Тест на цитотоксичность in vitro

телоЭкзоклеточная токсичностьотИсследовательский институт Хатано (ПЧР)Исследования и производство，Широко используется в экспериментах по экстракорпоральной клеточной токсичности, может удовлетворить китайскую фармакопею-Методы цитотоксики,ИСО 10993иYBB 00012003Параметические требования к цитотоксичности.

Тест на цитотоксичность in vitroДля выщелачивания используются обычные питательные среды. Метод выщелачивания выглядит следующим образом: стерильная операция, взятие1 гТест на цитотоксичность in vitroПоместить в15 млВ стерильной центрифуге, согласно3мл/гКоэффициент выщелачивания добавляется в среду выщелачивания, колебания размещаются горизонтально,120 об/мин，37Выщелачивание при температуре °С24 часа. После выщелачивания перемешивание вверх и вниз10Подпункт Отбор экстракта для испытания. Среды, используемые для выщелачивания, являются пустыми контрастами. Обратите внимание на наличие питательных сред в4Хранение при температуре не более двух недель. Экзоклеточная токсичностьМТТМетод тестирования: взять в хорошем состоянииL929Клетки, переваривающие центрифуги, приготовленные в клеточную суспензию, вакцинированные96Панель для культивирования отверстий. Каждая группа имеет несколько отверстий, каждое отверстие вакцинируется100µLКлеточная суспензия,37℃、5%Углекислый газСО2Культивирование в инкубаторах24 часа. Выбросить исходные питательные среды, добавить100µLВыщелачивание, пустой контрольный раствор, вСО2Культурный ящик продолжает культивировать.24 часаЗатем под микроскопом наблюдаются клеточные формы. Выбросьте жидкость из отверстия и добавьте в каждое отверстие50 мкл 1 мг/млСтерильностьМТТРаствор (МТТиспользоватьМЭМконфигурация питательной среды, текущее распределение, не доступно для приготовления питательной среды), продолжение культивирования2 часаПосле удаления жидкости из отверстия, добавьте100µLИзопропиловый спирт, колебания смешиваются,570 нми650 нмНа длине волны измеряется поглощение света, рассчитывается выживаемость клеток.

Тесты на клеточную токсичность - это методы экстракорпоральной клеточной культуры для оценки потенциальной клеточной токсичности биологических материалов и медицинских устройств или экстрактов, один из важных показателей в системе биологической оценки биологических материалов, а также проекты, которые должны быть проверены медицинскими устройствами и биологическими материалами практически для всех видов применения. Тесты на клеточную токсичность позволяют в краткосрочной перспективе проверить влияние биоматериала на метаболическую функцию клеток и быстро проверить, является ли материал потенциально токсичным для клеток.

В качестве средства обнаружения токсичности биологических материалов цитотоксические испытания имеют преимущества простоты, высокой чувствительности, низкой стоимости и короткого испытательного цикла и широко используются для обнаружения и оценки биосовместимости биологических материалов и продуктов медицинского оборудования. Методы оценки клеточной токсичности биоматериала варьируются от наблюдения за морфологическими и количественными изменениями клеток до оценки клеточной адгезии, размножения, метаболизма и т. Д. В качестве методов оценки биологической совместимости биоматериалов используются динамичные количества клеток и способность клеток размножаться. Конкретные эксперименты включают в себя нейтральное испытание на поглощение красного цвета, клонирование для формирования,МТТКлеточная токсичность иXTTМетоды цитотоксических испытаний, в которыхМТТиXTTМетоды испытаний на цитотоксичность более приемлемы и широко применяются, поскольку они позволяют количественно определять клеточную токсичность материала.

МТТиXTTТест на цитотоксичность основан на дегидрогеназе янтарной кислоты в митохондриях живых клетокМТТСине - фиолетовый кристалл(Формазан)И оседает в клетках, мертвые клетки не имеют этой функции. Диметилсульфоны(ДМСО)Или изопропиловый спирт или метилфеназин.(ПМС)Может растворять кристаллы метилена в клетках, используя ферментометр570 нмНа длине волны измеряется его оптическое поглощение, и в пределах определенного количества клеток количество кристаллизации прямо пропорционально количеству клеток. По измеренным значениям поглощения(ОД)значение)чтобы определить количество живых клеток,ОДЧем больше значение, тем сильнее активность клеток, тем меньше токсичность. Вычисляя скорость размножения клеток, можно количественно оценить клеточную токсичность медицинских материалов и их продуктов. Также можно рассчитать выживаемость клеток при различных концентрациях раствора.МК50(Блокирование активности клеток50Концентрация%)Оценка клеточной токсичности биологических материалов и их продуктов.

Тест на цитотоксичность in vitroОбладает хорошей воспроизводимостью партий, стабильной производительностью, богатыми спецификациями и размерами характеристик, может использоваться в качестве биологической оценки медицинского оборудования-Идеальный материал для определения цитотоксичности.