Скринер iQue PLUS

Система скрининга сверхвысокопроизводительных суспензионных клеток / микрошариков серии iQue Screener американской компании Inlicyt является основным продуктом Inlicyt, анализирующим взвешенные клетки и микрошарики с использованием принципов потока, и представляет собой высококонтрастный фильтр, который анализирует 96 - и 384 - отверстия, а HD - тип анализирует 1536 - отверстий, имеет скорость обнаружения и комплексное программное обеспечение для анализа. В линейке iQue Screener три модели: iQue Screener, iQueScreener HD и iQue Screener.

Реальное решение -Взвешенные клетки/фильтрация с высоким потоком микрошариков
Высококачественный скрининг способствует разработке лекарств, предоставляя богатые данные, и становится обычным процессом в процессе разработки лекарств. Тем не менее, скрининг с высоким содержанием ограничивается клетками, прикрепленными к стенке, и не может охватить более важные области исследований. Американская InliCyt запустила систему скрининга iQue Screener, которая анализирует взвешенные клетки и микрошарики, чтобы предоставить быстрые экспериментальные данные с высоким содержанием для сегодняшних скрининговых экспериментов

• Повышение эффективности разработки малых и средних молекулярных лекарств в экспериментах по поверхностному скринингу путем проведения высокопоточного функционального скрининга суспензионных клеток;
• Получив данные о связывании антигенов и перекрестных реакциях одновременно, мы получаем лучшую информацию о гибридных опухолях из исследований по разработке антител, а цели скрининга остаются в их естественной конфигурации.
• Обеспечить, чтобы дополнительные прогнозы экстракорпоральной токсичности были получены с помощью полностью автоматизированных многоконечных экспериментов, которые анализируют здоровые свойства тысяч отдельных клеток в секунду.

Интегрированные решения

Интеграция инструментов, программного обеспечения и наборов фильтрационных решений позволяет исследователям анализировать взвешенные клетки со скоростью и эффективностью скрининга.
iQue^ТМСкринерКак работать
iQue^ТМСистема скрининга представляет собой высокопоточную платформу скрининга на основе проточного цитометра, которая доставляет непрерывный поток образцов детектору, который собирает множественные показания из одной клетки. Этот уникальный метод отбора проб может доставлять клетки или другие содержимые из микропористой пластины в проточный цитометр с непрерывным воздушным интервалом, чтобы обеспечить точное отслеживание и минимизировать перекрестное загрязнение zui. Окончательный результат Zui занимает всего несколько минут, а не часов, и может формировать экспериментальные результаты на основе микропористой пластины в виде легко интерпретируемой тепловой карты (heat map).


iQue^ТМСкринерОсобенности
Более высокая эффективность экспериментов.

• Проверьте свою библиотеку за несколько дней, а не месяцев
• Объем входного образца может быть ниже 1 мкл, что снижает стоимость реагента
• Можно запускать 96 - дырочную пластину за 3 минуты и 384 - за 12 минут.
• Он может быть интегрирован с манипулятором и другими автоматизированными рабочими блоками.
• Совместимые клетки, микрошарики и их смеси

Больше физиологической релевантности.

• Можно анализировать смеси различных клеток и считывать данные отдельных клеток.
• Может просеивать суспензионные клетки и фильтровать объекты в естественной конфигурации
• Сбор множественных показаний по четырем флуоресцентным каналам
• Измерение размеров и размеров немаркированных объектов

Более стабильные результаты экспериментов.

• Шесть уровней измерения обеспечивают чувствительные и надежные результаты экспериментов
• Десять тысяч отдельных клеток, чтобы получить лучшую статистику в каждом отверстии

Легче использовать

• Поддержка полного рабочего процесса
• Анализ динамики в реальном времени
• Создание мгновенных отчетов
• Специальные наборы для применения

Сверхвысокая пропускная способность, ваш сильный помощник
приложение
Разработка антител (Открытие антител)

• Скрининг гибридных опухолей (Hybridoma Screening)
• Определение перекрестной реактивности (Determining Species Cross - Reactivity)
• Оценка продуктивности антителосекреционных линий (Assessing Productivity of Antibody - Secreting Cell Lines)
• Библиотека IgG (Screening a Human Germline IgG Library)

Эксперимент по экстракорпоральной токсичности (В витро токсикология)

• Количественная индукция микроядра (Quantification of Micronucleus Induction)
• Обнаружение апоптотических событий (Detection of Apoptotic Events)

Феноменальный скрининг (Phenotypic Screening))

