Человеческий допаминовый рецептор D2 (DRD2)

Данный комплект предназначен только для внелабораторных исследований и не предназначен для клинической диагностики.

Этот комплект предназначен для количественного определения содержания человеческого допаминового рецептора D2 (DRD2) в образцах сыворотки крови, плазмы, тканевой симметрии и связанных с ними жидкостей.

Срок действия:6 месяцев

Условия сохранения:2-8℃

Состав комплекта:

Примечание:

1. (96T / 48T) После открытия упаковки, пожалуйста, своевременно проверьте все изделия на полноту.

2. Концентрация стандартного продукта в порядке убывания: 800, 400, 200, 100, 50, 25 пг / мл

3. После большого количества нормальных образцов значения нормальной концентрации в образцах находятся в пределах диапазона обнаружения, обеспечиваемого набором реагентов, и образец может быть взят непосредственно на 50 мкл в ходе эксперимента. В тех случаях, когда значения проб превышают стандартную концентрацию, образец может быть надлежащим образом разбавлен разбавленным раствором для проб, прежде чем проводить эксперименты.

Подготовка к тестированию:

Пожалуйста, вынимайте комплект из холодильника за 20 минут, чтобы сбалансировать его до комнатной температуры.

2. Концентрированный промывочный раствор, извлеченный из холодильника, может иметь кристаллическую форму и является нормальным явлением; Поместите комнатную температуру, легкую качку равномерно, пока кристаллизация не растворится, а затем настроить моющую жидкость. 20 мл концентрированного скруббера можно разбавить дистиллированной или деионизированной водой в 400 мл рабочей концентрации скруббера

3.20×разбавление моющего буфера: дистиллированная вода разбавляется 1: 20, т.е. 1 порция моющего буфера 20× плюс 19 частей дистиллированной воды.

Человеческий допаминовый рецептор D2 (DRD2) ELISA

Принцип эксперимента:

В наборе используются двухступенчатые заполнители с двойным антителом для комбинированного иммуноадсорбционного теста фермента (ELISA). Пакеты, предварительно упакованные с антителами, захваченными человеческим допаминовым рецептором D2 (DRD2), помещаются в микропоры, последовательно добавляя образцы, стандартные продукты, обнаруженные антитела, отмеченные HRP, после термического размножения и стирки. Используя субстрат TMB, TMB преобразуется в синий цвет под катализатором пероксидазы и в желтый под действием кислоты. Глубина цвета положительно коррелирует с человеческим допаминовым рецептором D2 (DRD2) в образце. Абсорбция (OD) измеряется с помощью энзимометра на длине волны 450 нм для расчета концентрации проб.

Собственное испытательное оборудование для эксперимента:

1. Ферментометр (450 нм)

2. Высокоточные пробоотборники и головки пистолетов: 0,5 - 10ul, 2 - 20ul, 20 - 200ul, 200 - 1000ul

3.37°C термостат

Дистиллированная или деионизированная вода

Обработка образцов и требования:

1. Сыворотка крови: образец цельной крови, собранный в сепараторе сыворотки, помещается при комнатной температуре в течение 2 часов или 4 ° C на ночь, а затем 1000 × g центрифуг в течение 20 минут, чтобы его очистить или поместить верхнюю очистку в 20° C или - 80° C для сохранения, но следует избегать повторного замораживания.

2. Плазма крови: образец взят с использованием EDTA или гепарина в качестве антикоагулянта и образец в течение 30 минут после сбора в центрифуге 2 - 8 ° C 1000 × g в течение 15 минут, после чего образец может быть обнаружен путем очистки или сохранен при температуре 20 ° C или 80 ° C, но при этом следует избегать повторного замораживания и оттаивания.

3. тканевая симметрия: промыть ткань предварительно охлажденным PBS (0,01M, pH = 7.4), удалить остаточную кровь (эритроциты, расщепленные в симметрии, влияют на результаты измерений), после взвешивания разрезать ткань. Измельченная ткань соответствует объему PBS (обычно пропорционально весу и объему 1: 9, например, 1 г образца ткани соответствует 9 мл PBS, конкретный объем может быть соответствующим образом отрегулирован в соответствии с экспериментальными потребностями и зарегистрирован. Рекомендуется добавить ингибиторы протеазы в PBS) в стеклянный симулятор, полностью измельченный на льду. Для дальнейшего расщепления тканевых клеток можно провести ультразвуковое дробление равномерного раствора или повторное замораживание и таяние. Асимметричный раствор в 5000 × g центрифуг 5 ~ 10 минут, чтобы получить очистительный тест.

4. Клеточная культура очищается: Пожалуйста, 1000 × g центрифуга 20 минут, взять очистку можно обнаружить или поместить верхнюю очистку в 20°C или 80°C для сохранения, но следует избегать повторного замораживания и таяния.

5. Другие биологические образцы: 1000 × g центрифуг в течение 20 минут, взятые для обнаружения.

6.Внешний вид образца: образец должен быть прозрачным и прозрачным, а суспензия должна быть центрифужно удалена.

7.Хранение образцов: Если после сбора образца в течение 1 недели тест может быть сохранен на 4°C, если он не может быть своевременно обнаружен, пожалуйста, упаковать его в соответствии с одним использованием, заморозить до 20°C (обнаружение в течение 1 месяца) или - 80°C (обнаружение в течение 6 месяцев), чтобы избежать повторного замораживания, растворение крови в образце повлияет на результаты теста, поэтому образцы, растворенные в крови, не подходят для этого теста.

