Микробные флаконы быстрого обнаружения: диагностика

　　Быстрое обнаружение микробовФлаконы: Диагностика

1. В дополнение к обнаружению жизнеспособных бактерий, могут флаконы микробного обнаружения также обнаруживать мертвые бактерии?

Ответ: Нет, они не могут обнаружить мертвые бактерии.

2. Могут флаконы микробного обнаружения обнаруживать анаэробные бактерии?

Ответ: Диапазон обнаружения этих флаконов охватывает как анаэробные бактерии (такие как Clostridia и Clostridium perfringens), так и аэробные бактерии.

Реагенты, содержащиеся в флаконах для обнаружения, варьируются в зависимости от конкретного типа микроорганизма, на который они нацелены. Для анаэробных бактерий, таких как Clostridium perfringens, мы используем специализированные реагенты.

3. Какие конкретные методы обнаружения используются в принципах обнаружения этих флаконов?

Ответ: Культурные методы, ферментативные методы, иммунологические методы и генетические методы.

4. Что касается вопроса 3, то могли бы вы кратко описать преимущества и недостатки каждого из этих методов?

Ответ: В отличие от традиционных методов культурных средств, коллоидных золотых анализов, ферментальных иммуноанализов или методов ПЦР, когда они используются в изоляции, немецкая система обнаружения микробов представляет собой всеобъемлющую интеграцию нескольких методов. Использование одного только метода обнаружения имеет свойственные недостатки; Например:

Методы ПЦР требуют специализированного технического персонала и дорогого оборудования;

Методы культурных СМИ включают сложные оперативные процедуры;

Коллоидные золотые анализы страдают от низкой чувствительности;

Энзимные иммуноанализы могут не иметь достаточной специфичности в захвате цели.

Немецкая серия флаконов быстрого обнаружения микробов представляет собой синергическое применение вышеупомянутых методов, эффективно используя сильные стороны каждой техники, компенсируя их соответствующие ограничения.

5. При выполнении микробного обнаружения с помощью этих флаконов, должен образец быть добавлен сначала, или стерильная вода?

Ответ: Любой заказ приемлем. 6. Необходимо ли проводить микробную прививку образца в стерильной среде?

Ответ: Бутылка обнаружения работает путем захвата конкретных целей и использования сочетания аналитических методов. Поэтому стерильная среда не требуется строго (большинство клинических испытаний являются, на самом деле, нестерильными средами).

7. Может ли бутылка обнаружения быть использована для испытания образцов поверхности и твердых образцов?

Ответ: Да, он может проверить твердые, жидкие и поверхностные образцы (для поверхностных образцов используйте предоставленный тампон, увлажненный стерильной водой, чтобы тампонировать поверхность). Также могут быть испытаны пастоподобные, полутвердые или вязкие образцы, такие как бумажная целлюлоза.

8. При испытании твердых образцов с помощью бутылки для обнаружения, необходима ли любая предварительная обработка, такая как шлифовка или разбавление?

Ответ: Нет; просто поместите образец непосредственно в бутылку для обнаружения без предварительной обработки.

9. Сколько стерильной воды требуется для каждого испытания?

Ответ: Как правило, 11 мл. Если тестирование жидких образцов или образцов воды, рекомендуется добавить 1 мл образца и 10 мл стерильной воды.

10. После добавления образца и стерильной воды, является ли шаг "потрясения для обеспечения полного растворения и смешивания" обязательной процедурой как качественного, так и количественного анализа?

Ответ: Да, трясение для смешивания является обязательным шагом как для качественного, так и количественного анализа.

11. Требуются ли различные микроорганизмы одной и той же температуры инкубации? Пожалуйста, приведите примеры.

Ответ: Нет, нет. Большинству микроорганизмов требуется 37 ° C, например, общее жизнеспособное количество, сальмонелла и листерия, в то время как другим, таким как E. coli, требуется 44 ° C.

12. Если тестирование образцов, таких как холодные посуды или мороженое, следует инкубация проводиться при более низкой температуре? Ответ: Нет никаких ограничений относительно температуры самого образца. Однако при тестировании на микроорганизмы в образце необходимо строго придерживаться специфической температуры инкубации, соответствующей мишенному микроорганизму, как указано в справочной диаграмме.

