- Электронная почта
- Телефон
-
Адрес
Шанхайская экспериментальная реактивная компания с ограниченной ответственностью
Шанхайская экспериментальная реактивная компания с ограниченной ответственностью
Шанхайская экспериментальная реактивная компания с ограниченной ответственностью
наша компания КленТак-ССеквенирующие ферменты представляют собой рекомбинантные белки, которые рекомбинантны и подготовлены путем многоэтапной очистки.
Определение активностиАктивная единица означает в 72℃Нижний, 1×AM буфер ПЦР1А,30 минВнутренний генерал 10 нмоль dNTPКоличество ферментов, необходимых для включения нерастворимых кислот.особенность
1. Особенно подходит ddNTP Реакция легирования изомодифицированных нуклеотидов
2.По сравнению с общей длиной Так ДНК Полимераза, этот фермент менее активен.
область применения
ddNTP Закон о прекращенииДНК Секвенирование (Секвенирование поколений)
метод удлинения реакции пирофосфата СНП анализ
Контроль качества
После тщательного контроля качества убедитесь, что продукт обладает максимальной активностью и чистотой.
Буфер для хранения ферментов
20 мМ Tris-HCl (pH 8,0), 100 мМ KCl, 1 мМ DTT, 0,1 мМ EDTA, 0,5% Nonidet P40, 0,5% Tween20 и 50% глицерина.
Примеры применения
Ниже приводятся примеры таких реакций: 50 мклстандарт ПЦРСистема, только для справочных целей. фактический ПЦРУсловия должны быть оптимизированы в соответствии с размером шаблона, экстракта и целевого сегмента, чтобы определить оптимальные условия реакции.
1)Составьте систему реакции по следующей таблице
компонент |
объем/ мкл |
Конечная концентрация |
10×AM буфер ПЦР 1 |
5 |
1 х |
dNTP(2,0 мм) |
5 |
0,2 мм |
Ссылки F(10 мкм) |
1.5 |
0,3 мкм |
СсылкиR(10 мкм) |
1.5 |
0,3 мкм |
Шаблон |
Изменяемый* |
/ |
КленТак-ССеквенирование ферментов (5U/мкл) |
0.5 |
2.5U |
ddH2O |
Изменяемый |
/ |
общий объем |
50 |
/ |
* Параметры использования шаблонной ДНК (50 мкл реакционной системы):
Геном человекаDNA100-1000 ng ; Микробный геном ДНК 10 - 100нг;Продукты PCR характерны для раздражения Каньяна; 1нг - 10%* ДНК плазмиды 5-30 нг; cDNA из РТ-реакции 1-5 мкл.
2)Реакция осуществляется при следующих условиях:
95℃ |
2-5 минут |
|
95℃ |
15 секунд |
25-35 циклов |
55 - 72℃ |
20 секунд |
|
72℃ |
1 кб/мин |
|
72℃ |
5 минут |
3)электрофорез агаринового геляПЦР Продукт, или последующая операция в экспериментальных целях.
Меры предосторожности1.ПЦР Условия и дикая природа Так ДНК Полимеразы схожи, для конкретных ДНК Реакция секвенирования может потребовать оптимизации.2. Способность к амплификации данного фермента более дикая Taq DНА Полимеразы снижаются,PCR Производство снизилось, не рекомендуется для обычных PCRА.3. Не может использоваться Такман зондовый метод q-ПЦРА.