• Скрининг соединений, вызывающих дифференциацию клеток - предшественников костного мозга (Screening for Compounds that Induce Myeloid Progenitor Cell Differentiation)
• GFP Expression Screening in Multiple Cell Lines (GFP Expression Screening in Multiple Cell Lines)
  

Разработка антител
Система фильтрации InliCyt в сочетании с набором реагентов MultiCyt позволяет одновременно обнаруживать несколько конечных точек, помогая идентифицировать и описать антитела в хранилище клонов с высоким потоком. Кроме того, способность применять суспензионные клетки для анализа позволяет целевому веществу проходить скрининг в их естественной конфигурации, что позволяет получить лучшую информацию о гибридных опухолях.
Скрининг гибридных опухолей
Сочетание системы фильтрации InliCyt и набора реагентов MultiCyt Hybridoma Screening Kit позволяет оптимизировать весь экспериментальный процесс. Этот экспериментальный метод смешивания и последующего обнаружения устраняет многие из существующих шагов в начальном сите, одновременно оценивая свойства связывания и перекрестной реакции антигенов.

Целевые клетки (немаркированные) и контрольные клетки (маркеры кальциевого флавона) смешиваются и распределяются в микропористой пластине. Затем в репозиторий гибридных опухолей добавляются измеренные антитела, которые вылупляются вместе с обнаруженными антителами с красной флуоресценцией. Затем с помощью iQue анализируются микропористые пластины, а также обнаруживается связь антител в суспензии гибридной опухоли с целевыми клетками и группами контрольных клеток. Соединение с контрольными клетками продемонстрировало перекрестную реактивность и неспецифическую связь, обеспечивая внутренний контроль для экспериментов с каждым отверстием.

Эксперименты с необработанными клетками позволяют проводить скрининг антител на слоистых поверхностях, что невозможно в ELISA и других экспериментах с очищенными белками, поскольку антигены часто теряют сворачивание и инактивируются во время очистки.
Определяет межвидовую реактивность
Многофункциональные возможности системы скрининга InliCyt позволяют интегрировать межвидовую реактивную активность антител в разработанный процесс скрининга. Набор реагентов MultiCyt Cell Encoder Kit позволяет одновременно обнаруживать пять клеточных линий в каждом отверстии. Эксперимент позволяет легко идентифицировать высококачественные клоны, способные пересекаться с целевыми антигенами различных семейств, которые являются более мощными кандидатами для доклинических исследований.

Родословные и генетически модифицированные клетки, экспрессирующие рецепторы мышей, крыс, макак и людей, были помечены и смешаны в одном образце. Среди них неинвазированные родительские клеточные линии использовались в качестве отрицательного связывающего контроля для каждого образца. Образцы были добавлены в 96 - пористые микропористые пластины для проведения экспериментов по связыванию антител, а затем последовательно добавлены в предварительный скрининг для обнаружения антител и второй скрининг для обнаружения антител. После эксперимента клеточная линия каждого образца была подтверждена и оценивалась индивидуально, создавая кривую аффинитета. Эксперимент проводился в 4 микропористых пластинах с 96 отверстиями и получил 12 антител в 4 различных экспериментальных условиях, 8 доз кривых, все эксперименты были завершены в течение часа.
Оценка продуктивности секреционных линий антител
Многофункциональные возможности системы фильтрации InliCyt в сочетании с набором реагентов Multi - Cyt IgG Count и Capture Kit повышают шансы на успешное выявление высокопроизводительных клеточных линий. В отдельных экспериментах уровни антител в отдельных клетках были получены путем одновременного определения количества выделенных антител, количества клеток и клеточной активности.

Антитела, выделенные в образце, соединяются с захваченными микрошариками и обнаруживаются флуоресцентными маркированными реагентами. Добавьте специальный краситель, который маркирует неактивные клетки, чтобы определить соотношение между активными и неактивными клетками. Анализируя микропористые пластины, каждый образец записывает три показания одновременно: уровень выделенных антител, общее количество клеток и процент неактивных клеток. Это позволяет легко вычислить уровень антител, выделяемых каждой клеткой.
Скрининг человеческих половых клетокИгГКу
С помощью системы фильтрации InliCyt могут быть разработаны методы скрининга, которые подходят для антигенов, экспрессируемых на поверхности клетки, и могут обнаруживать несколько конечных точек. Компания Fabrus Inc. (San Diego, California) разработала библиотеку Fab для репродуктивных клеток человека и провела прямой скрининг около 10 000 IgG на поверхностные целевые антигены клеток млекопитающих. Он выполняется с помощью системы HTFC - скрининга, которая позволяет целевому IgG просматриваться в естественной среде на поверхности липидной мембраны.