13. Если я хочу ускорить процесс испытания, могу ли я установить температуру инкубации выше температуры, указанной для целевого микроорганизма?

Ответ: Нет. Вы должны строго соблюдать эталонную таблицу.

14. Каков указанный объем/вес образца, требуемый в руководстве по эксплуатации?

Ответ: 0,1 г - 1,0 г или 0,1 мл - 1,0 мл.

15. Если фактический объем/вес образца превышает указанный предел, будут ли результаты испытаний отличаться? В частности, будут ли результаты (в случае количественного анализа) выглядеть искусственно повышенными?

Ответ: Независимо от того, является ли объем/вес образца немного выше или ниже указанного, результаты количественного анализа не будут затронуты.

Причина: Традиционные методы микробиологического испытания, включая установленные эталонные методы (такие как подсчет колоний на твердых селективных средах), демонстрируют присущую «статистическую дисперсию» более 50%. (Статистическая дисперсия, также известная как статистическая изменчивость, относится к распространению переменной или распределения вероятности; общие примеры включают дисперсию, стандартное отклонение и межквартильный диапазон.) Многочисленные лаборатории подтвердили, что методы биологического обнаружения демонстрируют более низкую статистическую дисперсию и более высокую надежность по сравнению с другими методологиями тестирования. Тем не менее, статистическая дисперсия 25-30% остается присущей процессу. Кроме того, необходимо также учитывать статистическую дисперсию, введенную на этапе отбора проб, особенно в случае твердых пищевых продуктов (таких как мясные продукты), где микроорганизмы часто размножаются.

Следовательно, результаты, полученные при добавлении образца в размере 0,5 г, статистически эквивалентны результатам, полученным при добавлении 1,5 г (и эквивалентны результатам, полученным с помощью любого другого метода испытания).

16. Могут ли образцы с низкой плотностью, свободным наполнением, такие как мука, быть испытаны с помощью стандартной процедуры?

Ответ: Да, они могут. 17. Для темно-цветных образцов, таких как соевый соус, будет ли цвет мешать интерпретации качественных результатов тестирования? У вас есть какие-либо рекомендации?

Ответ: Если для количественного анализа используется прибор обнаружения, эта проблема не возникает. Однако, если вы проводите качественный анализ исключительно путем визуального наблюдения за изменениями цвета:

Для темно-цветных образцов, если вы обеспокоены тем, что изменение цвета может не быть четко заметно невооруженным глазом, мы рекомендуем разбавить образец перед тестированием. Помните ли вы ответ на вопрос 15? Результаты, полученные добавлением 0,5 г или 1,5 г образца, являются статистически эквивалентными (и сопоставимыми с результатами, полученными любым другим методом).

Тот же принцип применяется и к разбавлению.

18. Если тестирование образца воды, все еще необходимо добавить стерильную воду? Если да, то сколько?

Ответ: Мы рекомендуем добавить 1 мл образца воды и 10 мл стерильной воды.

19. Проявляют ли различные микроорганизмы один и тот же первоначальный цвет и цвет положительного результата? Пожалуйста, приведите примеры.

Ответ: Нет, они отличаются.

Например, после инкубации в течение примерно 10 минут, сальмонелла обычно имеет первоначальный красный цвет, с положительным результатом, указанным желтым. * Листерия *, с другой стороны, имеет первоначальный цвет синего цвета, с положительным результатом, указанным желтым. Пожалуйста, обратитесь к справочной диаграмме для получения конкретных подробностей.

20. Функционирует ли прибор для обнаружения микробов также в качестве инкубатора?

Ответ: Да. После тщательного потрясения бутылки для обнаружения немедленно поместите ее в прибор для обнаружения. После настройки конкретных настроек микроорганизмов в программном обеспечении,

прибор автоматически выполнит процесс инкубации и генерирует отчет о количественном анализе.

21. Функционирует ли прибор для обнаружения микробов также в качестве шайкера/осциллятора?

