78PEI MAX 40K Транскрипционный реактив

🔍 Обзор продукта

Химическое имя:Линейный поливиниламид, линейный PEI, поливиниламид, линейный, MW 40000， Класс транскрипции, линейный полиэтиленамид (молекулярная масса 40000)

Номер заказа:78пей40000

спецификация100 мг / 500 мг / 5 г

Марка:БИОХУБ

CAS:49553 - 93 - 7

Молекулярная масса:40000 (~ 22000 свободных радикалов)

Растворить в:Вода

Не растворяется в:Часто используемые органические растворители (этанол, ацетон, тетрагидрофуран)

Внешний вид:Белые и серо - белые свободно движущиеся твердые вещества

Обработка:Перчатки и вентиляционный шкаф

Хранение:Хранение без света при комнатной температуре

Введение:

1.78PEI MAX 40K Транскрипционный реактив（В свободном щелочи также известен как PEI 22K) является функциональным *, надежным и доступным мгновенным транскрипционным реагентом. В большинстве систем экспрессии HEK293 и CHO PEI MAX обеспечивает стабильную высокую экспрессию (биореакторы с 96 - отверстиями до 100 л). Каждый год все больше исследователей и компаний используют PEI MAX для транскрипции клеток, так как PEI MAX может ждать стабильно высокой экспрессии и снижать затраты на транскрипцию на 40% по сравнению с большинством транскрипционных реагентов.

2.78 PEI MAX 40K более прост в использовании, чем PEI 25K, и имеет более высокую эффективность транскрипции, чем PEI 25K. Обычно процесс транскрипции PEI 25K занимает несколько часов, в то время как PEI MAX 40K может завершить весь процесс транскрипции за два часа. Кроме того, PEI 25K содержит 4 - 11% остаточных пропионильных радикалов, которые могут препятствовать эффективному связыванию основной цепи полимеров с ДНК, в то время как пропильные радикалы PEI MAX 40K легко выпадают, что означает, что производительность каждого продукта PEI MAX более стабильна.

💎 Метод конфигурации продукции

1. Приготовление жидкости для хранения (1 мг / мл)

- Материалы: 78PEI40000 Порошок, сверхчистая вода, 1N NaOH, 0,1 мкм фильтр

- Шаги:

1 г порошка растворяется в 900 мл сверхчистой воды, магнитное перемешивание до растворения;

Капли и 1N NaOH регулируют pH до 6,9 - 7.1 (при превышении предела обратной связи с 1N HCl);

3) фильтрация и стерилизация фильтрующей мембраны с фиксированной емкостью до 1L, 0,1 мкм;

(4) Хранение при 4°C после разделки, срок годности жидкости 6 месяцев, срок годности замороженного сухого порошка 1 год.

2. Приготовление рабочей жидкости

- разбавление в пропорции 1 мкг ДНК: 1 - 5 мкл 78PEI40000 для хранения жидкости (рекомендованное начальное соотношение 1: 3);

- Разбавление ДНК и ПЭИ с использованием безсывороточных питательных сред (таких как Opti - MEM), при комнатной температуре статически в течение 10 - 25 минут для формирования комплекса.

📌 Транскрипционный процесс

(i) Транскрипция клеток, прикрепленных к стенкам

1. Клеточная вакцинация: вакцинация клеток за 24 часа до транскрипции с плотностью до 70% - 80% конвергенции, замена на питательную среду, содержащую 5% сыворотки;

2. Комплексная инкубация: добавление комплекса DNA - PEI в чашку Петри по каплям, после мягкого вихря инкубация в течение 4 - 6 часов;

3. Смена жидкости и тестирование: замена свежей среды, обнаружение экспрессии генов через 7 часов, передача через 24 часа и добавление скрининговых препаратов.

(ii) Транскрипция взвешенных клеток

Подготовка клеток: регулировка плотности клеток до 1×10⁶cells / mL, культивирование в качалке в течение 2 - 4 часов;

2. Добавление композиции: прямое капание комплекса DNA - PEI в встряхивающую бутылку, непрерывное колебательное культивирование в течение 24 - 72 часов;

3. Амплификационная оптимизация: через 24 часа после транскрипции можно разбавить клетки (1: 2 - 1: 5) для увеличения производства белка.

⚡78PEI MAX 40K Транскрипционный реактивКлючевые моменты

1. Требования к растворению:

- Должны быть полностью растворены, нерастворившиеся частицы могут привести к снижению эффективности транскрипции;

Для обработки больших объемов раствора рекомендуется использовать центробежные трубки NEST 5 мл / 14 мл.

2.PH Контроль:

- При первоначальном растворении pH должен быть точно отрегулирован до 6,9 - 7.1, а слишком высокий или слишком низкий влияет на образование композиции.

3.Клеточное состояние:

- Рекомендуется использовать логарифмические клетки вегетационного периода, чтобы избежать чрезмерного повреждения клеточной мембраны.

4. Контроль токсичности:

- Клетки высокой плотности (> 90% сходимости) требуют снижения использования PEI (рекомендуемое соотношение 1: 1).

Для получения дополнительной информации о продукте, пожалуйста, свяжитесь с китайским региональным агентом: Shanghai Qingfang Experimental Bases Co., Ltd.

Если вас интересует любой продукт или другой бренд, вы можете пройти"Онлайн сообщение"Функция оставляет ваши потребности.

(Примечание: Содержание этой статьи основано на общедоступной информации о бренде и упорядочении обычной информации в отрасли, в частности, на информационной документации бренда.)

⚡ Продукция Biohub

(Примечание: База содержания настоящего документа