- Электронная почта
- Телефон
-
Адрес
Новый район Пудун, Шанхай Ziping Road 908
Хэ Юань Ли Цзи (Шанхай) биотехнологическая компания с ограниченной ответственностью
Новый район Пудун, Шанхай Ziping Road 908
описание продукта
2 x Taq ПЦР плюс смесь даПЦРРеакционная предварительная смесь, которая содержитДНК-полимераза TaqАdNTPРеакционный буфер,загрузка красительРавные ингредиенты, при использовании просто взять соответствующее количество этого продукта, добавить шаблоны и экстракты и добавитьddH2OДополнить объем, чтобы концентрация реакционной системы была 1× Можно делатьПЦРРеакция.ПЦРПродукты3 'Выделение торцевой полосыAЩелочное основание, после очистки может быть использовано непосредственноТ/АКлонирование.
Продукт использует комплексную энзимную систему.ДНК ТакПолимеразы и3 '5 'Синергия с активными белками экзогенных ферментов может быть достигнута в оптимизированной реакционной буферной системе для достижения высокого увеличения урожайности, может быть увеличена7 кб的ДНКФрагменты, и совместимы30%-70% GCСодержание шаблонов. По сравнению с традициейТакФерменты (WT-Так), скорость его удлинения повышается2 - 4В два раза значительно сокращается цикл реакции.
Этот продукт содержит два красителя,ПЦРПосле завершения реакции не нужно добавлятьбуфер загрузкиЭлектрофорез можно проводить непосредственно, а во время электрофореза появляются две полосы индикаторов - синяя и красная. Этот краситель не влияетПЦРПовышение эффективности, но при необходимостиПЦРПродукты экспериментируют с оптическим анализом, таким как абсорбция, флуоресценция и т. Д., Рекомендуется перед анализомПЦРПродукты очищаются или используются без красителейПЦРПредварительная смесь.
Информация о заказе
название продукта |
артикул |
спецификация |
2 x Taq ПЦР плюс смесь |
АН11Л828 |
2*1 мл |
2 x Taq ПЦР плюс смесь |
АН11Л829 |
5*1 мл |
Транспорт и хранение
Транспорт голубого льда.-20Сохранение при температуре °С, срок действия24Месяц.
способ применения
1. обычныйПЦРРеакционная система (операции на льду)
компонент |
20 μLСистема |
50 μLСистема |
Конечная концентрация |
2 x Taq ПЦР плюс смесь |
10 μL |
25 μL |
1 х |
正向引物(10 μM)(1) |
0,4 - 0,8μL |
1 - 2μL |
0,2 - 0,4μM |
Обратный (10 μM)(1) |
0,4 - 0,8μL |
1 - 2μL |
0,2 - 0,4μM |
ДНКшаблон(2) |
XμL |
XμL |
- |
ddH2O |
До 20μL |
До 50μL |
- |
(1) Рекомендуемая конечная концентрация экстракта0,2 ~ 0,4μMПри плохом эффекте можно0.1 ~ 1μMКорректировка в пределах концентрации;
(2) Различные шаблоны * Концентрация положительной реакции различна, чтобы 50 μLПример системы: шаблон для геномаДНКПри этом обычно рекомендуемое количество составляет10~200 ngКогда шаблоны являются плазмидами или вирусамиДНКПри этом обычно рекомендуемое количество составляет10 пг ~ 5 нг. Слишком большое количество шаблонов может легко привести к неспецифическому расширению.
2. Трехступенчатый методПЦРРеакция
шаг |
температура |
время |
Преддегенерация(3) |
95℃ |
3~5 минут |
Дегенерация |
95℃ |
30 секунд |
Отжиг(4) |
55 ~ 65℃ |
30 секунд |
Расширение(5) |
72℃ |
15~30 сек/кб |
30~35 циклов |
||
Конечное расширение |
72℃ |
5 минут |
3. Двухэтапный подходПЦРРеакция
шаг |
температура |
время |
Преддегенерация(3) |
95℃ |
3~5 минут |
Дегенерация |
95℃ |
30 секунд |
Отжиг и удлинение(4) |
60 - 65℃ |
30 сек/кб |
30~35 циклов |
||
Конечное расширение |
72℃ |
5 минут |
(3) Это условие преденатурации подходит для подавляющего большинства амплификационных реакций, для некоторых сложных шаблонов, таких как: бактериальная жидкость, колония (особенно дрожжи)ПЦРРасширение, время преденатурации может быть соответствующим образом увеличено до10 минутДля повышения эффекта преденатурации;
(4) Температура отжига, пожалуйста, по ссылке.ТМПараметры значений. При необходимости рекомендуется найти подходящую температуру для соединения экстракта с шаблоном, установив температурный градиент. Кроме того, температура отжига напрямую определяет расширенную специфичность, если обнаруживается плохая специфичность усиления, может соответствующим образом повысить температуру отжига.
(5) О скорости удлинения, когда длина фрагмента цели не превышает3 кбКогда рекомендуется использовать15 сек/ кбКогда длина фрагмента цели больше3 кбКогда рекомендуется использовать30 сек/кб. Скорость удлинения связана со сложностью шаблона, и время удлинения может быть соответствующим образом увеличено в случае более низкой производительности.
Меры предосторожности
1. Этот продукт используется в научных экспериментальных исследованиях, не может использоваться в клинической диагностике, лечении и других областях.
2. В этом продукте2 x Taq ПЦР плюс смесьНеобходимо расплавить * после использования, чтобы предотвратить неравномерную концентрацию ионов.
3. Рекомендуется собрать все реакционные компоненты на льду и, наконец, добавить2 x Taq ПЦР плюс смесьА.
4. Использование шаблонов генома для расширения более длинных сегментов требует высококачественной очисткиДНКШаблоны, которые можно улучшитьПЦРПоказатель успеха.
5. Продукты расширения данного продукта могут быть использованыТ/АКлонирование. Поскольку данный продукт содержитЗагрузка красителяА,ПЦРПродукты должны быть полностью удалены после удаления клеем.Загрузка красителяА.
6. Рекомендуется использовать метод пузырькового крашения для электрофореза после крашения, клеевое крашение может привести к рассеянию красной полосы индикатора, не способствует индикации полосы, синий индикатор ленты не влияет. Синяя полоса в1% ТАЭСкорость миграции в буфере примерно равна1500 bpКрасная полоса в1% ТАЭСкорость миграции в буфере примерно равна100 bpА.
Рекомендуется соответствующая продукция
ЭЗ - ПКРРаствор для прямого расширительного хвостового крекинга (грузовой номер:АН11Л227)
2 x qPCR смесь(SYBR Зеленый(Номер груза:АН19Л918)