Система управления растворителями в жидкой хроматографической системе отвечает за обеспечение подходящей фазы потока, которая часто состоит из смеси различных растворителей, таких как метанол, ацетонитрил, вода и т. Д. Различные образцы и потребности в разделении требуют различных компонентов и фаз потока. Например, в антифазной жидкостной хроматографии текучая фаза влияет на последовательность стирки компонентов, и чем слабее способность стирания компонентов. Насос играет ключевую роль в системе управления растворителем, которая обеспечивает непрерывную и стабильную передачу фазы потока, обеспечивая плавный процесс хроматографии. Обычные насосы имеют бинарный насос и четырехкомпонентный насос, четырехкомпонентный насос может смешиваться с четырьмя растворителями, может более гибко регулировать состав фазы потока.
Система отбора проб отвечает за введение в хроматографическую колонну образцов, подлежащих анализу. Это требует точного контроля входной выборки для обеспечения точности и повторения результатов анализа. Современная жидкостная хроматографическая система обычно использует автоматический пробоотборник, который может быть точно отобран и введен в образец в соответствии с заданной процедурой для повышения эффективности анализа.
Ядром системы разделения является хроматографическая колонна, заполненная определенной фиксированной фазой. Разнообразие фиксированных фаз, таких как силикон, соединение равнозначно, различные типы фиксированных фаз подходят для анализа образцов разных свойств. Во время хроматографического процесса образцы постоянно распределяются между фиксированной и текучей фазами, и компоненты постепенно отделяются в зависимости от того, как работают две фазы.
Система обнаружения используется для мониторинга и определения компонентов после разделения. Обычными детекторами являются ультрафиолетовые детекторы, флуоресцентные детекторы и т.д. УФ - детекторы количественно анализируют компоненты путем измерения поглощения проб ультрафиолетовым излучением на определенной длине волны и широко используются; Флуоресцентные детекторы проверяются на основе флуоресцентных свойств образца с высокой чувствительностью.
Система обработки данных отвечает за сбор, обработку и анализ сигналов, выводимых детектором. Он может записывать время удержания хроматографического пика, высоту пика, площадь пика и другую информацию, сравнивая со стандартным продуктом или используя соответствующее программное обеспечение для расчета, чтобы определить содержание и чистоту компонентов в образце.
Методы определения жидкой хроматографической системы:
Проверка внешнего вида и целостности:
- Проверьте, являются ли компоненты полными, включая инфузионный насос, входной пробоотборник, хроматографическую колонну, детектор и т. д., внешний вид не поврежден, деформация, коррозия и т.д.
- Проверьте исправность каждого соединительного трубопровода, отсутствие повреждений, старения, утечек и других проблем, чтобы убедиться, что трубопровод тесно связан.
2. Функциональные проверки:
- Инфузионный насос: Включите инфузионный насос и проверьте, работает ли он нормально, нет ли аномального шума или вибрации. Проверьте давление насоса, чтобы показать, нормально ли оно работает и может ли оно стабильно работать в заданном диапазоне давления. В то же время проверьте функцию регулирования скорости потока насоса, чтобы увидеть, можно ли точно установить и стабилизировать выход различных скоростей потока.
- Входные устройства: для ручных пробоотборников проверьте, бесперебойна ли их работа, заблокирована или повреждена ли входная игла, и соответствует ли точность ввода требованиям. Для автоматического пробоотборника, помимо проверки состояния входной иглы, необходимо проверить, являются ли нормальными такие функции, как порядок подачи, точность входной величины и повторяемость.
- Детекторы: различные типы детекторов имеют разные методы проверки. Если ультрафиолетовый детектор, проверьте, нормально ли его источник света светится, точно ли регулируется длина волны; Флуоресцентный детектор проверяет точность установки длины волны возбуждения и длины волны излучения, нормальную чувствительность и т.д. В то же время проверьте, является ли базовая линия детектора стабильной, нет ли аномального шума или дрейфа.
- Колонна хроматографии: Проверьте, не поврежден ли внешний вид хроматографической колонны и исправны ли соединения колонны. Проверьте четкость маркировки хроматографической колонны, включая длину колонны, внутренний диаметр, тип наполнителя и другую информацию.
3. Испытания на системную адаптивность:
- Теоретическое определение числа тарелок: выберите подходящие стандартные вещества, такие как нафталин и т. Д. Для получения раствора определенной концентрации, входящего в анализ проб в определенных хроматографических условиях. В зависимости от времени удержания и полувысокой ширины хроматографического пика вычисляется число теоретических башен для оценки эффективности разделения хроматографических столбов.
- Определение степени разделения: анализ разделения проводится в выбранных хроматографических условиях с использованием смешанного стандартного раствора, содержащего несколько компонентов. Измеряя время удержания двух соседних компонентов, ширину пика и другие параметры, рассчитайте степень разделения и проверьте, соответствует ли система требованиям разделения различных компонентов.
- Повторное испытание: многократное последовательное введение стандартного раствора с одинаковой концентрацией, наблюдение за согласованностью времени удержания, площади пика или высоких параметров пика для каждой входной пробы для оценки повторяемости системы.