Ответ: Нет, нет. Вы должны вручную сильно встряхнуть бутылку в течение 2-3 минут или использовать механический шейкер примерно в течение 20 секунд, пока содержимое не будет полностью растворено или тщательно смешано.

22. Каков основополагающий принцип интерпретации результатов прибором для обнаружения микробных организмов? Ответ: Прибор для обнаружения микробов является точным оптическим читателем. Используя оптические принципы, он точно обнаруживает изменения цвета в флаконах обнаружения и генерирует точные отчеты о количественном анализе.

23. Работает ли прибор для обнаружения микробов на внешнем источнике питания или имеет ли он встроенную аккумуляторную батарею?

Ответ: Он работает на внешнем источнике питания.

24. Сколько бутылок обнаружения микробный детектор может анализировать одновременно и независимо?

Ответ: 8 бутылок. Он выполняет одновременное и независимое обнаружение, генерируя отдельный отчет о количественном анализе для каждой бутылки.

25. Необходимо ли установить программное обеспечение для анализа на компьютер для проведения количественного анализа с помощью микробного детектора?

Ответ: Да, вы должны установить сопровождающее программное обеспечение для анализа.

26. Какие компьютерные операционные системы совместимы с этим программным обеспечением для анализа?

Ответ: XP, Vista и Windows 7.

27. Если детектор включен впервые, сколько времени следует подождать после подключения источника питания, прежде чем приступить к следующему шагу?

Ответ: Если включено впервые, рекомендуется подождать примерно 40 секунд после запуска, прежде чем продолжить работу.

28. При проведении количественного анализа следует ли после тщательной смешивания немедленно помещать в детектор бутылку для обнаружения или подождать минутку, прежде чем вставить ее?

Ответ: Его следует поместить в детектор сразу после тщательного смешивания.

29. После того, как бутылка для обнаружения была помещена в детектор, какого цвета светильник, соответствующий этому порту обнаружения, включит интерфейс программного обеспечения после нажатия кнопки "Пуск" в программном обеспечении для анализа?

Ответ: После нажатия кнопки "Пуск" на интерфейсе, соответствующем конкретной бутылке обнаружения, индикатор света для этого порта изменится с зеленого на красный. Это указывает на то, что процесс обнаружения начался и в настоящее время идет.

30. Когда процесс обнаружения будет завершен, на какой цвет будет возвращаться индикатор, соответствующий этому порту на интерфейсе программного обеспечения для анализа, сигнализируя о том, что испытание завершено и может быть вставлен новый образец?

Ответ: Пока обнаружение продолжается, индикатор остается красным. Как только обнаружение завершено, индикатор переходит на зеленый. На этом этапе допускается вставить новую бутылку для обнаружения в соответствующий порт на детекторе для начала следующего раунда испытаний. Продолжительность процесса обнаружения определяется либо фактическим количеством присутствующих бактерий (в случаях высокого содержания микробов), либо соответствующей продолжительностью, указанной в справочной диаграмме (в случаях очень низкого содержания микробов, когда продолжительность испытания должна превышать время, необходимое для обнаружения 1 CFU, как указано в диаграмме). 31. Какова связь между временем анализа, необходимым для обнаружения микробов в бутылке, и содержанием микробов в этой бутылке?

Ответ: Это обратная связь. То есть чем выше микробное содержание, тем короче соответствующее время обнаружения; наоборот, чем ниже микробное содержание, тем дольше соответствующее время обнаружения.

Если содержание микробов в образце чрезмерно высокое, результаты количественного анализа, отображаемые детектором, будут показывать значительные колебания всего за несколько минут или даже секунд.

Если микробное содержание очень низкое (поскольку RVLM является высокоточным и чувствительным инструментом), опытный пользователь может, наблюдая за изменениями данных в течение нескольких часов (или даже всего нескольких минут), сделать предварительное определение того, соответствует ли целевое микробное содержание указанным требованиям.

32. До проведения анализа следует ли установить четкую экспериментальную цель для определения конкретного содержания микробов, предназначенного для обнаружения (в частности, допустимых микробных пределов, предусмотренных национальными стандартами)?