Клетки используют GFP и целевые антигены для кратковременной общей транскрипции, а затем каждая группа выражает один из трех различных целевых антигенов, помеченных определенным количеством кальциевого флавона в качестве клеточного кодирующего красителя. Перекрашенные маркерные клетки физически смешиваются в отдельные образцы и помещаются на микропористые пластины для скрининга библиотеки IgG для этих образцов. Сигналы GFP используются для подтверждения того, что клетки экспрессируют антигены, а клеточные кодирующие красители позволяют трем клеткам проводить эксперименты одновременно, чтобы определить и проанализировать каждый объект. Отрицательные GFP клетки являются внутренними отрицательными контрастами, которые не выражают целевые антигены. В сочетании с IgG на клетках было проведено вторичное тестирование с помощью флуоресценции, и каждая группа окрашивания была оценена.
Эксперимент по экстракорпоральной токсичности
Система скрининга IntlliCyt анализирует здоровые свойства тысяч клеток в растворе за 1 секунду, обеспечивая ранний скрининг генотоксичности для разработки лекарств с использованием полностью автоматизированного упрощенного рабочего процесса с набором реагентов MultiCyt.
Количественная индукция микроядра
Микроядерные эксперименты in vitro, проведенные в системе скрининга InliCyt, с помощью набора реагентов MicroFlow Kit in vitro от Litron (Рочестер, Нью - Йорк) могут надежно обнаружить изменения в микроядрах взвешенных и стенных клеток, вызванные генотоксичными соединениями. В сочетании с автоматизированным анализом 384 микропористых пластин эксперименты, которые первоначально занимали 16 часов, теперь могут быть завершены всего за 30 минут, что позволяет микроядерным индукционным экспериментам достигать высокого потока на уровне скрининга.
Обнаружение случаев смерти
Системы, программное обеспечение и наборы приложений InliCyt оптимизированы и подтверждены для распознавания и описания конечных точек множественного апоптоза. Мониторинг таких индикаторов, как Caspase 3, Annexin V, митохондриальная деполяризация, клеточная активность и количество клеток одновременно или в разных комбинациях, чтобы получить лучшую корреляцию между концами и более полную картину процессов апоптоза. Сложные клеточные смеси также могут контролироваться для получения различной эффективности.

Типовой фильтр
Отбор соединений, вызывающих дифференциацию клеток - предшественников костного мозга
Система фильтрации InliCyt позволяет просеивать биологически значимые соединения, которые преодолевают стагнацию дифференциации протомиелоидных клеток, и легко определять соединения, которые стимулируют дифференциацию стволовых клеток, устраняя соединения, демонстрирующие клеточную токсичность.

Клеточная линия происходит от генетически модифицированных мышей, которые экспрессируют GFP под контролем инициирующего протона: дифференцированные клетки экспрессируют GFP (GFP +), а недифференцированные клетки не экспрессируют GFP (GFP). Одновременно проводится анализ активности клеток, количества клеток и зеленой флуоресценции под действием 350 000 соединений. Измеряя переднее рассеяние, боковое рассеяние и количество клеток в каждом отверстии, токсичные соединения можно определить без активного красителя и одновременно с GFP +. Термограмма микропористой пластины (Plate heat maps) позволяет одновременно изучать соединения, вызывающие дифференциацию (выраженную в клетках с положительным GFP) (GFP + plate), клеточную токсичность (выраженную в потере клеток) и соотношение, включающее несколько параметров (созданное для установления критериев отбора).
многоклеточныйГФПОтбор выражений
Совместимая со многими известными моделями GFP, система фильтрации InliCyt позволяет проводить поверхностный анализ групп с высоким потоком на взвешенных и стенных клетках. Можно определить и количественно оценить клетки, экспрессирующие GFP в группах клеток, которые временно трансформированы.

Упрощение процесса поверхностного скрининга групп позволяет непрерывно анализировать множественные конечные точки, получать больше данных (например, GFP - сигналы живых клеток) или параллельно анализироваться как единая конечная точка (процент выживаемости клеток и процент экспрессии клеток).

По каждому образцу микропористой пластины множественные данные позволяют получать более биологически значимую информацию для оценки данных. Липофентамин (LF2K) транскрипционный реактив в три раза больше (трипликатор) экспериментирует с клетками HepG2.