Модели органоидов становятся все более популярными в биологических исследованиях и скрининге из - за их способности воспроизводить сложность реальных тканей. Чтобы имитировать органы легких человека в организме, мы культивировали проточеловеческие эпителиальные клетки легких в условиях, которые способствуют формированию 3D - структур, воспроизводя морфологические и функциональные характеристики дыхательных путей легких. В культуре легочных органов эпителиальные стволовые клетки и клетки - предшественники культивируются в ЭКМ с добавлением ряда факторов роста. Затем органоиды вырастают в сложные структуры, сохраняя множественные кластеры эпителиальных клеток. Эти свойства делают органоидную культуру перспективным средством, которое может быть широко применено к основным и трансформирующим методам, таким как скрининг лекарств и моделирование заболеваний.
Здесь мы описываем метод визуализации с высоким содержанием, который контролирует и визуализирует рост и дифференциацию органов легких, реконструкцию 3D - структур, сложный анализ структур органов, морфологию и жизнеспособность клеток, а также экспрессию различных клеточных маркеров. 3D - имплантация органов легких в Matrigel Domes. Развивающиеся органоиды включают сферические объекты со сложными формами, включая структуру полости и мочевого пузыря. В течение 8 недель роста мы наблюдали увеличение размера и сложности. Мониторинг органоидов с помощью просвечивающего света, а затем сканирование 20 - 30 слоев Z - оси для визуализации окрашенных органоидов с помощью матричного геля с увеличением объектива 10 - 40x. Используйте ImageXpress ® Confocal HT.ai Интеллектуальный фокус
Новая конфигурация лазерного источника света для системы анализа изображений значительно повышает интенсивность освещения, что значительно повышает яркость, чувствительность обнаружения и скорость изображения.