NISTmAb - это широко распространенное моноклональное антитело, предназначенное для использования в качестве образца при разработке новых технологий для представления белков * *. В этой прикладной литературе мы используем SUPR - DSF для получения лекций по дифференциальному сканированию флуоресцентного метода NISTmAb (DSE), и результаты Кайло сравниваются с тепловым методом сканирования по шкале жизни DSO. SUPR - DSE решает все два структурных домена NISTAB: CH2 (690C.CH3 (830) и FAB (94oC) с высоким разрешением. Кроме того, измеренные значения Тм согласуются с сообщениями в литературе. Эти результаты свидетельствуют о том, что применение SUPR - DSF позволяет легко получать высококачественную информацию о стабильности белка.

Выводы:

SUPR - DSF компании Protein Stable позволяет быстро и точно измерять температуру цепи путем обнаружения пикового смещения флуоресценции из белка. Результаты показали, что SUPR - DSF может получить точную температуру цепи решения, включая сверхвысокую температуру развязки цепи, такую как домен Fab (940C). Это также подтверждает, что SUPR - DSF, основанный на эндогенной флуоресценции, может получать результаты, соответствующие DSC. Преимущество испытаний с использованием 384 - пористой пластины заключается в увеличении потока, повышении удобства и снижении расхода образцов.

Метод:

NISTmAb с концентрацией 1 мг / мл изготавливается в жидкости L - гистаминового замедлителя pH6 и добавляется к 384 отверстиям микропористой пластины LPCR с количеством 104 л на отверстие. Процедура непрерывного смешивания в SUPR - DSF устанавливается для измерения флуоресцентных каналов 150C - 105oC со скоростью нагрева 10C в минуту, а данные, полученные флуоресцентным спектром, вычисляются методом BCM и количественно измеряются отклонения спектра. Данные BCM обрабатываются в функции температуры и преобразуются в производную первого порядка для последующего анализа. Температура цепи решения рассчитывается на основе пикового значения производной. Методы и результаты всех образцов доступны.