Набор для обнаружения нуклеиновых кислот при лихорадке Дорин

[Название продукта]Набор для обнаружения нуклеиновых кислот при лихорадке Дорин

[Спецификация упаковки]50Т / коробка

[Метод продукта]Флуоресценция в реальном времениМетод PCR

Набор для обнаружения нуклеиновых кислот при лихорадке Дорин[Основные составляющие]

Реакционная жидкость RT - PCR, смешанная ферментная жидкость, положительный контроль, отрицательный контроль.

Условия хранения и срок действия

защищать от светаХраните ниже - 20°C, избегайте повторного замораживания и оттаивания, срок действия 12 месяцев.

[Применяемые приборы]
Серии ABI, Bio - Rad, Agilent Stratagene MX, Roche LightCycler R480, Cepheid SmartCycler, Rotor - Gene, Hangzhou Borge и другие многоканальные флуоресцентные количественные PCR - приборы в реальном времени.

[Метод проверки]

Готовность реагента (зона готовности реагента)

（1) Извлечь из холодильника набор реагентов, извлечь из него реагент, необходимый для эксперимента, полностью расплавить, перемешать и мгновенно центрифугировать, чтобы удалить жидкость, прикрепленную к стенке трубы.

（2) Учет количества реакций (n), необходимых для данного эксперимента, и расчет количества реагентов, необходимых для этого эксперимента, на основе системы реакций, показанной в таблице ниже.

n = отрицательное контрольное число (1Т) + положительное контрольное число (1Т) + резервирование ошибок (1Т) + число выборки

（3) Добавление вышеуказанного реагента в стерильную центрифужную трубку, полное смешивание и мгновенная центрифуга. Реакционная трубка PCR заполняется реагентом в количестве 20 мкл / труб.

（4) После плотной крышки трубки PCR трубка PCR переносится в зону обработки проб. Оставшийся реактив помещается обратно в холодильник ниже - 20°C для замораживания и хранения.

2. Подготовка проб (область обработки проб)

использоватьQIAGEN, Roche Corporation DNA Quu Backet получают QuDNA в соответствии с инструкциями по набору.

3. Добавить образец

Подготовлено в вышеупомянутомОбразцы реакции PCR добавляются в обработанные образцы ДНК по 5 мкл, конечный объем 25 мкл / трубка, крышка реакции PCR смешивается мгновенно с низкой скоростью центрифугирования, переносится на прибор PCR. Отрицательный контроль и положительная пара ухода добавляют каждый из 5 мкл комплекта с отрицательным контролем или положительным контрольным материалом, конечный объем 25 мкл / трубка, крышка реакции PCR после смешивания мгновенно низкоскоростной центрифуги, перенесенной на прибор PCR.

PCR (зона усиления PCR)

（1) Возьмите трубку реакции PCR, подготовленную в зоне обработки проб, и поместите ее в соответствующее место в пробоотборнике флуоресцентного количественного PCR в реальном времени и запишите порядок размещения.

（2) Нажмите следующую таблицу, чтобы установить параметры, связанные с амплификацией нуклеиновой кислоты прибора для амплификации PCR.

Примечание:Флуоресцентные PCR - приборы серии ABI не выбирают ROX - коррекцию при настройке, а блоки закалки выбирают None.

[Ссылка (Сфера охвата)]

1. Определение эффективности комплекта:

（1) Положительный контраст: существует типичная S - образная кривая усиления или значение Ct ≥ 35.

（2) Отрицательный контраст: значение Ct > 38 или без значения Ct, линия имеет прямую или легкую косую линию без периода экспоненциального роста.

2. Результаты образцов определяют:

（1) Положительный: значение Ct для результатов теста образца составляет < < 35 > или имеет значительный период экспоненциального роста.

（2) Сомнительно: значение Ct в результатах анализа образцов находится в диапазоне 35 - 38. На этом этапе образец должен быть повторно протестирован, если значение Ct результатов повторных экспериментов все еще находится в диапазоне 35 - 38, имеет очевидный период экспоненциального роста, он будет признан положительным, иначе отрицательный.

（3) Отрицательный: Ct - значение > 38 или отсутствие Ct - значения для результатов теста образца.

Ограничения метода проверки

Когда концентрация нуклеиновой кислоты в тестируемом образце была ниже самой высокой в этом наборе.В DI могут возникнуть ложноотрицательные результаты.

Этот набор предназначен только для предварительного скрининга образцов, и положительные результаты теста на этот набор должны быть дополнительно подтверждены методом культивирования.

[Внимание]

Лаборатории, использующие этот комплект, должны строго соответствовать правилам управления лабораториями для тестирования на генетическую ампликацию, опубликованным соответствующими частями государства;

Во избежаниеразложение РНК, процесс обработки образцов должен работать в условиях 0 - 4°C и обнаруживаться на борту сразу же после завершения эксперимента; Расходные материалы, используемые в процессе обработки образцов, должны быть обработаны без нуклеазы;

Товары во всех регионах являются специальными и не должны использоваться перекрестно во избежание загрязнения; Сразу же после завершения испытаний рабочий стол должен быть очищен;

При всасывании реакционной жидкости следует стараться избегать образования пузырьков; вверхПеред прибором PCR следует проверить, плотно ли перекрыты реакционные трубы, чтобы жидкое испарение не привело к неточным результатам;

Все реагенты в комплекте должны быть полностью расплавлены и смешаны при комнатной температуре перед использованием и должны мгновенно центрифужаться;

Все отрицательные и положительные контрасты, установленные в комплекте, должны быть переданы в зону подготовки образца до первого использования и храниться отдельно;

Чтобы предотвратить флуоресцентные помехи, следует избегать прямого контакта голыми руками.Реакционные трубки PCR, и следует избегать любой маркировки на них;

Всасывающая головка, которая использовалась в процессе тестирования, должна быть непосредственно поражена.10% хлорной кислоты в резервуаре для отходов, чтобы проверить конец реактора PCR, не вскрывать крышку и стерилизовать вместе с другими отходами после удаления; Рабочие столы и различные лабораторные материалы должны регулярно дезинфицироваться 10% хлорной кислотой, 75% спиртом или ультрафиолетовыми лампами;

Параметры, связанные с расширением прибора, должны быть установлены в соответствии с соответствующими требованиями настоящей инструкции; Различные партии реагентов нельзя смешивать; Использовать в течение срока действия.