TCCSUP + LUC + RFP Раковые клетки мочевого пузыря человека + LUC + RFP

TCCSUP + LUC + RFP Раковые клетки мочевого пузыря человека + LUC + RFP

Клеточные свойства

РодА.Источник (Homo sapiens)

Источник организацииА.Мочевой пузырь (Мочевой пузырь)

болезньА.Рак (Карцинома)

Возраст: 67Возраст (67 лет)

полА.Женщины (Женская)

Тип клеткиА.Эпидермальные клетки (Эпителиальное)

Характеристика ростаА.Стены растут (Придерживающийся)

Содержание:>1x10^6Количество клеток

спецификацияТ25Бутылка или1 млУпаковка замороженных труб

Применение: только для научного использования.

Перевозка и хранение

Сухой лед транспортирует и восстанавливает жизнеспособные клетки.

（1)1 млЗамораживающие трубы упаковываются для перевозки сухого льда, после получения-80Степень холодильника после того, как он хранится на ночь в жидком азоте или непосредственно восстанавливается, если вы обнаружите, что сухой лед испарился чистым, крышка холодильника выпала, повреждена и клетки загрязнены, пожалуйста, немедленно свяжитесь с нами.

（2)Т25Бутылка для восстановления выживших клеток при комнатной температуре отправляется, после получения, в соответствии с методом обработки после приема клетки.

Обработка клеток после приема

1После получения клетки,75%Стены бутылок для дезинфекции алкоголяТ25Бутылка помещена37Помещение инкубаторов при температуре2-3hЕсли вы обнаружите поврежденную бутылку для культивирования, разлив жидкости и загрязнение клеток, пожалуйста, свяжитесь с нами вовремя после фотографирования.

2) Пожалуйста, войдите4или5XПодтвердите состояние клетки под микроскопом и сфотографируйте только что полученную клетку (10Х,20х) Каждый2 - 3Одна фотография, а также внешний вид культивирующей бутылки сохранены в качестве основы для состояния клетки при получении после продажи.

3) Клетки, прикрепленные к стенке: клетки в37Помещение в инкубатор2-3hПод микроскопом наблюдаются рост и стенка клеток, и некоторые из них образуют скопления из - за вибрации во время экспресс - доставки. Если посмотреть на плотность роста клеток под зеркалом,60%Ниже, можно удалить питательную среду, наполненную жидкостью в бутылке для культивирования (если есть клетки, которые не прикреплены к стенке, нуждаются в центробежной переработке, повторной подвеске в оригинальную бутылку для культивирования),Добавление новых специальных сред6-8 млПоместите в клеточный инкубатор, чтобы продолжить культивирование. Если плотность роста клеток70% - 80%Выше, клетки могут быть переданы. В процессе передачи клетки, которые выпадают из - за вибрации транспорта, нуждаются в центробежной переработке.

4Примечание: питательная среда для транспортировки (среда для орошения) больше не может использоваться для выращивания клеток, пожалуйста, замените ее на новую, подготовленную в соответствии с условиями культивирования клеток инструкцииСпециальныйКультурная среда для выращивания клеток. Первые рекомендации по передаче клеток.Т25Культурная бутылка1А.2Поколения.

I. Подготовка питательных сред и условий замораживания культур:

1) МЭМСреда+10%ФБССыворотка крупного рогатого скота+ 1% NEAA + 1% P / SДвойное сопротивление

2) Условия культивирования: газовая фаза: воздух,95%· Углекислыйгаз,5%.Температура:37Температура Цельсия, влажность инкубатора70% - 80%А.

3) Замороженная жидкость:90%Сыворотка,10%ДМСОВ настоящее время используется нынешнее распределение.

II. Клеточная обработка:

1) Реанимация замороженных клеток:

Будет содержать1 млЗамораживание клеточной суспензии37Быстрое размораживание в водяной бане при температуре °С, добавляется в состав4-6 млСпециальныйЦентробежные трубки питательной среды равномерно смешиваются. в1000RPMусловная центрифуга3-5 минутВыбросить очищающую жидкость,СпециальныйКультурная среда тяжелые висячие клетки. Затем добавьте клеточную суспензию6-8 млСпециальныйКультурная среда в бутылке (или чашке)37Культивирование на ночь при температуре °С. На следующий день под микроскопом наблюдался рост и плотность клеток.

2) Клеточная передача: если плотность клеток достигает80% - 90%Можно проводить культуру передачи.

Для клеточной транскрипции стенки можно использовать следующие методы:

1. Выбросить культуру очищения, используя ионы без кальция и магнияПБСМоющие клетки1 - 2Восемь пунктов.

2. присоединиться0.25% (%)в / вподжелудочная протеаза-0,53 мМ ЭДТАВ бутылках (Т25бутылка1-2 млА,Т75бутылка2-3 мл), помещены37переваривание в инкубаторе1 - 2Минуты (трудно перевариваемые клетки могут правильно продлить время переваривания), затем наблюдайте за перевариванием клеток под микроскопом, если большая часть клеток округлится и выпадает, быстро возвращайте консоль, постучите несколько раз в бутылку с культурой и добавьте3-4 млсодержащий10%ФБСКультивирующая среда для прекращения пищеварения.

3. Слегка ударить и высосать,1000RPMусловная центрифуга3-5 минутВыбросить очищающую жидкость, добавить1-2 млКультивирующая жидкость хорошо выдувается. Нажмите клеточную суспензию1А.2Процент делится на новый.Т25В бутылке, Добавить6-8 млНастроить новый согласно инструкциямСпециальныйКультивная среда для поддержания жизнеспособности клеток, последующая передача в соответствии с реальной ситуацией1: 2 ~ 1: 5Доля выполняется.

3) Замораживание клетокА.После получения клеток рекомендуется перед культурой3Для последующего экспериментального использования замораживаются семена клеток.

TCCSUP + LUC + RFP Раковые клетки мочевого пузыря человека + LUC + RFP