Правильное использование ультрафильтрующих центрифуг является ключом к успеху эксперимента.

О нас

Jiangsu Green Alliance Scientific Instrument Co., Ltd

Электронная почта
546326408@qq.com
Телефон
13365216078
Адрес
Высокотехнологичный предпринимательский инкубатор Гаоган, Тайчжоу, провинция Цзянсу

Дата:2025-12-01Читать:2

Сверхфильтрующая центрифуга - это лабораторный расходный материал, который объединяет технологию центрифугирования и мембранного разделения и широко используется в биохимических операциях, таких как обогащение белка, обессоливание, замена буфера, очистка нуклеиновых кислот и удаление мелких молекул. Его ядром является ультрафильтрующая мембрана, встроенная в конкретную молекулярную массу, которая управляет образцом через мембранное отверстие с помощью центробежной силы для достижения эффективного разделения целевой молекулы. Однако при неправильной эксплуатации может легко привести к закупорке мембраны, потере образца, низкой скорости восстановления или даже разрыву трубы. Освоение правильного метода его использования является ключом к обеспечению успеха эксперимента.

I. ПОДГОТОВКА К ИСПОЛЬЗОВАНИЮ

Точный отбор мембран по молекулярной массе: целевые макромолекулы должны быть в 2 - 3 раза больше MWCO, а мелкие молекулярные примеси - менее 1 / 2 MWCO, чтобы обеспечить эффективное удержание и прохождение;

Поверхность смачивающей мембраны (при необходимости): для гидрофобной мембраны (например, PVDF) сначала добавьте небольшое количество буфера или этанола, смачивающего в течение 5 минут, а затем центробежное удаление, чтобы избежать воздействия сопротивления газа на скорость потока;

Проверьте целостность корпуса трубы: убедитесь, что фильтрующая пленка не повреждена, уплотнительное кольцо крышки трубы исправно, чтобы избежать центробежной утечки.

II. Правила загрузки образцов

Контроль объема верхнего образца: обычно не более 75% максимальной емкости центрифуги (например, 15 - миллиметровая трубка плюс образец минус 11 миллилитров), зарезервированное пространство для обогащения;

Предварительная очистка: образцы, содержащие частицы или фрагменты клеток, должны быть сначала центрифугированы на низкой скорости (например, 3000 × g, 5 мин) или фильтрованы, чтобы предотвратить закупорку мембранных отверстий;

Избегайте высокой вязкости или высокой концентрации непосредственно над образцом: можно правильно разбавить и увеличить начальный поток.

III. Параметры центрифуги

Рекомендуемая производителем скорость вращения: обычно 3000 - 5000 × g, строго запрещено превышение скорости (см. максимальное значение RCF, отмеченное стенкой трубы);

Настройка подходящего времени: поэтапное центрифугирование (например, по 10 - 15 минут каждый), наблюдение объема концентрата, избегая сухой пленки;

Криогенные операции: для термочувствительных белков, использование замороженной центрифуги 4°C для предотвращения дегенерации.

IV. Методы обогащения и промывки

Замена буферной жидкости: при концентрации около 100 - 200 мкл добавляется новый буфер равного объема, смешивается, а затем центрифугируется, повторяется 2 - 3 раза, чтобы удалить > 95% мелких молекулярных примесей;

Избегать высыхания мембраны: в конце обогащения сохраняется не менее 50 мкл жидкости, а сухая мембрана необратимо снижает скорость извлечения.

Мягкое смешивание: медленно дуйте с помощью переносчика, чтобы не повредить макромолекулу сильным сотрясением.

V. Рекуперация и очистка (в случае многоразового использования)

Большинство ультрафильтрующих центрифуг имеют одноразовую конструкцию, но некоторые модели могут использоваться повторно;

Сразу после использования промыть деионизированной водой, а затем замочить 0,1 мNaOH или специальным очищающим раствором для удаления остатков;

Запрещается высоковольтная стерилизация или сушка, чтобы избежать деформации мембранной структуры.

Последняя статья:Вакуумный насос без масляной диафрагмы: принцип работы понятен с первого взгляда

Следующая статья:Стадия работы твердофазного экстрактора, быстрый старт