Внимание:

Тщательно в соответствии с установленным временем и температурой проводится термическая селекция для обеспечения точных результатов. Все реагенты должны достигать комнатной температуры 20 - 25°C до их использования. Реактор для хранения охлаждается сразу после использования.

Неправильная промывка доски может привести к неточным результатам. Перед добавлением субстрата убедитесь, что жидкость в отверстии высыхает как можно больше. Не позволяйте микроскопическим отверстиям высыхать во время термоса.

3. Устранение остаточных жидкостей и отпечатков пальцев на дне пластины, иначе это повлияет на значение OD.

Цветовая жидкость субстрата должна быть бесцветной или очень светлой, и субстрат, который стал синим, не может быть использован.

5. Избегать перекрестного загрязнения реагентами и образцами во избежание неправильных результатов.

6. Избегать прямого воздействия света при хранении и нагревании.

7. После равновесия до комнатной температуры открывается герметичный мешок, который удерживает капли воды от конденсации на холодной пластине.

Ни один реактив не должен подвергаться воздействию сильного газа, испускаемого отбеливающим растворителем или отбеливающим растворителем. Любой отбеливающий компонент может нарушить биологическую активность реактивного реагента в комплекте.

9. Нельзя использовать продукты с истекшим сроком годности.

10. В случае возможного распространения заболевания все образцы должны быть обработаны надлежащим образом и обработаны в соответствии с установленными процедурами, а также с контрольными устройствами.

Шаги действия:

1. Извлечь требуемую пластину из алюминиевого фольгового мешка после балансировки комнатной температуры в 60 мин, а оставшуюся пластину запечатать обратно на 4 ° C с помощью самогерметичного мешка.

2. Установка стандартных отверстий для продуктов и пробоотборных отверстий, каждая из которых имеет различную концентрацию стандартного продукта 50 мкл.

3. В отверстие для выборки a добавляется 50 мкл проб, подлежащих измерению; Пустые отверстия не добавляются.

4. В дополнение к пустым отверстиям в стандартные отверстия для продуктов и отверстия для проб добавляется 100 мкл на каждое отверстие для обнаружения антител, маркированных пероксидазой хрена (HRP), и отверстие для реакции запечатывается мембраной, а водяная ванна или термостат с температурой 37°C нагревается на 60 мин.

5.Выбросить жидкость, высушить на всасывающей бумаге, заполнить каждое отверстие стиральной жидкостью (350 мкл), статически 1 мин, сбросить стиральную жидкость, высушить на всасывающей бумаге, так повторить стиральную пластину 5 раз (также можно мыть пластину машины).

6. Каждое отверстие добавляется в основание A и B по 50 мкл, а при температуре 37 ° C - 15 мин.

7. На отверстие добавляется концевая жидкость в объеме 50 мкл в течение 15 минут для определения значения OD каждого отверстия на длине волны 450 нм.

Результаты эксперимента рассчитаны:

Нарисуйте стандартную кривую: в рабочем листе Excel стандартная концентрация продукта используется в качестве горизонтальных координат, соответствующая значению OD в качестве вертикальных координат, рисуйте стандартную линейную регрессионную кривую и вычисляйте значения концентрации выборки по кривым уравнениям.

(Эта диаграмма предназначена только для информации)

Человеческий допаминовый рецептор D2 (DRD2) ELISA

Производительность:

Диапазон обнаружения: 25 pg / ml - 800 pg / ml.

2. Чувствительность: обнаруженная концентрация менее 1,0 пг / мл.

Специфичность: не пересекается с другими растворимыми структурными аналогами.

4. Повторяемость: коэффициент вариации внутри пластины составляет менее 10%, а коэффициент вариации между пластинами - менее 15%.

Технические советы:

При смешивании или растворе рерастворимого белка старайтесь избегать пенообразования.

2. Чтобы избежать перекрестной инфекции, конфигурация различных концентраций стандартных изделий, верхних образцов и различных реагентов требует замены головки пистолета. Кроме того, различные реагенты, пожалуйста, используйте разные резервуары для переноса.

При каждом инкубации правильно используйте клей - пломбу, чтобы гарантировать точность результатов.

Смешанный ярко выраженный субстрат должен быть бесцветным перед верхней пластиной, избегайте света для сохранения; Если после микропористой пластины она превращается из поиска в синий на разных глубинах.

Порядок прекращения надводной пластины должен быть таким же, как и порядок верхних пластин на явной основе; После добавления концевой жидкости цвет отверстия меняется с синего на желтый; Если в отверстии есть зеленый цвет, это указывает на то, что жидкость в отверстии не смешивается; Пожалуйста, смешайте полностью.

Примечание:

Поскольку существующие условия и научно - технический уровень не позволяют провести полную идентификацию и анализ всего сырья, поставляемого всеми поставщиками, данный продукт может представлять определенный технический риск качества.

Результаты экспериментов тесно связаны с эффективностью реагента, соответствующими операциями экспериментатора и экспериментальной средой в то время, и обязательно подготовьте достаточное количество образцов для резервного копирования.

3. Один и тот же продукт в разных партиях может иметь небольшие различия, такие как: предел обнаружения, чувствительность и время проявления цвета и т. Д. Экспериментальные операции, основанные на инструкциях в наборе реагентов, электронная версия инструкции сайта только для справки.

Только полное использование комплектующих реагентов в этом наборе может гарантировать эффективность тестирования и не может смешиваться с продуктами других производителей. Результаты испытаний будут получены только в том случае, если будут строго соблюдаться экспериментальные инструкции по данному набору.