В процессе отбора проб микроорганизмов перекрестное загрязнение может быть вызвано остатками оборудования, работой персонала, загрязнением между микроорганизмами окружающей среды или образцами и требует строгих мер защиты от загрязнения со всего процесса. Ниже приведены стандартные оперативные руководства и технические элементы по сценариям:
I. Предвыборное оборудование и стерилизация расходных материалов
1. Инструкции по стерилизации оборудования
Многоразовое оборудование:
Металлические пробоотборники (например, ударные пробоотборники): пастеризация паров высокого давления при температуре 121°C в течение 20 минут (GB / T38512 - 2020) или использование 70% этанола + жжение пламенем (для аварийной обработки на месте).
Пластиковые компоненты (например, трубопроводы пробоотборных насосов): пропитываются 0,1% пероксиуксусной кислотой в течение 30 минут, затем промываются стерильной водой 3 раза, ультрафиолетовое облучение после сушки (254 нм, ≥ 30 минут).
Одноразовые расходные материалы:
Петри для выращивания, мешки для отбора проб и т. Д. Требуются продукты радиационной стерилизации (облучение кобальтом - 60, доза ≥ 25 кг Гy), проверка целостности упаковки перед вскрытием (стандарт ISO 11607 - 1).
2. Проверка стерилизационного эффекта
Биологический мониторинг после каждой стерилизации: введение в полосу спор бактерии ATCC7953 термофильной Bacillus, культивирование после стерилизации (56°C, 48 часов), количество колоний должно быть 0 (GB8599 - 2021).
II. ОПЕРАТИВНАЯ СИСТЕМА ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ ЗАТРАГИВАНИЯ НА ОПЕРАТИВНОМ ОПЕРАТЕ
1. Руководящие принципы стерильной эксплуатации персонала
Требования к защите третьего уровня:
Общая среда: носите одноразовую лабораторную одежду + медицинские перчатки (например, бутадиен - нитрильные перчатки) и протрите поверхность перчатки 75% этанолом перед взятием проб.
Окружающая среда с высоким риском (например, клинический образец): необходимо носить стерильный изоляционный костюм + защитные очки + двухслойные перчатки и менять внешние перчатки 1 раз на образец.
Правила действия:
При отборе проб рука избегает пересечения над пробоотборником, удерживая головку на расстоянии 30 см от тела, направление дыхания и пробоотборник находятся под углом 90°.
Запрещается приводить в порядок волосы, трогать лицо в зоне отбора проб, если необходимо настроить оборудование, сначала нужно заменить перчатки или дезинфицировать руки.
2. Космическое зонирование и управление воздушными потоками
Разделение зон отбора проб:
Установите стерильную рабочую зону 50cm × 50cm, используйте рабочий стол для распыления 75% этанола, чтобы сформировать стерильную ленту, пробоотборник помещен в центр области.
Сценарии высокой чистоты (например, чистые камеры класса ISO5) должны работать в ламинарном рабочем столе (скорость ветра 0,36 - 0,54 м / с) или в шкафу биобезопасности (класс BSC - II).
Управление помехами воздушного потока:
Закройте окна и двери перед взятием проб, остановите работу системы кондиционирования воздуха на 10 минут (избегайте воздушного потока, несущего экзогенные микроорганизмы) и контролируйте передвижение людей на расстоянии 1 метра.
III. Изоляция процесса отбора проб
1. Программа предотвращения перекрестного пробоотбора по партиям
Дезинфекция интервалов между партиями:
После каждого взятия образца корпус пробоотборника, отверстие для отбора проб и рабочий стол вытираются 75% этанолом, а следующий отбор проб проводится через 5 минут.
При сборе различных типов образцов (например, образцов окружающей среды и клинических образцов) необходимо заменить полный набор пробоотборных головок и трубопроводов, чтобы избежать путаницы с остаточными микроорганизмами.
2. Технология изоляции специальных образцов
Обработка проб высокой концентрации:
При обработке проб с высокой нагрузкой, таких как сточные воды, экскременты и т. Д. Используйте пробоотборник с фильтрацией с отрицательным давлением (например, MilliporeEZ - Pak), который сразу же после отбора проб запечатывает фильтр, чтобы предотвратить распространение аэрозоля.
Пробы патогенных микроорганизмов:
Отбор проб производится с использованием биобезопасных пробоотборников (например, закрытых пробоотборников с фильтрацией HEPA), которые затем помещаются в герметичные металлические емкости (внутренний слой водопоглощающей бумаги + 0,5% раствора гипохлорита натрия).