< 855 >Метод рассеянной мутности света

1. введение

Метод мутности рассеянного света и метод удельной мутности пропускаемого света являются аналитическими методами, основанными на принципе явления рассеяния света. Рассеяние света - это физическое явление, когда луч изменяет направление распространения (называемое отклонением) из - за взаимодействия с достаточно мелкими частицами материи. Согласно электромагнитной теории Максвелла, предпосылкой для рассеяния является то, что скорость преломления взвешенных частиц должна отличаться от скорости преломления взвешенных жидкостей. Чем больше разница, тем сильнее рассеяние. Существует два типа рассеяния света:1Упругое рассеяние, при котором длина волны рассеянного и падающего света одинакова;2Неупругое рассеяние света, при котором длина волны рассеянного и падающего света различна. Только первое рассеяние света (эластичность) связано с методом рассеянной световой мутности и методом пропускания световой помутнения.

В методе отношения пропускания света к мутности измеряется интенсивность пропускаемого света и направление падающего света (т. е.0°) Измеряет затухание интенсивности падающего света, вызванное рассеянием, и сравнивает его с интенсивностью падающего света (измерение пустоты). Измеренные свойства являются косвенным измерением эффекта рассеяния взвешенных частиц, называемого мутностью. Любое поглощение света взвешенными образцами приводит к дополнительному ослаблению интенсивности света (см.<857> Ультрафиолетовая видимая спектроскопияиУльтрафиолетово-видимая спектроскопия - теория и практикаВ)). Поэтому важно убедиться, что измеренный материал не поглощает свет на измеренной длине волны. На самом деле уравнения, которые контролируют поглощение и мутность, одинаковы (хотя значения констант затухания различны). В методе мутности рассеянного света измерение и направление распространения падающего света90Интенсивность рассеянного света под углом °. Таким образом, измерение мутности методом рассеянной световой мутности является прямым измерением эффекта рассеяния суспензии.

2. Термины и определения

Общие термины, используемые для описания методов мутности и мутности, включают:

•Мутность (символ)С): мера снижения интенсивности пропускающего падающего луча из - за эффекта рассеяния света взвешенных частиц. Количество суспензии может быть измерено путем наблюдения за пропускающим светом (методом удельной мутности) или рассеивающим светом (методом мутности).

журнал I₀/ Я_тКб = Т

Я₀*Интенсивность падающего света

Я_т*Интенсивность пропускания света

к=коэффициент мутности моля

b=Длина пути пула образцов

с=концентрация

Т=Мутность

•Мутность (символ,τПри измерении мутности пропускающего света мутность определяется интенсивностью падающего луча данной суспензии./Измерение уменьшения длины единицы. Международная организация по стандартизации определяет мутность как « снижение прозрачности жидкости из - за наличия нерастворимых веществ."В".

•Единица измерения мутности: единица мутности выражается дескриптором, указывающим метод измерения.

•Единицы измерения мутности рассеянного света (НТУПри измерении мутности методом рассеянной световой мутности измеритель мутности соответствует направлению распространения падающего света.90°Угловое измерение рассеянного света, единица мутности называется единицей мутности методом мутности рассеянного света (НТУВ)).НТУРазмер определяется на основе мутности, возникающей при производстве первичного стандартного продукта формазида (суспензия, которая представляет собой смесь растворов сульфата гидразина и гексаметилтетрамина в воде). Более безопасные полимерные микрошариковые суспензии теперь доступны и * являются приемлемой альтернативой. Однако все эти критерии можно проследить до формазида. Стандартная мутность первичного раствора формазида составляет4000 НТУА.

Другие * единицы мутности включают единицу помутнения формазида (ФТУЕдиницы измерения мутности по методу Фольмазида (ФНУВ)). Эти единицы эквивалентны0-40 НТУВ пределах досягаемостиНТУА.

