Культура стимуляции сжатием клеток (полная практическая версия)

Культура стимуляции сжатием клеток (полная практическая версия)

Культура стимуляции сжатием клеток (полная практическая версия)

I. ОСНОВНЫЕ КОНЦЕПЦИИ

Сжатие клеток стимулирует культуру:: В системе экстракорпоральной клеточной культуры искусственное наложениеУправляемое статическое / динамическое механическое сжатиеМоделирование физиологической / патомеханической микросреды организма (хрящ, кость, опухоль, фасция, экструзия вокруг кровеносных сосудов и т. Д.), для изучения механических сигналов для регулирования пролиферации клеток, дифференциации, апоптоза, миграции, воспаления, выделения матрицы и т. Д.Механическая биологияКлассический способ моделирования.

II. Типичный режим сжатия

1. Статическое сжатие

Постоянное давление, без периодических изменений

• Применимость: Стабилизация тканей, высоковольтная микросреда опухоли, модель жесткого угнетения матрицы

• Особенности: простая работа, долгосрочная загрузка, клеточный хронический механический стресс

2. Динамическое периодическое сжатие

Циркуляционное давление - разгрузка давления (имитация сгибания суставов, дыхания, сокращения мышц)

• Ключевые параметры:Размер давления + скорость деформации при сжатии + частота + длительность действия

• Применение: исследование механики хрящевых клеток, клеток межпозвоночного диска, остеогенных клеток, клеток, связанных с движением

3. Трехмерное сжатие матрицы

Клеточные пакеты, погребенные в коллагене / альгинате натрия / агаридном геле под общим давлением

• Более компактная 3D - ткань в реальном состоянии сжатия, основная программа научных исследований

III. Классическая экспериментальная схема & ссылка на параметры (прямое применение)

(1) Диапазон механических параметров

1. Физиологическое сжатие низкой интенсивности

• Давление:1-10 кПа

• Степень деформации: 5 - 15%

• Частота: 0,1 - 1 Гц (динамический)

• Применение: стволовые клетки в хрящ / костную дифференциацию, нормальная физиологическая стимуляция хряща

1. Патологическое сжатие высокой интенсивности

• Давление:20-80 кПа

• Степень деформации: 20 - 40%

• Применение: регрессия межпозвоночного диска, угнетение микросреды опухоли, фиброз, модель повреждения клеток

(2) Продолжительность интервенции

• Краткосрочный: 0,5 - 6 ч (активация острого сигнала: кальциевые ионные каналы, MAPK、YAP/TAZ）

• Долгосрочный: 1 - 7 d (дифференциация клеток, синтез матрицы, фенотипическое преобразование)

IV. Основное загрузочное оборудование (обычно используемое в лабораториях)

1. Механический компрессионный культиватор (универсальная система давления клеток)
   Программно управляемое динамическое / статическое сжатие, контролируемое влажность с температурным контролем, соответствует 6 отверстиям / 12 отверстиям для культивирования, часто используется.

2. Устройство для компрессии гири собственного веса (недорогостоящая упрощенная версия)
   Прокладка агара + асептическая гиря суперпозиция, вертикальное статическое сжатие, подходит для целевой группы с ограниченным финансированием.

3. трехмерная система сжатия гидрогеля
   Адаптивный гель - кронштейн, точное 3D - сжатие, хрящ / органоид исследования выбран.

4. АФМ атомно - силовой микроскоп
   Одноклеточное микросжатие, используемое для одноклеточной механической реакции, обнаружения твердости.

V. Стандартный рабочий процесс (общий)

1. Клеточная регулярная вакцинация / или упаковка, погребенная в 3D гидрогеле, стабилизация стенки (24 ч)

2. Замена свежей среды, ввод в компрессионную полость

3. Параметры настройки: статические / динамические, давление, частота, время сжатия

4. 37 ° C, 5% культивирование синхронной механической загрузки в инкубаторе

5. Взять ячейки / верхние / тканевые блоки после окончания и провести последующее тестирование
   (WB, qPCR, иммунофлуоресценция, ELISA、 Поточная, каркасная окраска и т.д.)

Общие биологические эффекты клеток

✅ Положительное (физиологическое умеренное сжатие)

• Интерцеллюлозные стволовые клетки: содействиеХвостообразование, костная дифференциация

• Хрящевые клетки: способствуют секреции коллагена типа II, полигликемии, поддерживающей клеточный фенотип

• Эндотелиальные / эпителиальные клетки: регулирование тесных связей, барьерные функции

❌ Отрицательное направление (чрезмерное / длительное высокое давление)

• Клеточный апоптоз, циклическая блокада

• Воспалительные факторы (IL - 6, TNF - α) повышаются

• Перегруппировка клеточного скелета, усиление мигрирующей инвазии (опухоль)

• Деградация внеклеточной матрицы, регрессия тканей (межпозвоночный диск, сустав)

VII. Ключевые контрольные показатели (подлежащие измерению)

1. Основные механические пути:YAP/TAZ, Пьезо1/2, FAK, RhoA

2. Показатели дифференциации: остеогенез (Runx2), образование хряща (Sox9)

3. Воспаление / регрессия: MMPs, ADAMTS, воспалительные факторы

4. Функции: клеточная жизнеспособность, апоптоз, царапины / миграция Transwell

VIII. Настройка контрольной группы (обязательно)

1. Пустая контрольная группа: обычная культура, без какого - либо давления

2. Фальшивая хирургия / группа холостого хода: поместить в одну и ту же культивирующую полость, без давления, исключить помехи окружающей среде

Вклад ЭКСПО, подробности и вопросы 010 - 67529703 "