Как ключевое автоматизированное устройство для иммунологического тестирования (например, ELISA), точность результатов его работы напрямую влияет на надежность экспериментальных данных. Тем не менее, во время фактического использования, многие факторы могут мешать эффекту стирки пластины, вызывая такие проблемы, как повышение фонового шума, ослабление сигнала или ложноположительный / ложноотрицательный. Ниже анализируются основные влияющие факторы из четырех измерений производительности оборудования, эксплуатационных норм, реактивов и расходных материалов, условий окружающей среды:

Параметры самого устройства

Режим очистки и настройка программы

- Контроль количества остаточной жидкости: глубина падения головки пластины должна точно соответствовать положению основания отверстия реакции. Если зонд недостаточно контактирует с уровнем жидкости, это может привести к остаткам жидких отходов; Чрезмерное давление может царапать пакет антителами, вызывая физические повреждения.

- Количество промываний и время пребывания: однократная кратковременная промывка затрудняет удаление несвязанных компонентов, в то время как чрезмерное количество раз может повредить сформированный антиген - антитело комплекс. Некоторые устройства поддерживают градиентную промывку под давлением, чтобы сбалансировать эффективность очистки и стабильность образца.

- Интенсивность сотрясений: Для веществ с сильной адгезией (например, клеточный крекинг) требуется адсорбция с помощью высокочастотной вибрации, но сильные сотрясения могут вызвать перекрестное загрязнение.

Механическая точность и состояние обслуживания

- Долгосрочные стиральные машины подвержены таким проблемам, как смещение орбиты и нестабильное давление воздуха, что приводит к снижению однородности очистки отверстий. Важно регулярно откалибровать вертикальность головки стиральной пластины и проверять герметичность трубопровода.

- Перелив или плохой дренаж в резервуаре для отходов может привести к обратному сифонному отсасыванию, в результате чего очищающая жидкость возвращается в реакционную систему.

II. Степень стандартизации операций

1. Согласованность монтажных плат

- наклон микропористой пластины может привести к неравномерному направлению диагональной линии головки стиральной пластины, а боковые отверстия подвержены мертвым углам очистки. Рекомендуется использовать специальные стеллажи для фиксации и обеспечения последовательного положения при каждой загрузке.

- Выбор мембраны уплотнительной пластины с привязкой напрямую влияет на путь проникновения жидкости. Некачественный мембранный материал может лопнуть под высоким давлением, чтобы высвободить загрязняющие вещества.

2. Риск человеческой неправильной эксплуатации

- Забудьте заменить буферную бутылку или запутать кислотно - щелочной раствор, который напрямую изменяет pH - среду и влияет на активность антигенов / антител.

- Перегрузка (например, наложение многослойных пластин) выходит за пределы несущего диапазона оборудования, что приводит к аномальному распределению давления в головке стиральной пластины.

III. Адаптивность реагентов и расходных материалов

1. Свойства моющего буфера

- Концентрация поверхностно - активных веществ, содержащих Tween - 20, должна строго контролироваться ниже критической концентрации пучка, слишком высока, чтобы растворить белки в упаковке, и слишком низка, чтобы эффективно блокировать неспецифическую адсорбцию.

- Неправильная прочность ионов соли может привести к осаждению белка или потере эффекта защиты от заряда.

2. Совместимость материалов листового материала

- Гидрофобные пластины из полистирола лучше, чем полипропиленовые пластины, более подходят для твердофазных носителей; Однако некоторые модифицированные пластмассы могут деформироваться растворением в присутствии органического растворителя, изменяя размер отверстия.

- Низкая адсорбционная пластина, если она не закрыта, подвержена неспецифическому связыванию, увеличивая фоновое значение.

IV. Вмешательство экологических условий

1. Колебания температуры и влажности

- Высокотемпературные ускоряющие ферменты, способствующие проявлению цветовых реакций, сокращают период эффективного окна показаний; Высокая влажность окружающей среды способствует конденсации влаги внутри крышки пластины, разбавляя реакционную систему.

- Местная разность температур, вызванная прямым дувом кондиционера, приводит к выпадению капель конденсата, образуя локально высокие концентрации.

2. Загрязнение частицами

- Частицы пыли в воздухе могут переносить экзогенные белки, осаждаемые в незамкнутых реакционных отверстиях, имитируя положительные сигналы. Использование чистых рабочих столов может значительно уменьшить такие помехи.

V. Факторы биологической изменчивости

- Сложность матрицы выборки: сложные образцы, такие как сыворотка и спинномозговая жидкость, содержат более высокие концентрации гетеропротеинов, которые не могут быть полностью удалены с помощью обычных схем промывки. В этом случае необходимо добавить дополнительные блокирующие действия или продлить время стирки.

- Разница в сродстве антигенов / антител: захваченные молекулы со слабой связью легче стираются, что проявляется в необычно низких значениях OD.