Neuro2a (N2a) Клетки нейромы мозга у мышей

Презентация клеток

КлонированиеНейро-2АИз - заР.Дж.КлебеиФ.Х.РадлпроходитьAУ крыс были созданы аутогенные опухоли. Клетка производит большое количество микротрубчатого белка, который служит в нервных клетках системообразующей реакцией на поток осевой плазмы.

Клеточные свойства

1)Источник:Невролома головного мозга

2)формаА.Амиба - подобные стволовые клетки

3)Содержание:>1x10⁶ Количество клеток

4)спецификацияТ25Бутылкаили1 млУпаковка замороженных труб

5) Применение:Только для научного использования.

Перевозка и хранение:Сухой ледтранспортВосстановление, чтобы выжить.клеткаА.（1)1 млЗамораживающие трубы упаковываются для перевозки сухого льда, после получения-80Холодильник с градусами хранится в течение ночи и переходит в жидкий азот или непосредственно восстанавливается,Если бы лёд был чистым,Упала крышка холодильника,Повреждения и загрязнение клеток, пожалуйста, немедленно с намисвязь* * * * * * * * * * *2)Т25Бутылка для выживания.клеткаДоставка при комнатной температуре,получатьЗатем следуйте методам обработки после приема клеток.

После приема клетокОбработка:

1После получения клетки,75%Стены бутылок для дезинфекции алкоголяТ25Бутылка помещена37Помещение инкубаторов при температуре2-3hЕсли вы обнаружите поврежденную бутылку для культивирования, разлив жидкости и загрязнение клеток, пожалуйста, свяжитесь с нами вовремя после фотографирования.

2) Пожалуйста, войдите4или5XПодтвердите состояние клетки под микроскопом и сфотографируйте только что полученную клетку (10Х,20х) Каждый2 - 3Одна фотография, а также внешний вид культивирующей бутылки сохранены в качестве основы для состояния клетки при получении после продажи.

3)Стенные клетки: клетки в37Помещение в инкубатор2-3hПод микроскопом наблюдаются рост и стенка клеток, и некоторые из них образуют скопления из - за вибрации во время экспресс - доставки. Если посмотреть на плотность роста клеток под зеркалом,60%Ниже, можно удалить питательную среду, наполненную жидкостью в бутылке для культивирования (если есть клетки, которые не прикреплены к стенке, нуждаются в центробежной переработке, повторной подвеске в оригинальную бутылку для культивирования),Добавление новых специальных сред6-8 млПоместите в клеточный инкубатор, чтобы продолжить культивирование. Если плотность роста клеток70% - 80%Выше, клетки могут быть переданы. В процессе передачи клетки, которые выпадают из - за вибрации транспорта, нуждаются в центробежной переработке.

4)Примечание: Транспортные питательные среды (поливные питательные среды) больше не могут использоваться для культивирования клеток, замените их специальными питательными средами, недавно подготовленными в соответствии с условиями культивирования клеток в инструкции. Первые рекомендации по передаче клеток.Т25Культурная бутылка1А.2передавать из поколения в поколение

I.СредаИвоспитыватьЗамораживаниеУсловия готовы:

1)готовитьсяМЭМСреда;качественныйСыворотка коровы,10%*Двойное сопротивление,1%А.

2)Условия культивирования: Газовая фаза: воздух,95%· Углекислыйгаз,5%.Температура:37℃，Влажность инкубатора составляет70% - 80%А.

3)Замороженная жидкостьА.90В процентахСывороткаА,10% ДМСО，В настоящее времяАБА.

II.клеткаобработкаА.

1)Восстановление замороженных клеток.* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *

Будет содержать1 млЗамораживание клеточной суспензии37Быстрое размораживание в водяной бане при температуре °С, добавляется в состав4 - 6 мл СпециальноЦентробежные трубки питательной среды равномерно смешиваются. в1000RPMусловная центрифуга3-5 минутВыбросите верхнюю очищающую жидкость, специальную питательную среду для тяжелых суспензионных клеток. Затем добавьте клеточную суспензию6 - 8 мл СпециальноКультурная среда в бутылке (или чашке)37Культивирование на ночь при температуре °С. На следующий день под микроскопом наблюдался рост и плотность клеток.

2)Клеточная передача:ЕсликлеткаПлотность до80% - 90%，А именноВозможность осуществленияКультура поколенийА.

Для клеточной транскрипции стенки можно использовать следующие методы:

1. ВыброситьВыращивать очищение без кальцияИоны магния的ПБСМоющие клетки1-2разА.

2. присоединиться0.25% (%)в / вподжелудочная протеаза-0,53 мМ ЭДТАЮйКультивирование в бутылке(Т25Бутылка1-2 млА,Т75Бутылка2-3 мл)，Поместить37℃Культурный ящикСреднее пищеварение1-2минута(Трудно перевариваемые клетки могут правильно продлить время переваривания)АПотом под микроскопом.Клеточное пищеварениеСитуация,еслиКлетки в основном округлились.И выпадает.Быстро возвращайте консоль, стучитеСколько раз?После бутылкиприсоединиться3-4 млБ10%ФБССреда пришла.прекращениеперевариваниеА.

3.Слегка отшлепать и высосать.В1000RPMполосацентрифуга под шт.3-5 минутВыбросить очищающую жидкость, добавить1-2 млКультивирующая жидкость хорошо выдувается.Нажмите клеточную суспензию1А.2Процент делится на новый.Т25В бутылке, Добавить6-8 млНовая специальная среда, настроенная в соответствии с требованиями инструкции для поддержания жизнеспособности клеток, последующая передача в соответствии с реальной ситуацией1: 2 ~ 1: 5Доля выполняемыхА.

3) Замораживание клетокА.После получения клеток рекомендуется перед культурой3Для последующего экспериментального использования замораживаются семена клеток. нижеТ25Бутылка в качестве примера;

1. клеткаПри замораживаниисогласноПроцесс клеточной передачи собирает хорошо переваренные клетки в центрифужную трубку, и для определения плотности замораживания клеток можно использовать счетчики крови. Рекомендуемая плотность замораживания клеток1Х10⁶~ 1Х10⁷Живая клетка./ мl.

2. 1000 об/минЦентрифугирование3-5 минутУбрать верхнюю очистку. Используйте приготовленные клетки, чтобы заморозить жидкость, чтобы восстановить суспензионные клетки, нажмите каждый1 млЗамороженная жидкость содержит1Х10⁶~ 1Х10⁷Живая клетка./ млНазначается в криогенную трубку, которая распределяет клетки в криогенную трубку, отмечая имя, алгебру, дату и другую информацию.

3. Поместите замороженные клетки в коробку охлаждения,-80Ночь в холодильнике с градусами, а затем в емкости с жидким азотом для хранения. В то же время для последующего поиска и использования регистрируется местонахождение криогенных труб в контейнерах с жидким азотом.

Внимание:

1. Все клетки животных считаются потенциально биологически опасными и должны работать на платформе биобезопасности второго уровня, и обратите внимание на защиту, и все отходы и сосуды, подвергшиеся воздействию этой клетки, должны быть стерилизованы, прежде чем они могут быть выброшены.

2. Рекомендуется всегда использовать защитные перчатки, одежду и защитную маску при восстановлении замороженных клеток. Примечание: Замораживающая трубка, погруженная в жидкий азот, просачивается и медленно заполняется жидким азотом. При размораживании жидкий азот превращается в газовую фазу, что может привести к взрыву контейнера или сдуванию его крышки опасной силой, что приведет к образованию летающих обломков, наносящих ущерб людям.