Услуги по синтезу и модификации полипептидов

Описание экспериментальной технологии: Полипептидный синтез - это последовательность твердофазного синтеза, которая обычно синтезируется с C - конца (карбоксильный конец) на N - конец (аминокислотный конец). В прошлом полипептидный синтез осуществлялся в растворе, называемом жидким синтезом. С 1963 года, когда Merrifield успешно разработал метод синтеза твердофазных полипептидов, после постоянного совершенствования и *, сегодня твердофазный метод стал широко используемым методом синтеза полипептидов и белков, демонстрируя преимущества классического метода синтеза жидкой фазы *, что значительно снижает сложность очистки каждого этапа продукта. В целом полипептидный синтез делится на два вида: твердофазный и жидкий полипептидный.

Экспериментальные технические принципы:

Полипептидный синтезатор с твердой связью в качестве принципа реакции, в герметичном взрывозащищенном стеклянном реакторе аминокислоты в известном порядке (последовательность, как правило, от C - конца - конца карбоксильной группы до N - конца - конца аминокислоты) постоянно добавляются, реагируют, синтезируются, операция в конечном итоге получает полипептидный носитель. Метод твердофазного синтеза значительно уменьшает сложность очистки продукта на каждом этапе. Чтобы предотвратить побочные реакции, боковые цепи аминокислот, участвующих в реакции, защищены. Карбоксильные радикалы свободны и должны активироваться до реакции.

Экспериментальный рабочий процесс:

Де - консервация: колонны и мономеры, защищенные Fmoc, должны удалять защитные группы аминокислот с помощью - щелочного растворителя (пиперидин).

Активация и скрещивание: карбоксильные основания следующей аминокислоты активируются активирующим агентом. Активированные мономеры соединяются со свободными аминокислотными реакциями, образуя пептиды

Клавиши. Этот шаг завершается с использованием большого количества реагентов сверхконцентрации. Цикл: Эта двухступенчатая реакция повторяется до тех пор, пока синтез не будет завершен.

3. стирание и снятие защиты: полипептиды смываются с колонны, а их защитная группа смывается и обезвреживается обеззараживающим агентом (TFA).

Типы полипептидных модификаций:

1. Технология маркировки конца C:

C - концевое амидирование (Amidation, C - termainal)

Алдегидрирование (Aldehydes), алкилирование (Alcohols), pNA (P - Nitroanilide)

AMC、AFC、 Тиогликоэтиламинирование (Cysteamide), этерилирование (Ester), N - алкилирование (N - AlkyI Amides) и т.д.

2. Технология маркировки на N - конце:

Ацетилирование Acetylated (Acetylated), Palmytolyl, HYNIC, биомаркеры (Biotinylated), бромоацетилирование (Bromoacetylated)

Реакция хелатирования (DOTA, DTPA conjugated), формальдегидрирование (Formylated), тетраалкилирование, гептаалкилирование (Myristoylated) янтаризация, подкисление пальмы, подкисление яблок, жирное подкисление и т.д. (Succinylated)

3. модификация флуоресцентных маркеров:

C - end модификация: AFC, AMC, Dap (Dnp), Lys (Dye), pNA, Rh110

N端修饰: Bodipy-FL, Cy3, Cy5, Texas Red, 5-Tamra, 5-odoacetamido fluoresceinRhodamine 110 и Rhodamine B Люциферин, EDANS

ФАМ, ФИТК, МКА, Рокс, Сульфородамин 101, 5-ТАМРА

4. Циклическая реакция:

Голова и хвост образуют кольцо, промежуточное кольцо, специальное кольцо (N - > C or Head to Tail)

2 - на - 2 - на - серная связь, 3 - на - дисульфидная связь (S - S bond formation). Triulide formation (Cyclic - natural peptides)

5. Метилирование модификаций:

Метилирование боковой цепи Lys(For),LysS(Me), Lys(Me)2, Lys(Me)3, Arg(Me)2 symmetrical, D-Tyr(Me),D-Tyr(Et)N Конечное метилирование (N - Me Arg, N - Me - Asp, N - Me - Glu, N - Me - Leu, N - Me - Nle, N - Me - Nva, N - Me - Pe, N - Me - S N -

Me-Ser, N-Me-Trp, N-Me-Thr, N-Me-Val)

6 Некоторые специальные модификации:

Различные сцепления (BSA, KL H conjugated peptides for antibody production), фосфатирование (Phosphoserine, Phosphothereonine, Phosphotyrosine), сульфирование (Sulfated Tyrosine or Serine), MAPS (Multiple Antigenic Peptide), гликоптиды (Glycopeptides) PEG модификации (PEGylation)

Внимание экспериментам:

Клиенты предлагают:

Полипептидные последовательности, количество, чистота и особые требования

Замороженные сухие полипептиды могут сохраняться при температуре 20 градусов или при комнатной температуре

3. Растворные пептиды гораздо менее стабильны, чем замороженно - сухие формы, и раствор должен сохраняться на нейтральной PH (5 - 7) - 20 градусов.

Во избежание повторного замораживания образцов,ХаоХранить мелкие образцы.

Критерии доставки:

Тайваньские полипептиды, данные.

Прочее:

Большинство полипептидовСюаньРастворитель - это сверхчистая вытяжная вода, а разреженная Z - кислота или аммиак также помогают растворять щелочные или кислые полипептиды соответственно. Если эти методы используют полипептиды, которые не растворяются позже, рекомендуется использовать DMF, мочевину, гуанидиниам, хлорид, acetonitnle для растворения.

Набор ELISA бесплатно для тестирования и экспериментов