Набор для обнаружения вируса герпеса у кошек

Набор для обнаружения вируса герпеса у кошекТехнические характеристики упаковки: 25Т / коробка & 50Т / коробка

[Принцип проверки]

Набор для обнаружения вируса герпеса у кошекЭтот набор предназначен для специфических экстрактов и молекулярных радиомаяков для этого гена, и реакция PCR может быть выполнена и высвобождена флуоресцентным сигналом, если ДНК содержится в образце, подлежащем проверке. Использование приборов для мониторинга и вывода соответствующих флуоресцентных сигналов в процессе PCR в режиме реального времени для достижения качественного анализа результатов испытаний.

[Основные составляющие]

« Условия хранения и срок годности» Защита от света до 20°C, избежание повторного замораживания и оттаивания, срок действия 12 месяцев.

Серия ABI, серия Bio - Rad, серия Agilent Stratagene MX, серия Roche LightCycler R480, Cepheid SmartCycler, серия Rotor - Gene, серия Hangzhou Borge и другие многоканальные флуоресцентные количественные ПКР в реальном времени.

[Требования к выборке]

1. При проведении испытаний с использованием оригинального образца. Образцы (спинномозговая жидкость пациента, венозная кровь, суставная жидкость; венозная кровь больного животного, молоко; колония, грибок и т.д.

2. При необходимости проведения теста PCR после бактериальной инкубации исходный образец должен быть подвергнут бактериальной инкубации с использованием селективного инкубатора.

3. Если образец не может быть обнаружен сразу после сбора, он может быть помещен в холодильное хранилище с температурой от 2 до 8 ° C для хранения на ночь; При длительном хранении образец должен быть заморожен при температуре от - 20°С до - 80°С.

[Метод проверки]

1. Готовность реагента (зона готовности реагента)

(1) Извлечь из холодильника набор реагентов, извлечь из него реагент, необходимый для эксперимента, полностью расплавить, перемешать и мгновенно центрифугировать, чтобы удалить жидкость, прикрепленную к стенке трубы.

(2) Учет количества реакций (n), необходимых для данного эксперимента, и расчет количества реагентов, необходимых для этого эксперимента, на основе системы реакций, показанной в таблице ниже.

n = отрицательное контрольное число (1Т) + положительное контрольное число (1Т) + резервирование ошибок (1Т) + число выборки

(3) Добавление вышеуказанного реагента в стерильную центрифужную трубку, полное смешивание и мгновенная центрифуга. Реакционная трубка PCR заполняется реагентом в количестве 20 мкл / труб.

(4) После плотной крышки трубки PCR трубка PCR переносится в зону обработки проб. Оставшийся реактив помещается обратно в холодильник ниже - 20°C для замораживания и хранения.

2. Подготовка проб (область обработки проб)

Для извлечения нуклеиновой кислоты можно использовать набор DNA / RNA для извлечения, конкретная операция в соответствии с инструкцией по набору.

3. Добавить образец

Добавьте обработанные образцы ДНК в 5 мкл, конечный объем 25 мкл / трубку в вышеупомянутую подготовленную пробную трубку реакции PCR, прикройте крышку реакции PCR, чтобы перемешать мгновенную низкоскоростную центрифугу и перейти на прибор PCR. Отрицательный контроль и положительная пара ухода добавляют каждый из 5 мкл комплекта с отрицательным контролем или положительным контрольным материалом, конечный объем 25 мкл / трубка, крышка реакции PCR после смешивания мгновенно низкоскоростной центрифуги, перенесенной на прибор PCR.

4.PCR (зона усиления PCR)

(1) Возьмите трубку реакции PCR, подготовленную в зоне обработки проб, и поместите ее в соответствующее место в пробоотборнике флуоресцентного количественного PCR в реальном времени и запишите порядок размещения.

(2) Нажмите следующую таблицу, чтобы установить параметры, связанные с амплификацией нуклеиновой кислоты прибора для амплификации PCR.

Примечание: флуоресцентные PCR - приборы серии ABI не выбирают ROX - коррекцию при настройке, а блоки закалки выбирают None.

[Ссылка (Сфера охвата)]

1. Определение эффективности комплекта:

(1) Положительный контраст: существует типичная S - образная кривая усиления или значение Ct ≥ 35.

(2) Отрицательный контраст: значение Ct > 38 или без значения Ct, линия имеет прямую или легкую косую линию без периода экспоненциального роста.

2. Результаты образцов определяют:

(1) Положительный: значение Ct для результатов теста образца составляет 35 или имеет период явного экспоненциального роста.

(2) Сомнительно: значение Ct в результатах теста образца находится в диапазоне 35 - 38. На этом этапе образец должен быть повторно протестирован, если значение Ct результатов повторных экспериментов все еще находится в диапазоне 35 - 38, имеет очевидный период экспоненциального роста, он будет признан положительным, иначе отрицательный.

(3) Отрицательный: Ct значение > 38 или отсутствие Ct значения результатов теста образца.

[Толкование результатов испытаний]

Ограничения метода проверки

Ложные отрицательные результаты могут быть получены, когда концентрация нуклеиновой кислоты в тестируемом образце ниже, чем в настоящем наборе.

2. Неправильное использование проб в процессе сбора, транспортировки, хранения и обработки может привести к деградации ДНК и получению ложноотрицательных результатов.

3. При перекрестном загрязнении проб в процессе сбора, транспортировки, хранения и обработки ложноположительные результаты легко получить.

[Показатель производительности продукта] Предел обнаружения продукта составляет 103 Copies / mL, значение CV продукта составляет 3%.

[Внимание]

1. Лаборатория, использующая настоящий комплект, должна управляться в строгом соответствии с инструкциями по управлению лабораториями для тестирования на генетическую амплификацию, изданными соответствующими частями государства;

Чтобы избежать разложения РНК, процесс обработки образцов должен работать в условиях 0 - 4°C и быть обнаружен на борту сразу же после завершения эксперимента; Расходные материалы, используемые в процессе обработки образцов, должны быть обработаны без нуклеазы;

3. Товары в каждом регионе являются специальными и не подлежат перекрестному использованию во избежание загрязнения; Сразу же после завершения испытаний рабочий стол должен быть очищен;

При всасывании реакционной жидкости следует стараться избегать образования пузырьков; Перед тем, как подняться на прибор PCR, следует проверить, плотно ли перекрыты реакционные трубы, чтобы жидкое испарение не привело к неточным результатам;

5. Все реагенты в комплекте должны быть полностью расплавлены и смешаны при комнатной температуре до их использования и должны мгновенно центрифужаться;

6. Все отрицательные и положительные контрасты, установленные в комплекте, до первого применения должны быть переданы в зону подготовки образца и храниться отдельно;

Для предотвращения флуоресцентных помех следует избегать прямого контакта голыми руками с трубкой реакции PCR и избегать любой маркировки на трубке реакции PCR;

8. всасывающие головки, использовавшиеся в процессе тестирования, должны быть нанесены непосредственно в резервуар для отходов, содержащий 10% хлорной кислоты, и трубка для реакции PCR в конце теста должна быть открыта без крышки и стерилизована вместе с другими отходами после удаления; Рабочие столы и различные лабораторные материалы должны регулярно дезинфицироваться 10% хлорной кислотой, 75% спиртом или ультрафиолетовыми лампами;

Параметры, связанные с расширением прибора, должны быть установлены в соответствии с соответствующими требованиями настоящей инструкции; Различные партии реагентов нельзя смешивать; Использовать в течение срока действия. Продукция предназначена только для научных исследований.