Заполнители для очистки белков могут точно идентифицировать и адсорбировать целевые белки на основе различных механизмов действия, описанных выше, и имеют низкую сродство к большинству примесей белков. Эта высокая избирательность позволяет эффективно отделять целевые белки от сложных белковых смесей, что значительно повышает эффективность и чистоту очистки и уменьшает сложность последующих этапов обработки.

С одной стороны, большое количество образцов может быть обработано за относительно короткий период времени. Его быстрый процесс адсорбции и адсорбции, а также рациональная конструкция колонн и рабочие процессы позволяют очищать белки в более эффективных условиях, отвечающих требованиям времени и производительности в научных исследованиях и промышленном производстве. При широком диапазоне pH, изменениях ионной прочности и присутствии органического растворителя его структура и функции остаются нетронутыми из - за незначительных изменений внешних факторов окружающей среды. Это позволяет надежно использовать протеиновые очистительные наполнители в различных условиях очистки, гарантируя повторяемость и последовательность результатов очистки.

Внимание при использовании протеиновых наполнителей:

1. Выбор и обработка буфера

- Компонент буферной жидкости: Выберите подходящую систему буферной жидкости, для которой pH, ионная прочность и другие параметры должны соответствовать стабильности целевого белка и соединения с наполнителем. В то же время, по мере необходимости, может быть добавлено соответствующее количество добавок, таких как ингибиторы протеазы, металлические хелаты, восстановители и т. Д. Для защиты активности белка и предотвращения разложения белка, окисления и т. Д.

- Фильтрация и дегазация буферной жидкости: все используемые буферные жидкости должны быть отфильтрованы через фильтр 0,22 мкм для удаления примесей и микроорганизмов. Кроме того, перед использованием необходимо восстановить низкотемпературный буфер до комнатной температуры и дегазировать его, чтобы газ в буфере не влиял на эффект разделения во время стратификации.

2. Управление операционным процессом

- Температурный контроль: во время очистки белка следует по возможности работать при низких температурах, например, на льду или в холодильнике, чтобы предотвратить дегенерацию и деградацию белка. Особенно при работе с белками, чувствительными к температуре, необходимо строго контролировать температуру.

- Контроль скорости потока: Контролируйте скорость потока колонны слоистого слоя, избегайте чрезмерной скорости потока, которая приводит к недостаточному связыванию белка с наполнителем или неполному стиранию, а также избегайте слишком медленного потока, влияющего на эффективность эксперимента. Различные этапы наполнения и очистки могут иметь подходящий диапазон скоростей потока и должны быть скорректированы с учетом реальной ситуации.

- Избегайте загрязнения: весь процесс работы должен оставаться стерильным и чистым, использовать одноразовые всасывающие головки, трубки, бутылки и другие расходные материалы, многоразовые стеклянные сосуды должны быть тщательно очищены и стерилизованы, чтобы предотвратить бактерии, грибки или другие примеси, загрязняющие образцы белка и наполнители, влияющие на эффект очистки.

3. Защита и обслуживание наполнителей

- Предотвращение высыхания: во время работы избегайте длительного воздействия наполнителя на воздух, что приводит к высыханию, влияющему на производительность и срок службы наполнителя. При временном использовании наполнитель должен быть погружен в соответствующий буфер.

- Очистка и регенерация: После использования необходимо своевременно промыть наполнитель и удалить остаточные белки и другие примеси. Для некоторых наполнителей, которые могут быть повторно использованы, регенерация должна быть проведена в соответствии с правильным методом, чтобы восстановить их производительность и облегчить следующее использование. Но будьте осторожны, чтобы избежать использования слишком сильных условий очистки, чтобы не повредить наполнитель.

- Условия хранения: выбор подходящих условий хранения в зависимости от характера наполнителя. Как правило, кратковременное хранение может быть пропитано наполнителем в этаноле 20 и помещено в холодильник 4°C; Долгосрочное хранение требует более строгих условий, таких как замораживание при температуре 20°C или ниже.

4. Меры предосторожности

- Индивидуальная защита: при работе с протеиновыми наполнителями следует носить защитные средства, такие как лабораторные защитные костюмы, перчатки, маски и защитные очки, соответствующие стандартам, чтобы предотвратить прямой контакт вредных химических веществ с кожей, ртом, носом и глазами.

- Экспериментальная среда: колонны очистки белка должны быть размещены на плавном рабочем столе, рабочая среда должна быть хорошо вентилирована, подходящая температура, без пыли и запахов и других загрязнителей.