1、Назначение:

Иммунопрофильные колонны могут избирательно всасывать охратоксин А в пробную жидкость китайской фармацевтической травы, тем самым оказывая очень целенаправленное очищающее действие на образец, очищенный после колонны, который может быть непосредственно использован для анализа HPLC или обнаружения LC - MS / MS после повторного растворения азота.

2、Общий обзор:

Охратоксин А (OhratoxinA, OTA) является токсичным метаболитом некоторых видов плесени и плесени, микотоксином с сильным почечным ядом и гепатотоксином, который вызывает тератогенные, мутационные и канцерогенные эффекты.

3、Принцип:

Определение основано на антигенах, антителах, антителах, соединенных внутри колонны, образцы после извлечения, фильтрации, медленно через охратоксин А иммунофильный столб, в иммунофиле и эндотоксин в сочетании с антителами, после промывки иммунофилы и колонны удалить другие несвязанные вещества, которые не были связаны. Оохратоксин А смывается метанолом и вводится в аналитические приборы для обнаружения.

4、Состав упаковки:

Каждая коробка содержит иммунородственные столбики охратоксина А различных характеристик и инструкцию.

5、Необходимые материалы, но не в коробке:

5.1 Оборудование и расходные материалы

--- HPLC/LC-MS/MS

- Оператор управления воздушным движением

- Воздушный насос

- Весы

- Высокоскоростные гомогенизаторы (со скоростью ≥10000 / мин) или качающийся стол

- Дробилка

- Пробный грохот

- - Измеритель: 100 мл / 10 мл

- Шприц: 20 мл

- Мигратор или пипетка: 1 мл

- однородный стакан (или 250 мл с пробковым конусом)

- - Бутылка для образцов

- - Измерительная бутылка

5.2 Реакторы

- Метанол (CH)₃OH): Процесс извлечения с анализом чистоты / процесса стирки с использованием хроматографической чистоты

- - Хлорид натрия (NaCl): анализ чистоты

- - Соляная кислота (HCl): анализ чистой

- Гидроксид натрия (NaOH): анализ чистоты

- Гидрофосфат натрия (NAH)₂ПО₄): Анализ чистый

- Дигидрофосфат калия (KH)₂ПО₄): Анализ чистый

- - - - KCl: Анализ чистый

- Твен - 20 (C)₅₈H₁₁₄О₂₆): Анализ чистый

- Вода (H)₂О) Дистиллированная вода или деионизация

6、Внимание:

- - Перед применением иммунные сродства и столбики должны вернуться к комнатной температуре (22 - 25°С).

- Сосуществующая колонна 2 - 8°C для хранения, не может быть заморожена.

- - Пожалуйста, используйте иммунофильный столб в течение срока действия.

- Выполнение вышеупомянутой операции требует опорожнения родственных и внутриколонных жидкостей.

- Объем взятия проб: при необходимости объем отбора проб может быть соответствующим образом увеличен или сокращен, при этом следует учитывать, что объем экстракта должен быть соответствующим образом изменен.

- - емкость колонны: емкость колонны составляет 200 нг, и когда содержание токсина, подлежащего проверке, в образце делится на величину разбавления, превышающую емкость колонны, необходимо соответствующим образом уменьшить объем вышеупомянутой жидкости и повторно обнаружить ее.

- - pH: верхний раствор pH для родственных колонн должен быть от 6 до 8, а для отклонения от этого диапазона pH должен регулироваться соляной кислотой или гидроксидом натрия.

- Последствия воздействия растворителя могут быть устранены путем согласования растворителя с потоком при обнаружении на борту.

- Охратоксин может вызывать рак, и его следует использовать в защитных средствах, таких как перчатки и маски.

- Использованные контейнеры и стандартные растворы пропитываются раствором гипохлорита натрия (5% V / V) на ночь.

7、Приготовление жидкости:

7.1 Экстракт

70% Метанол - водный раствор (V - метанол: V - вода = 70: 30): Возьмите 700 мл метанола, добавьте деионизированную воду с фиксированной емкостью до 1 л.

7.2 Буферный раствор фосфата (сокращенно: PBS)

Получение 8.00г хлорида натрия, 1,20г гидрофосфата натрия (или 2,92г гидрофосфата натрия), 0,20г дигидрофосфата калия, 0,20г KCL, растворенного в воде 900мл, регулируемого соляной кислотой от PH до 7,0±0,1, разбавленного водой до 1000мл.

7.3 Буфер температуры фосфата (PBST)

Возьмите 1 мл Твена - 20 и разбавьте буфер PBS до 1000 мл.

8.Обработка пробА.

- - - - 3 г ± 0,01 г проб (твердые образцы должны быть измельчены и подвергнуты 2 мм ситу с разделением проб), 3 г хлорида натрия в однородных бутылках с добавлением экстракта 60 мл (см. 7.1);

- Высокоскоростная гомогенизация (≥10000 р / мин) 2 мин.;

- центрифуга 10 мин (8000 р / мин);

- 5 мл очищающей жидкости в 50 мл бутылке, разбавленной буфером PBS до шкалы, смешанной, центробежной 15 мин (8000 р / мин);

- Взять 20 мл очищающей жидкости для периммунофильного очищения.

Разбавленное кратное: 10

9、Операционная программа:

9.1 Выше

- Извлечь иммунофильную колонну и пробить нижнюю часть шприца непосредственно в сродскую колонну

Квадратная пробка, завершающая соединение шприца с сродственной колонной, помещается на стойку управления воздухом для фиксации;

- после опорожнения жидкости в сродственной колонне взять верхний образец на этапе 8 и ввести его в шприц;

- выводит жидкость со скоростью 1 - 2 капли в секунду;

9.2 Стирка

- до высыхания жидкости;

- последовательное использование 10mLPBST буфера (см. 7.3), 10ml воды для промывки иммунных сродств, скорость потока 2 - 3 капли в секунду;

9.3 Смыть

- после высыхания жидкости снимайте шприц, продувайте родственную и жидкость в колонне, смывайте ее 1,5 мл метанолом, собирайте стиральную жидкость в 2 мл в пробирке, разбавляйте воду до шкалы, смешивайте;

- фильтрация с помощью микропористого фильтра 0,22 мкм и передача в бутылку с образцом для анализа HPLC.

* Предыдущая жидкость высушивается перед каждым действием.

10、Результаты интерпретации:

Содержание охратоксина А = обнаруженная концентрация х кратное разбавлению

11.Условия хранения и срок годностиА.

Условия хранения: 2–8°С.

Срок действия: Продукт действителен в течение 18 месяцев.