3. приложение

Применение метода коэффициента мутности и метода мутности рассеянного света включает1) Растворы и/ii) определение концентрации суспензии (определение нескольких катионов и анионов путем осаждения и суспензии при хорошо контролируемых параметрах реакции);2Измерение мутности мутного раствора или суспензии;3Определение молекулярной массы в1000Средний вес и размеры мультидисперсных систем от сотен миллионов до сотен миллионов;4Измерение реактивной динамики или иммуноседиментационной динамики иммунологического анализа (метод мутности пропорционального рассеяния);5Мониторинг роста клеток и бактерий;6) Определение распределения взвешенных частиц, подсчет частиц и т.д.

Метод мутности при пропорциональном рассеянии широко используется для анализа состава вакцин и/Или количественная оценка компонентов сыворотки. Он также используется для идентификации белков клеток - хозяев в рекомбинантных биофармацевтических препаратах. При использовании этой технологии, измеряя антигены,-Изменения в реакции рассеяния света на антисывороточные или антигенно - очищенные антитело - комплексы для расчета иммунных антител-Антигены реакции осаждения или конденсации (АгИли антитела (Аб) Количество. Как правило, рассматриваются антигенные ковалентные соединения или адсорбция на полимерных микроволнах для повышения эффективности рассеяния; Технология, созданная таким образом, называется“Иммунный анализ с повышенным содержанием частиц"Хотя эта технология известна как метод мутности рассеянного света, рассеянный и пропускающий свет обычно измеряются с помощью пропорциональных приборов.

Измерения мутности методом рассеянного света более надежны в диапазоне низкой мутности (относительно низкая концентрация рассеянной среды). В этом диапазоне наблюдалась концентрация проб и интенсивность сигнала детектора (НТУМежду представлениями существуют линейные отношения. По мере увеличения концентрации угол падения многократного рассеяния также увеличивается, отклоняясь от линейной реакции. Максимальная поддержка надежных линейных отношенийНТУЗначение1750—2000 НТУВ пределах досягаемости. Для более высокого диапазона мутности (концентрация рассеянной среды) применяется метод светового коэффициента мутности. Для получения последовательных результатов необходимо тщательно контролировать все измеренные переменные. Там, где это возможно, можно измерить очень разреженную суспензию.

4. прибор

Приборы, используемые для измерения коэффициента мутности пропускающего света и коэффициента мутности рассеянного света, называются соответственно прозрачным и рассеянным световым мутометром. Как правило, эти приборы включают амальгамную лампу с фильтром (для сильной зеленой или голубой линии), затвор, набор нейтральных фильтров с известной проницаемостью и чувствительный фотоумножитель, который может быть установлен в направлении распространения падающего света.0 °или90°Расположение угла, или на руке, может вращаться вокруг элемента раствора и устанавливаться на циферблате за пределами непроницаемой оболочки- 135°до0 °до+ 135 °Любой угол. Разнообразная форма бассейна раствора, например, для измерения90°Рассеянный квадрат;45°、90°и135°Рассеяние полуоктагон; Цилиндрик подходит для рассеяния под всеми углами (см. рисунок)1В)).

рисунок1.Репрезентативный мутометр. Внимание, детектор2Может быть установлен на подвижной руке.А.

