костюмах, перчатках, масках и шляпах; Избегайте разговоров и кашля в операционной зоне и снижайте риск передачи микроорганизмов по воздуху.

Регулярное наблюдение и регистрация: регулярное наблюдение за ростом клеток под микроскопом, включая морфологию клеток, плотность роста и отсутствие загрязнения; Регистрация соответствующих данных для своевременного выявления и устранения аномалий.

Техническое обслуживание и калибровка оборудования: регулярная калибровка датчиков CO2B (каждые 6 месяцев), замена фильтрующей пленки (при наличии); Отключение электричества при очистке, чтобы избежать попадания жидкости в схемную систему.