-
Электронная почта
1415268707@qq.com
-
Телефон
13764885152
-
Адрес
1150 Lanfeng Road, район Фэнсянь, Шанхай
Shanghai Jintong Instrument Co., Ltd
От фундамента к продвинутому: руководство по работе с перевернутым микроскопом Leica
Дата:2025-07-18Читать:0
Перевернутый микроскоп LeicaБлагодаря своей гибкой конфигурации объектива, дизайну несущего стола, адаптированного к различным образцам, он стал исследовательским инструментом в области клеточной культуры, тканевого среза и материаловедения. Освоение его навыков работы может не только повысить эффективность эксперимента, но и продлить срок службы прибора. Ниже, от базовой операции до продвинутых навыков, подробно описано поэтапно.
I. Фундаментальная операция: нормативный запуск и выборочное наблюдение
1. Включение и экологическая готовность
После включения питания включайте выключатель питания хоста микроскопа и включайте источник флуоресцентного света (если требуется флуоресцентное наблюдение) после того, как поле зрения окуляра загорится. Примечание: флуоресцентный источник света должен быть подогрет в течение 5 - 10 минут, чтобы достичь стабильной силы света, избегая частых переключателей, чтобы продлить срок службы лампы.
Регулируйте основание микроскопа до стабильного состояния, чтобы избежать вибрации, влияющей на визуализацию (рекомендуется размещать на сейсмическом столе или толстой резиновой подушке).
2. Размещение и фокусировка выборки
Поместите чашку Петри, пористую пластину или несущее стекло в центр несущего стола, чтобы убедиться, что образец находится прямо под объективом (инвертированный микроскопический объектив вверх, образец помещается сверху).
Сначала используйте объектив с низким увеличением (например, 4X или 10X) с грубой фокусировкой: медленно спускайте объектив к образцу с помощью ручки грубой настройки (обратите внимание, чтобы избежать прикосновения), а затем медленно вращайтесь в обратном направлении до ясности изображения. При переключении объектива с высоким увеличением (например, 20X, 40X) необходимо тонко настроить ручку тонкой настройки, так как объектив работает на коротком расстоянии, операция должна быть более мягкой.
3. Световой путь и настройка изображения
Регулирование высоты конденсатора и размера диафрагмы: при наблюдении с помощью малоумного зеркала конденсатор находится в более низком положении, диафрагма увеличивается; Для увеличения контрастности необходимо увеличить конденсатор и уменьшить диафрагму.
С помощью окулярного наблюдения, отрегулируйте ручку фокуса грубой / тонкой настройки до наиболее четкого изображения, избегая чрезмерной фокусировки, чтобы повредить объектив или образец.
II. Усовершенствованные навыки: расширение функций и точная визуализация
1. Флуоресцентное наблюдение и переключение каналов
Если требуется флуоресцентная визуализация, убедитесь, что фильтрующий блок переключился на целевой флуоресцентный канал (например, DAPI, FITC, TRITC) и работает через ротор фильтрующего блока на стороне микроскопа.
Регулирование интенсивности флуоресцентного излучения: Избегайте чрезмерного освещения, приводящего к закалке флуоресценции, вы можете постепенно увеличивать интенсивность света с помощью ручки регулирования напряжения или программного управления (если подключен компьютер) до тех пор, пока сигнал не станет ясным и фоновый шум не будет низким.
Различия и DIC изображения
Дифференциальное наблюдение: Вставьте дифференциальное кольцо (которое должно соответствовать объективу, например, объектив 10X соответствует дифференциальному кольцу 10X), отрегулируйте положение фазовой пластины конденсатора и улучшите контраст бесцветных образцов (например, живых клеток).
DIC (Дифференциальный интерферометрический контраст) наблюдение: установка призмы DIC, регулируя угол поляризации призмы с ручкой регулировки силы света, выделяет тонкую структуру образца (например, клеточный скелет, край клеточной мембраны).
Сбор изображений и оптимизация параметров
При подключении цифровой камеры время экспозиции устанавливается программным обеспечением (например, Leica Application Suite), значение усиления: время экспозиции должно быть сокращено под зеркалом с высоким увеличением (чтобы избежать чрезмерной экспозиции), изображение живых клеток может соответствующим образом увеличить усиление для повышения яркости.
При многоканальной съемке необходимо отдельно собирать изображение яркого поля, флуоресценции или разницы и накладывать или сравнивать его в программном обеспечении, чтобы убедиться, что параметры одинаковы (как и поле зрения, то же время экспозиции).
III. Охрана и меры предосторожности
Очистка объектива: очистка поверхности объектива от пыли с помощью специальной фотобумаги или воздушного шара, чтобы избежать прямого контакта с объективом; Если загрязнена жидкость, аккуратно протрите ее безводным этанолом.
2. Техническое обслуживание несущего стола: избегайте резких проб, царапающих поверхность несущего стола, и своевременно очищайте остаточную среду или жидкость после использования.
3. Процесс выключения: отключите флуоресцентный источник света (необходимо охладить до комнатной температуры, а затем отключить электричество), переведите объектив в положение с низким удвоением (чтобы избежать длительного давления объектива с высоким увеличением) и, наконец, выключите питание хоста.
Перевернутый микроскоп LeicaОперации от базовой фокусировки до продвинутой визуализации, каждый шаг должен учитывать спецификации и детали. Освоение его основных навыков может не только эффективно получать высококачественные изображения, но и в полной мере использовать производительность прибора, чтобы обеспечить надежную поддержку научных исследований и экспериментов.