Информация о специальных столбцах
Специальная хроматографическая колонка Venusil Stachydrine предназначена для анализа гидросульфидов соляной кислоты в пробиотиках. Продукт основан на силиконе, связывающей фазе, благодаря использованию нейтральной амидной группы, в гидрофильном хроматографическом режиме имеет хорошую избирательность к сильным полярным, водорастворимым щелочным органическим соединениям.
HILIC представляет собой гидрофильную хроматографическую модель, стирка которой организована в порядке повышения гидрофильности / полярности соединения, увеличение доли органической фазы в фазе потока увеличивает удержание раствора, типичной фазой потока является ацетонитрил (40% - 97%) / вода (или летучая буферная соль), в то время как она может быть использована для более летучей фазы потока или буферной соли, что облегчает подключение к масс - спектрометру и детектору испарительной люминесценции.
Методы испытаний и аналитические карты гидросульфата
Ссылка на хроматографические условия в соответствии с определением содержания пробиотика в китайской фармакопее версии 2015:
В качестве наполнителя используется пропиламид - связанный силикон, а в качестве проточной фазы используется раствор ацетонитрила - 0,2% ледяной уксусной кислоты (80: 20), обнаруживаемый детектором рассеяния испарительного света. Теоретические панели башни должны быть рассчитаны на основе соляной кислоты сульфидов не менее 6000.
Колонна хроматографии: Venusil stachdrine; 5μm，4.6*250mm
Номер заказа: VH952505 - LH
Текущая фаза: ацетонитрил: 0,2% раствор ледяной уксусной кислоты = 80: 20 (v / v)
Скорость потока: 0,5 мл / мин
Столбчатая температура: 20°C
Детектор: ELSD (детектор рассеяния испарительного света)
Образец: 10 мкл
Время хранения / min |
Количество теоретических башен |
коэффициент буксировки |
17.888 |
15203 |
1.06 |
установка
1. Раскройте упаковочную коробку колонны, чтобы подтвердить тип и спецификацию хроматографической колонны.
2. Отверните герметичные заглушки на обоих концах колонны и положите их обратно в коробку для хранения.
В соответствии с направлением фазы потока, указанным на колонне, хроматографическая колонна подключается к контрольному прибору с помощью головки PEEK и трубки PEEK или трубы из нержавеющей стали.
4. Используя соединительные трубы малого внутреннего диаметра, аналитические колонны обычно используют трубопроводы с внутренним диаметром 0,25 мм (0.010 ") и сокращают длину соединительных трубопроводов, тем самым уменьшая мертвый объем.
Использование и техническое обслуживание
защита
Обратите внимание на безопасность при подключении и использовании хроматографических колонн, носите перчатки, маски и защитные очки, утечка растворителей и образцов по любой причине (плохое соединение трубопроводов, старение трубопроводов, старение головок PEEK), которая непосредственно касается оператора, может иметь последствия для здоровья оператора.
Направление использования
Во время использования хроматографическая колонна должна поддерживать направление фазы потока в соответствии с направлением стрелки, обозначенным хроматографической колонной, и не рекомендуется использовать в обратном направлении, если нет особых обстоятельств (например, при очистке загрязняющих веществ в передней части хроматографической колонны можно учитывать обратную промывку с низкой скоростью потока)
Активация
При выходе из установки новой специальной колонны соляной кислоты сульфонат - щелочи жидкая фаза в колонне представляет собой ацетонитрил, который может ненадолго высыхать во время хранения и транспортировки.Таким образом, новый столб должен быть активирован с использованием ацетонитрила более чем в 20 раз больше цилиндрического объема перед первым использованием, а затем выбрать условия работы, необходимые для эксперимента, чтобы сбалансировать, если фаза потока, необходимая для эксперимента, содержит буфер, необходимо использоватьОрганическая фаза и вода в равных пропорциях с потоком переходят, чтобы избежать соляного анализа.
Предварительная обработка образцов
Чтобы избежать засорения проб или твердых примесей в проточной фазе передней решеткой хроматографической колонны, все реагенты и образцы, используемые в эксперименте, должны быть фильтрованы с использованием микропористого фильтра 0,45 мкм или 0,22 мкм перед использованием. Для образцов с более сложной матрицей рекомендуется использовать систему твердофазной экстракции SPE для предварительной обработки.
Передвижная фаза и образец pH
Для того, чтобы хроматографическая колонна получила лучший срок службы и эффект, следуйте рекомендациям производителя для использования в пределах pH, соляной кислоты сульфидов специальный столб pH диапазон применения 2.0 - 6.0, слишком высокий pH может заставить силикон раствориться, слишком низкий pH может привести к частичному или полному выпадению связи, снижение производительности колонны, так что экспериментальные результаты не будут воспроизведены.
Растворитель для подвижных фаз и проб
Следует избегать использования в текучей фазе фосфатов или других буферных солей, которые не растворяются в органической фазе в высокоорганической фазе, а также повреждения хроматографических столбов в результате соляного анализа. Чтобы не нарушать механизм разделения HILIC, не используйте трифторуксусную кислоту и другие ионные пары реагентов. По возможности выберите образец растворенного в проточной фазе, не используйте растворенный в воде или DMSO образец, чтобы избежать пиковой вариации, вызванной эффектом растворителя.
Столбчатое умеренное давление
Максимальная рабочая температура должна быть ниже 60°C, длительное использование при высоких температурах (> 60°C) может повредить хроматографическую колонну, что наиболее заметно при Ph > 6.0. Колонна выдерживает давление 400 бар, но длительное пребывание в состоянии высокого давления влияет на производительность и срок службы хроматографической колонны, и рекомендуется, чтобы давление колонны было ниже 200 бар при нормальном использовании.
Защитная колонна
При анализе проб с более сложной матрицей, чтобы обеспечить более длительный срок службы хроматографической колонны, рекомендуется использовать перед хроматографической колонной защитную колонну, которая блокирует частицы в системе и замедляет химическое загрязнение образца фиксированной фазой.
Процедура промывки
После использования хроматографической колонны необходимо последовательно использовать 50% ацетонитрила, 5% ацетонитрила, 100% ацетонитрила для промывки не менее чем в 20 раз объема колонны 0,5 мл / мин, если перед колонной есть соединительная защитная колонна, необходимо отделиться от хроматографической колонны для промывки отдельно.
Хранение
При хранении хроматографической колонны в хроматографической колонне не должно оставаться воды или буфера, а ацетонитрил может использоваться в качестве растворителя для герметизации хроматографической колонны. Длительно неиспользуемые хроматографические колонны, чтобы предотвратить высыхание колонны, рекомендуется регулярно промывать хроматографические колонны, после промывки затычками, чтобы затянуть две хроматографические колонны
