I. СПРАВОЧНАЯ ИНФОРМАЦИЯ

Численность и состав кишечной микрофлоры огромны, а состав и физиологические изменения кишечной микрофлоры человека связаны с рядом заболеваний, и изучение кишечной микробиоты может лучше понять ее связь со здоровьем человека, и в настоящее время, для этого исследования, разделение и культивирование кишечной микрофлоры имеют решающее значение.

Традиционный способ культивирования разделения кишечной флоры основан на плоском режиме, из - за большой рабочей нагрузки, плоский режим культивирования имеет трудоемкие, неэффективные проблемы и часто плохо культивируется.Технология капельного микроконтроляРастет число сообщений о применении в культуре разделения кишечной флоры путем рассредоточения кишечной флоры в отдельных отдельных каплях, обеспечивая замкнутое и независимое жидкое ограниченное пространство для роста отдельных видов, что значительно способствует росту микроорганизмов, избегая того, чтобы уязвимые штаммы покрывались доминирующими штаммами роста, тем самым увеличивая типы и количество культивируемых микроорганизмов.

Используя прибор Tianmu Bio MISS cell, этот эксперимент автоматически создает десятки тысяч отдельных ячеек капельной культуры, которые рассеивают микроорганизмы в каплях, независимо культивируемых, различные виды бактерий могут расти и размножаться в каплях, устраняя при этом влияние чрезмерно длинных и быстро растущих популяций в культуре сообщества.Метод культивирования, основанный на устройстве MISS cell, значительно преодолевает недостатки традиционных методов культивирования планшетов и обеспечивает важную исследовательскую платформу для идентификации и обнаружения редких видов кишечных симбиотических бактерий и анаэробных бактерий окружающей среды.

Экспериментальный процесс сепарации кишечной флоры на основе планшетов и устройств MISS cell

1. Предварительная обработка проб, определение концентрации на борту

После разбавления собранных образцов фекалий с использованием гематоцитов концентрация проб была разбавлена питательной средой до 10 000 - 30 000 CFU / ml, и рабочий процесс был следующим:

2. Разделение кишечной флоры в анаэробной среде с помощью оборудования MISS cell

В ходе этого эксперимента было создано около 20 000 капель, после 37 ° C 30 дней анаэробной культуры для обнаружения и сортировки, после 5 часов сортировки было получено около 4600 капель, содержащих бактерии, и было проведено секвенирование высокого потока, рабочий процесс, как показано на рисунке ниже:

3. Кишечная флора культивируется с помощью плоского разделения

В этом эксперименте было покрыто в общей сложности 15 пластин, собранных после 37 ° C 30 дней анаэробной культуры и секвенирования высокого потока, рабочий процесс, как показано на рисунке ниже:

4. Результаты экспериментов

(1) По сравнению с группой непрокультивируемых фекальных протоплазм, с использованием оборудования MISS cell для разделения культур, было идентифицировано на 10,9% (13 / 119) больше видов бактерий (родовой уровень), что значительно превосходит планшет 0,8% (1 / 119).

(2) Каплевая культура на 40% выше (на уровне), чем у плоских культур, и имеет лучшие эффекты обогащения для бифидобактерия (Bifidobacterium), пептофилы (Peptoniphilus), Collinsella (Collinsella), коала (Phascolarctobacterium), энтерококк (Enterococcus), порфирин моноцитов (Porphyromonas) и т.д.

Инструменты Tianmu Bio MISS cell обеспечивают высокопроизводительные и эффективные автоматизированные решения для процесса разделения, культивирования и скрининга строго анаэробных бактерий, таких как кишечная флора

В этом исследовании использовался прибор Tianmu Bio MISS cell, в общей сложности 20 000 капель, было отобрано около 4600 моноклональных капель, чтобы реализовать автоматизированную культуру и сортировку кишечной флоры, в то же время, основываясь на преимуществах капельной культуры, избегая конкурентного роста и перекрестного загрязнения между штаммами, что значительно улучшило изобилие штаммов, обогащенных после культивирования.

MISS cell реализует полный процесс экспериментов с кишечной флорой с высоким потоком и автоматизированной работой, значительно улучшает способность к культивированию микроорганизмов, значительно снижает рабочую нагрузку экспериментаторов, повышает эффективность работы, обеспечивает строгую анаэробную культуру, включая кишечную флору, обеспечивает эффективную автоматизированную экспериментальную платформу для моноклональной культуры и скрининга высокого потока, обеспечивает сильную поддержку культивирования и скрининга штаммов!