Ответ: Это очень рекомендуется.

Например, как национальные стандарты (например, серия GB), так и международные стандарты (например, серия EC) прямо (или полупрямо) определяют максимально допустимые уровни присутствия микробов в различных продуктах птицы и животноводства.

Более конкретно, при проведении микробного обнаружения первым шагом является четкое определение цели анализа. Например, международный стандарт EC 2073:2005 предусматривает, что максимально допустимый уровень *E. coli* в свежем мясе составляет 10² CFU/г, что означает, что содержание *E. coli* на грамм свежего мяса не должно превышать 10² CFU. В этом сценарии, обратившись к таблице ссылок, мы находим колонку, соответствующую *E. coli*, и находим лог значения ((10² CFU) = 2. Затем мы прослеживаем это значение (2) в ряде E. coli до первой колонки, где мы находим соответствующее число 14. Следовательно, будь то качественный анализ с помощью визуального осмотра или количественный анализ с помощью детектора, можно получить строго точный аналитический результат относительно того, превышает ли содержание *E. coli* в образце 10² CFU в течение максимального периода времени 14 часов. Если для количественного анализа используется бутылка для обнаружения, опытный лабораторный техник может в течение очень короткого периода времени (например, около десяти до пятнадцати минут) провести предварительную оценку микробного содержания в бутылке на основе динамических изменений, наблюдаемых в данных количественного анализа.

33. Какова конкретная цель тестирования на содержание микробов и какую роль играет эталонная диаграмма?

Ответ: Он служит основой для определения стандартных эталонных параметров, в частности температуры инкубации, первоначального цвета, продолжительности анализа и цвета положительного результата, соответствующего конкретному микроорганизму, испытываемому. Для получения подробных инструкций о том, как его использовать, пожалуйста, обратитесь к ответу, предоставленному в предыдущем вопросе.

34. Что такое CFU?

Ответ: CFU означает «колониальное образование».

Это английская аббревиатура для единиц микробных кластеров (колоний), полученных после культивирования.

Он служит единицей измерения бактерий (в частности, тех, которые видны) и грибов. CFU (колониообразующая единица) относится к методу, при котором определенный объем разбавленной микробной суспензии распространяется или выливается на агаровую пластину, позволяя отдельным микробным клеткам рассеиваться по поверхности. После инкубации каждая жизнеспособная клетка развивается в отдельную колонию. В отличие от обычных методов, которые используют микроскоп для подсчета отдельных микробных клеток, метод CFU в первую очередь измеряет количество * видимых * бактерий, то есть тех, которые образуют колонии в стандартных условиях. По сути, это указывает на количество отдельных микробных клеток, присутствующих на миллилитр суспензии. Традиционно этот счет называли просто «отдельными клетками» или «счетами». Однако мы знаем, что одна колония не обязательно генерируется одной бактерией; Вместо этого он может произойти из кластера бактерий (бактериальный агрегат). В таких случаях ссылка на них просто как на «отдельные клетки» не совсем точна; точная терминология - "колониально образующая единица", сокращенная как "CFU". Это аналогично терминам "килограмм" и "кило" - это просто разные названия для одного и того же количества.

CFU означает "колониообразующие единицы". CFU/mL относится к общему количеству бактериальных колоний, содержащихся на миллилитр образца; Также используется единица CFU/g, соответствующая твердой культурной среде.

35. Предположим, что мне нужно проверить образец, чтобы определить, превышает ли его колиформное количество 10^6 ФУ/г или 10^6 ФУ/мл.

Используя визуальное наблюдение за изменениями цвета внутри бутылки для качественного анализа, пожалуйста, подробно опишите процедуру обнаружения, ссылаясь на "Температуру инкубации и колориметрическую референтную диаграмму".

Ответ: Шаг 1: Добавление образца

Добавьте пробу для испытания (0,1-1,0 г или 0,1-1,0 мл), затем добавьте 11 мл стерильной воды. (В зависимости от характера испытательного материала, если это жидкость, рекомендуется добавить 1 мл образца и 10 мл стерильной воды; разница незначительна.)

