Системы визуализации клеточной среды позволяют в режиме реального времени отслеживать состояние роста, морфологические изменения и метаболическую активность клеток, что помогает исследователям лучше понять физиологическое состояние и реакцию клеток. Регулярно регистрируя и анализируя данные изображений, можно своевременно выявлять аномалии, такие как клеточная токсичность, недостаточное питание или патогенные инфекции, а затем принимать соответствующие меры для оптимизации условий культивирования клеток или решения проблем.
Основные принципы работы системы визуализации клеточной среды:
1. Оптическая технология визуализации: клеточная система визуализации окружающей среды в основном использует перевернутую микроскопическую структуру, интегрированную с фазированными конденсаторами, объективами и другими оптическими компонентами. Эти компоненты работают в тандеме, позволяя свету точно излучать наблюдаемые образцы клеток и собирать отраженный или пропускаемый свет для формирования четких изображений. В то же время, в сочетании с высокочувствительной камерой, оптический сигнал может быть преобразован в цифровое изображение, поддерживая различные режимы изображения, такие как яркое поле, флуоресцентные и рельефные эффекты, чтобы удовлетворить различные экспериментальные потребности.
Флуоресцентные маркеры и динамические наблюдения: конкретные белки или клеточные механизмы в клетках могут быть маркированы с использованием конкретных флуоресцентных красителей. С помощью технологии флуоресцентной микроскопии деятельность клетки может быть преобразована из статического « моментального снимка» в динамический « фильм», показывающий активность внутри клетки в режиме реального времени, например, молекулярный транспорт, взаимодействие между органами elles и так далее.
Автоматизированный контроль и поддержание окружающей среды: также оснащена автоматизированной системой управления, которая может точно регулировать температуру, влажность, концентрацию углекислого газа и другие параметры окружающей среды, обеспечивая клеткам стабильную и подходящую среду роста. Это не только гарантирует активность клеток во время эксперимента, но и уменьшает помехи, вызванные изменениями факторов окружающей среды, и повышает точность и надежность эксперимента.
Внимание к использованию системы визуализации клеточной среды:
1. Правила использования амальгамных ламп: переключатели амальгамных ламп не должны включаться часто и многократно, интервал между ними должен составлять более 30 мин, иначе это может повлиять на срок службы и производительность амальгамных ламп.
Контроль температуры окружающей среды: Микроскопическая камера должна поддерживать криогенную среду, стабильная температура помогает поддерживать точность прибора и клеточное состояние, уменьшая ошибки, вызванные колебаниями температуры.
3. Светозащитные и сейсмические меры: во время эксперимента следует обратить внимание на защиту от света, чтобы свет не повредил клетку или не мешал результатам эксперимента; В то же время избегайте вибрации, потому что вибрация может привести к размыванию изображения, смещению фокуса и другим проблемам, влияющим на качество изображения.
4. Элементы отбора питательных сред: При подготовке образцов используемые формулы питательных сред должны не только содержать соответствующие питательные вещества, способствующие росту и развитию клеток, но и учитывать такие факторы, как pH, буферная способность и осмотическое давление. Неправильная среда влияет на экспрессию, фенотип и внешний вид клеток. Рекомендуется использовать безфеноловые красные питательные среды и снизить концентрацию сыворотки для снижения фоновых сигналов.
5. Требования к стерильным операциям: в процессе сбора клеток и других операций стерильные операции должны строго выполняться, чтобы предотвратить загрязнение. Инородные частицы или фрагменты клеток могут мешать качеству изображения и влиять на точность эксперимента.
Необходимость оптимизации зонда: до проведения официального эксперимента необходимо оптимизировать концентрацию флуоресцентных зондов и время инкубации. Необходимо обеспечить, чтобы жизнеспособность клеток после инкубации не пострадала, а также чтобы была обнаружена правильная интенсивность флуоресцентных сигналов. Кроме того, потенциальная фоновая флуоресценция может быть уменьшена путем добавления этапов стирки.
7. Стабильные условия окружающей среды: строгий контроль и поддержание стабильных условий окружающей среды, включая температуру, влажность и газы (кислород и углекислыйгаз) на протяжении всего эксперимента по визуализации. Стабильная среда не только сохраняет здоровье клеток, но и снижает риск дрейфа фокуса. Например, перед настройкой параметров сбора следует убедиться, что микропористые пластины расположены на приборном столе или в камере контроля окружающей среды для обеспечения теплового баланса; Если во время эксперимента с задержкой в отверстие добавляется среда, убедитесь, что температура среды в контейнере с изображением такая же.
Применение модуля подогрева объектива: Для экспериментов с использованием изображений с помощью водяных или масляных зеркал температура объектива оказывает большее влияние на образец, поскольку объектив контактирует с образцом через среду, и в это время необходимо оснастить модуль подогрева объектива, чтобы убедиться, что образец находится в подходящей температурной среде.
9. Использование системы управления фокальной поверхностью: в полной мере использовать возможности программного обеспечения для автоматической фокусировки (например, bestfocus), системы стабилизации фокальной поверхности (AFC) и точного фокусирования (closeloop) для обеспечения получения четких изображений в различные моменты времени и повышения качества изображений и точности данных.
10. Преимущества дистанционного мониторинга: если устройство имеет функцию дистанционного мониторинга, можно рационально использовать эту функцию для мониторинга хода эксперимента в режиме реального времени, своевременного выявления и решения проблем, повышения эффективности и успешности эксперимента.