Столбы жидкой хроматографии являются основными отделяющими компонентами высокоэффективного жидкостного хроматографа (HPLC), производительность которого напрямую влияет на точность и повторяемость результатов анализа. При возникновении пиковых аномалий, повышении давления колонны, снижении числа теоретических башен или потере фиксированной фазы необходимо своевременно заменить хроматографическую колонну. Ниже приведены стандартные процедуры замены и ключевые меры предосторожности:

I. ПРЕДВАРИТЕЛЬНАЯ ПОДГОТОВКА

защита безопасности

Наденьте защитные перчатки, очки и лабораторную одежду, чтобы избежать контакта с органическими растворителями и острыми частями.

Отключите питание прибора и высвободите системное давление, чтобы предотвратить разбрызгивание жидкости высокого давления.

Инструменты и материалы

Новая хроматографическая колонна (модель / размер соответствует оригинальной колонне), двухходовой разъем, гаечный ключ, уплотнительная прокладка (приоритет материала PEEK).

Запасные части трубопровода (при необходимости регулировки длины).

Ознакомьтесь с инструкциями по приборам и таблицами технических параметров хроматографических колонн.

Подтверждение состояния системы

Остановите текущую операционную процедуру и переключитесь на чистую проточную фазу (например, метанол / ацетонитрил), непрерывно промывайте с низкой скоростью потока (0,5 - 1 мл / мин) не менее 30 минут, чтобы очистить остаточные образцы в трубопроводе.

Отключите сигнальную линию детектора и отметьте положение интерфейса входящего и выходящего трубопровода.

II. Этапы демонтажа старой колонны

Модуль определения местоположения хроматографической колонны

Найдите кронштейн хроматографической колонны в термостате столба и посмотрите порядок соединения трубопровода (обычно: входной клапан → хроматографическая колонна → детектор).

Постепенное удаление старых столбов

Отпустите гайки на обоих концах гаечным ключом, сначала демонтируйте выходной конец (близко к стороне детектора) и медленно выпускайте остаточную жидкость в бутылку для отходов.

Подождите минутку, чтобы система сбросила давление, а затем удалите входной конец.

Запрещается принудительно тянуть трубопровод, чтобы предотвратить повреждение резьбы соединения.

Очистка интерфейса и оценка износа

Проверьте, блокирует ли или деформирует сито, и, при необходимости, очистите его ультразвуком.

Запишите серийный номер старой колонны, продолжительность использования и характеристики неисправности для последующего выбора ссылки.

III. Элементы для установки новой колонны

Контроль направления

Все хроматографические колонны имеют четкий указатель направления (стрелка указывает на выход), а обратная установка может привести к коллапсу наполнителя.

Часть инвертированной колонны может быть использована в конце головы, но положительная фаза / ионообменная колонна должна строго следовать направлению.

Установка без пузырьков

Использовать « метод подводной стыковки»: вход новой колонны погружается в стакан, оснащенный текучей фазой, и соединяется с трубопроводом на краю выхлопа.

Включите насос для заливки с очень низкой скоростью потока (0,2 мл / мин) до выхода без пузырьков.

Управление крутящим моментом

Использование специального гаечного ключа попеременно затягивает гайки по диагонали, умеренное усилие (с небольшим сопротивлением руки), чрезмерное затягивание может привести к сжатию цилиндрического станка.

Рекомендуется регулярно проверять состояние рыхления во время эксплуатации после установки.

Перезагрузка и баланс системы

Начальная промывка

Состоит из фазы начального течения (смешивается в равных пропорциях) и промывается с низкой скоростью потока в течение 60 минут, наблюдая устойчивость давления колонны.

Если давление столба необычно высокое, его можно приостановить и промыть на короткое время изопропиловым спиртом.

Градиентное равновесие

Выполните процедуру пустого градиента, контролируя базовый дрейф < ±0,5 мАУ.

Пробно - испытательная смесь проверяет степень разделения, сравнивает количество теоретических башен, соответствует ли стандарту (теоретическое значение N ≥ 80%).

Калибровка данных

Обновление информации о хроматографических столбцах в методических документах рабочих станций и восстановление контрольной таблицы времени хранения.

Ведение отчетов о сертификации новых колонн, включая карты испытаний на эффективность колонн и кривые давления.

Благодаря стандартизации можно максимально продлить срок службы хроматографической колонны, типичный срок службы антифазной колонны может достигать 500 - 1000 входов. Ежедневное обслуживание рекомендуется еженедельно проводить простую промывку, ежемесячное глубокое регенеративное обслуживание.