Шаг 2: встряхните бутылку до тех пор, пока ее содержимое не будет полностью растворено или тщательно смешано.

Если трясать вручную, сильно трясать примерно в течение 2-3 минут; при использовании механического шайкера, встряхните примерно в течение 20 секунд.

Шаг 3: интерпретируйте результаты теста в нужное время.

(1) Для визуального качественного анализа: ознакомьтесь с эталонной диаграммой для определения конкретной температуры инкубации, первоначального цвета, времени обнаружения, цвета положительного результата и других параметров, соответствующих колиформам.

Температура инкубации: Согласно эталонной диаграмме, это 37 ° C.

Первоначальный цвет: это цвет, который появляется после того, как бутылку тщательно потрясли и поместили в инкубатор при температуре 37 ° C в течение примерно 10 минут. Согласно таблице, этот цвет красный.

Время обнаружения: Наш стандарт испытаний требует определения того, превышает ли содержание колиформы 10^6 CFU/g или 10^6 CFU/ml. Согласно справочной диаграмме, найдите колонку, соответствующую Log 10^6 = 6; Найдите строку, соответствующую числу 6. Это означает время обнаружения 6 часов. Таким образом, время наблюдения установлено на 6 часов.

Цвет положительного результата: Согласно справочной диаграмме, цвет, указывающий на положительный результат для колиформ, желтый. После подтверждения необходимой информации тщательно смешанную испытательную бутылку поместить в инкубатор постоянной температуры при температуре 37°С и оставить без нарушений. После инкубации в течение примерно 10 минут вы заметите, что тестовая бутылка показывает первоначальный цвет, соответствующий обнаружению колиформы - красный. Продолжать инкубацию; Если цвет стал желтым, это указывает на то, что содержание колиформы в образце превышает 10^6 CFU/g или 10^6 CFU/ml, и образец считается несоответствующим. Если цвет не становится желтым, а вместо этого остается на первоначальном красном цвете или переходит на промежуточный оттенок, это указывает на то, что содержание колиформ в образце не превышает 10 ^ 6 CFU / г или 10 ^ 6 CFU / мл, и образец считается соответствующим.

(2) При использовании детектора для количественного анализа:

Пожалуйста, обратитесь к следующему вопросу для этого шага.

Шаг 4: Стерилизация

Наконец, не забудьте нажать на верхнюю часть крышки тестовой бутылки, чтобы стерилизировать бутылку. После нажатия крышки, дайте бутылке встряхнуть; Теперь его безопасно выбрасывать.

Примечание: Во время экспериментальных процедур избегайте прикасаться к самой верхней части крышки испытательной бутылки, чтобы предотвратить случайную стерилизацию в ненадлежащее время, что может поставить под угрозу результаты испытания.

36. Если вопрос 34 выполняется совместно с детектором для проведения точного количественного анализа, просьба представить подробное описание операционных этапов.

Ответ: При использовании детектора для количественного анализа:

Немедленно поместите тщательно смешанную испытательную бутылку в детектор. Запустите программное обеспечение детектора и нажмите "Станция", чтобы ввести соответствующую информацию (в том числе: имя инспектора, тип испытания, идентификатор образца, клиент / источник, время испытания и т.д.). В раскрывающемся меню «Тип анализа» на интерфейсе программного обеспечения выберите конкретный тип микроорганизма, который должен быть обнаружен. Нажмите «ОК», затем нажмите «Пуск»; индикатор светла станет красным, что означает, что устройство вступило в фазу анализа. Мониторинг данных количественного анализа, отображаемых детектором, чтобы сделать определение.

37. Почему крышку бутылки для обнаружения не следует давить вниз до завершения испытания?

Ответ: Процесс стерилизации. крышка бутылки содержит стерилизирующий агент; Нажимая крышку, этот агент высвобождается в бутылку, где он реагирует со внутренним растворителем для завершения процесса стерилизации. Поэтому, пожалуйста, воздерживайтесь от прикосновения крышки бутылки для обнаружения во время эксперимента.