Мутность также может быть измерена с помощью стандартного фотоэлектрического фильтра или спектрофотометра, предпочтительно в синей части спектра. Для измерения мутности рассеянного света требуется прибор с фотолампой для приема рассеянного, а не пропускающего света. Поскольку эта геометрия идентична геометрической структуре, используемой в люминесцентометре, ее можно использовать в качестве измерителя мутности путем правильного выбора фильтра. Коэффициент мутности совмещен.90°Метод рассеянной световой мутности и метод пропускания световой помутнения. Он содержит фотоэлектрические трубки, прием и измерение с образцами90°Угловое рассеяние света, а также прием и измерение переднего рассеяния света перед образцом. Он также измеряет свет, проходящий непосредственно через образец. через90°Измеренные значения света углового рассеяния, сумма измерений света переднего рассеяния и измерений света пропускания вычисляют соотношение между ними, чтобы получить линейность. Преимущество использования системы измерения коэффициента мутности заключается в том, что измерение рассеяния света становится незначительным. Кроме того, измерение мутности цветной суспензии проводится только с помощью светового коэффициента мутности или мутометра мутности (с пропорциональным режимом), поскольку программа компенсирует затухание света, вызванное цветом суспензии. Обычно источником света в этих приборах являются вольфрамовые лампы,2700 КЛампа работает при температуре, большая часть интенсивности света около550 нмМожно использовать и другие подходящие источники света. Обычно детектор являетсяАкремниевый диодАИ фотоумножитель. Другим способом устранения цветовых эффектов является использование инфракрасных светодиодов в качестве источника света с максимальным центром излучения около860 нмСпектральная полоса пропускания является60 нмА.Когда лазерные источники света также используются, особенно в приборах для измерения мутности, этот метод часто называют“лазерное измерение мутности"Преимущество использования лазерного детектора мутности света заключается в том, что при очень низких уровнях обнаружения отношение сигнала к шуму значительно увеличивается. Обычно источником света является рабочая длина волны.660 нмЛазерный диод. Высокая плотность мощности лазерного луча позволяет меньшим частицам производить более высокую интенсивность рассеяния. В сочетании со световыми ловушками, которые поглощают нераспределенный свет, система может значительно уменьшить рассеянный свет. Когда одна из программ в монографии указывает на использование дисперсионного фотомутометра или измерения проницаемости света, можно использовать инструменты, работающие в пропорциональном режиме.

5. норма мутности формазида

Фольмазид в настоящее время.Основные известные стандарты мутности. Все остальные критерии вторичны и должны быть прослежены до формазида.Основные критерии вКомпендиум химической терминологии IUPAC(ERR 1-май-2019）第 2 Версия (Золотая книга) определяется как стандарт, используемый пользователем для подготовки материалов с четко определенными методами и условиями из прослеживаемых материалов.

Взвешенная жидкость формазида имеет много характеристик, чтобы убедиться, что она подходит в качестве основного стандарта. Он может быть последовательно и точно изготовлен из исходного материала реактивного класса. Эта суспензия состоит из полимеров различной длины и случайной конфигурации, состоящих из полимеров формы и размеров от менее0,1 мкмБольше чем10 мкмНеравенство. Хотя было показано, что распределение длины полимерной цепи варьируется в зависимости от подготовки, общий результат мутности хорошо воспроизводится.

5.1 Подготовка стандартов формазинаПодготовка стандартной жидкости для формазида

•硫酸肼溶液А.А1000 г АКССульфат гидразина (Н₂H₄· H₂Так₄) растворяется в100 мл的АВ бутылке емкости класса и разбавляется до шкалы водой без частиц. Пусть раствор остаётся статичным.4 - 6ч 00 м.

•Стандартная жидкость для первичного формазида:А2,50 гАналитический гексаметилтетрамин[(CH)₂)₆Н₄]Растворить25,0 млВода без частиц, загружается100 млКолба. использоватьАКатегория25 млМиграционная трубка.25,0 млРаствор сульфата гидразина и полностью смешивается. Перед применением препарат должен быть25±1статическое положение при температуре °48ч 00 м. Полученная суспензия работает стабильно.2Месяц.

•стандартная суспензия запаса формазида1А.использовать15 мл АГидротрансмиттеры, которые будут15 млПередача первичной стандартной жидкости & quot; Фольмазид & quot;1 лВ емкой бутылке и разбавляется до шкалы и смешивается с водой без частиц. Уровень мутности суспензии составляет60 НТУА.

•стандартная суспензия запаса формазида2А.использовать50 мл АГидротрансмиттеры, которые будут50 млПередача первичной стандартной жидкости & quot; Фольмазид & quot;200 млВ емкой бутылке и разбавляется до шкалы и смешивается с водой без частиц. Уровень мутности суспензии составляет1000 НТУА.

•Справочная суспензия формазида:В соответствии с таблицей1В100 млВ емкой бутылке смесь частей формазида стандартная суспензия и вода без твердых частиц для подготовки эталонной суспензии формазида.