I. Перед выбором: определение потребностей и подготовка базы

Планирование перед отбором проб является предпосылкой для обеспечения эффекта, необходимо разработать целевые программы в сочетании с целями тестирования (например, мониторинг окружающей среды, оценка эффективности дезинфекции, научный анализ и т. Д.).

1. Разумный выбор типа пробоотборника

Отбор проб по различным принципам применим к различным сценариям и микробиологическим свойствам, и выбор соответствующего типа основан на:

Ударные пробоотборники (например, каскадный пробоотборник Андерсона, пробоотборник трещинообразных соударений): воздействие микроорганизмов на питательную среду или коллекторную мембрану с помощью высокоскоростного воздушного потока подходит для обнаружения живых бактерий, требующих культивирования (например, для определения общего количества колоний), и особенно для захвата микроорганизмов различного размера частиц (при каскадном ударе можно различать распределение аэрозолей по диаметру).

Фильтрующие пробоотборники (например, мембранные фильтрующие пробоотборники): Использование фильтрующих пленок (например, поликарбонатных, гибридных целлюлозных пленок) для перехвата микроорганизмов подходит для высокочувствительных тестов (например, количественных, вирусных тестов) или для одновременного анализа сценариев, в которых микроорганизмы связаны с частицами, но при этом необходимо обратить внимание на влияние материала фильтрующей пленки на микробиологическую активность (например, выбор низковсасывающих адсорбционных фильтров).

Отбор проб с осаждением (например, метод осаждения в плоской чашке): простой в эксплуатации, но неэффективный, подходит только для грубого микробиологического скрининга окружающей среды (например, ежедневный мониторинг в чистой камере) и не рекомендуется для отбора проб микроорганизмов с низкой концентрацией или небольшим размером частиц.

Центробежный пробоотборник: разделение микроорганизмов с помощью центробежных сил, подходит для отбора проб в мобильных сценах (например, в мастерских, общественных местах), преимущество заключается в небольшом размере, портативности, но эффективность захвата больше зависит от стабильности воздушного потока.

2. Оптимизация отбора улавливающих сред

улавливающая среда (питательная среда, фильтрующая мембрана, всасывающая жидкость) непосредственно определяет эффективность захвата и выживаемость микроорганизмов:

Выбор питательной среды: выбор специальной питательной среды в соответствии с целевыми микробиологическими свойствами (например, обнаружение бактериального питательного агара, грибка картофельного глюкозы агара PDA, патогенной бактериальной селективной питательной среды); Убедитесь, что питательная среда свежая (охлаждается при температуре 4°С после приготовления не более 7 дней), равномерная толщина (около 3 - 5 мм), избегая высыхания или загрязнения.

Отбор фильтрующих мембран: предпочтение отдается фильтрующим мембранам с низкой адсорбцией и высокой пористостью (например, мембранам ПТФЭ, нитроцеллюлозным мембранам) для уменьшения потерь микроорганизмов в результате статического электричества или адсорбции; Разрыв фильтра должен соответствовать микробному размеру (обычно используется 0,22 мкм или 0,45 мкм, а для отбора проб вируса - 0,1 мкм).

Выбор абсорбционной жидкости: при использовании в жидком абсорбционном пробоотборнике абсорбционная жидкость должна учитывать как « эффективность захвата», так и « поддержание микробиологической активности» (например, использование физиологического солевого раствора или буфера, содержащего 0,05% - 0,1% Твен 80, снижает микробное осаждение и адсорбцию; вирусный отбор может добавить сывороточный альбумин крупного рогатого скота BSA для защиты вирусной структуры).

3. Предотвращение загрязнения до отбора проб

Микробиологический отбор проб уязвим для внешнего загрязнения, необходимо строго контролировать « асептическую среду» перед отбором проб:

Пробоотборник (например, сопло ударного пробоотборника, фильтровальная оболочка, пробоотборник) должен быть предварительно стерилизован (автоклавная паровая стерилизация 121°C / 20min или сухая термическая стерилизация 160°C / 2h; пластмассовые детали могут быть стерилизованы в ультрафиолетовом диапазоне 30 мин после 75 - процентного вытирания спиртом).

Среды улавливания, такие как питательные среды, фильтрующие мембраны и т.д., должны быть загружены в стерильных условиях (например, на сверхчистом рабочем столе), чтобы избежать контакта с руками или загрязнения воздуха.

Перед отбором проб производится « предварительная балансировка» участков отбора проб (например, закрытие дверей и окон на 30 мин перед отбором проб в чистой камере, чтобы избежать возмущения воздушного потока, вызванного перемещением людей).

II. В выборке: Оптимизация параметров и эксплуатационных норм

Контроль параметров и эксплуатационные детали в процессе отбора проб лежат в основе повышения эффективности захвата и должны динамически корректироваться в соответствии с принципами пробоотборника и условиями окружающей среды.

Оптимизация основных параметров отбора проб

В зависимости от типа пробоотборника и требований к тестированию ключевые параметры корректируются для максимизации эффективности захвата:

Потоки отбора проб: Потоки должны соответствовать конструкции пробоотборника (например, рекомендуемый трафик пробоотборника Андерсона 28,3 л / мин, пробоотборник трещин может быть установлен на 10 - 30 л / мин). Низкий расход может привести к недостаточному улову микроорганизмов малого размера (< 5 мкм); Высокий расход может привести к потере активности микроорганизмов или разбрызгиванию питательных сред в результате воздействия воздушного потока. Рекомендуется откалибровать расход до отбора проб с помощью "прибора калибровки расхода" (погрешность контролируется в пределах ±5%).

Время отбора проб: необходимо сбалансировать "улов" с "микробиологической активностью". Краткосрочный отбор проб (5 - 15 мин) применяется в условиях высокой концентрации (например, в загрязняющих цехах) во избежание чрезмерного увлажнения среды или чрезмерного скопления микроорганизмов; Длительный отбор проб (30 - 60 мин) подходит для среды с низкой концентрацией (например, чистая комната, операционная), но следует иметь в виду, что время отбора проб ударным пробоотборником не должно превышать 60 мин (чтобы избежать высыхания питательной среды), а фильтрующий пробоотборник должен предотвращать засорение фильтрующей мембраны (большие частицы могут быть удалены путем предварительной фильтрации).

Высота и местоположение отбора проб: точки отбора проб определяются в соответствии с целью обнаружения:

Мониторинг окружающей среды: высота отбора проб составляет 1,2 - 1,5 м (выравнивается с дыхательной полосой человека), с 3 - 5 точками отбора проб в каждой зоне (равномерно распределены, избегая угла, вентиляционного отверстия, прямо над источником загрязнения).

Оценка эффективности дезинфекции: образцы должны быть взяты в одном и том же месте до и после дезинфекции, чтобы обеспечить согласованность сравнения.

Аэрозольная прослеживаемость: точки отбора проб могут быть установлены на разных высотах (например, 0,5 м, 1,5 м, 3 м) для анализа вертикального распределения микроорганизмов.

Управление стабильностью потока: при выборке проб избегайте прямого контакта пробоотборника с вентилятором, вентилятором или направлением движения человека; При необходимости отключите местное вентиляционное оборудование или закрепите пробоотборник с помощью ветрозащитного экрана, чтобы уменьшить отклонение отбора проб, вызванное возмущением воздушного потока.