Калибровка флуоресцентных микроволновых приборов CytoFLEX

Поточная цитология является важной технологией клеточного анализа, которая может быть использована для подсчета клеток, клеточного профилирования и секвенирования клеток. Прежде чем приступать к проточной клеточной хирургии, важно провести контроль качества, чтобы обеспечить точность и надежность эксперимента. В этой статье подробно описаны методы контроля качества проточной клеточной хирургии.

1. Калибровка жидкостной системы

Жидкостные системы включают расходомеры и датчики давления. Во - первых, калибровка расходомеров и датчиков давления путем измерения фактической скорости потока и давления. Введите стандартную жидкость в расходомер для измерения скорости потока и калибровки. Стандартное давление вводится в датчик давления и измеряется выходное значение, а затем калибруется.

2. Калибровка лазерных систем

Калибровочная лазерная система предназначена для определения местоположения лазерного луча, чтобы получить правильные оптические показания в контейнере с образцом. Калибровочный шарик прикрепляется к проточной трубке проточного цитометра, калибровка шарика и определение положения лазерного луча с помощью лазерного облучения.

3. Калибровка оптических систем

Калибровка оптических систем является ключом к обеспечению точности временных показаний при анализе образцов. Калибровка оптических систем включая детекторы и синхронизаторы. Детектор отвечает за измерение количества и размера иммунохромосомных частиц в образце. Синхронизатор отвечает за то, чтобы детектор измерял образцы с правильной частотой.

4. Стандартная калибровка частиц

Последним этапом калибровки проточного цитометра является стандартизация образцов с использованием стандартного калибровочного прибора. Для испытания стандартных частиц в различных концентрациях используются просторные пробоотборные трубы. После калибровки стандартной кривой проточный цитометр может точно рассчитать количество и характеристики определенных иммунохромосомных частиц в образце.

калибровка проточного цитометра

Очистить комнату для образцов проточного цитометра и проверить, работают ли лазеры и оптические системы.

2. Проверка точности параметров рассеяния, флуоресценции и времени цитометра с использованием стандартного вещества частиц.

Очистка и калибровка жидкостных систем проточных цитометров для обеспечения точного контроля скорости потока и количества образцов.

Контроль качества проточных цитометров

a. Регулярно проверять параметры производительности проточного цитометра, включая чувствительность к рассеянию, чувствительность к флуоресцентным испытаниям и временную разрешающую способность.

b. использование калиброванных частиц для проверки точности и последовательности скорости потока;

c. Корректировка разрешения и прочности с использованием подходящих частиц для контроля качества в соответствии с экспериментальными потребностями

Подготовка образцов

1. Равномерно взвешенные образцы клеток, чтобы избежать воссоединения клеток и отложений. Это может быть достигнуто с помощью центробежных и повторно взвешенных образцов.

Используйте качественные методы клеточного окрашивания для обеспечения точности и последовательности окрашивания.

Корректируйте концентрацию образца, чтобы избежать чрезмерной фокусировки и слишком разреженных клеток для потери сигнала.

Контроль качества чистоты выборки

a. Оценка чистоты окрашивания с использованием соответствующих отрицательных и положительных контрастных изображений. Например, использование незакрашенных клеток в качестве отрицательного контраста, использование клеток с известными положительными маркерами в качестве положительного контраста

Регулярно проверяйте последовательность результатов окрашивания, чтобы убедиться, что отрицательные контрольные клетки не имеют положительных маркеров, а положительные контрольные клетки имеют ожидаемые положительные маркеры

Калибровка флуоресцентных микроволновых приборов CytoFLEXВведение на китайском языке

Ежедневные флуоресцентные микроволны QC типа CytoFLEX представляют собой суспензию 3 - мкм флуоресцентных микроволн и могут использоваться для оптического выравнивания проточных клеточных систем и ежедневной проверки жидкостных потоков. Продукт поставляется в предварительно разжиженном виде, а длина волны флуоресцентного излучения составляет от 355 нм до 800 нм при возбуждении на следующих длинах волн: 355 нм, 375 нм, 405 нм, 488 нм, 561 нм и 638 нм. Смесь взвешивается в водной среде, содержащей поверхностно - активные вещества и стабилизаторы. C65719 заменил CytoFLEX QC флуоресцентный шар B53230 для повседневной работы на платформе CytoFLEX.

Калибровка флуоресцентных микроволновых приборов CytoFLEXПрезентация на английском языке

CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres представляет собой суспензию из 3 мкм флуоресцентных микросфер, которая может использоваться для ежедневной проверки оптического выравнивания цитометра потока и системы флуидики. Этот продукт предоставляется в предварительно разбавленном, готовом к использованию формате с флуоресцентной эмиссией между 355 нм и 800 нм при возбуждении на: 355 нм, 375 нм, 405 нм, 488 нм, 561 нм и 638 нм. Смесь суспендируется в водной среде, содержащей поверхностно-активные вещества и стабилизаторы. Нажмите здесь для CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres Инструкции по использованию. Этот продукт заменяет CytoFLEX Daily QC Fluorospheres, B53230, и должен использоваться с платформой цитометра CytoFLEX.

Калибровка флуоресцентных микроволновых приборов CytoFLEXОперационный процесс

1Используйте набор фильтров, рекомендованный изготовителем для обнаружения соответствующих флуоресцентных параметров (см. IFU платформы CytoFLEX).

2. Убедитесь, что файл целевого значения для конкретной партии CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres был загружен в программное обеспечение цитометра потока. Инструкции по импорту файла целевого значения для конкретной партии см. в IFU платформы CytoFLEX.

3. Энергично смешивайте флакон CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres с помощью вихревого смешителя в течение 2-3 секунд.

4Добавить:

4. 10 капель флуоросфер в трубку, если использовать полуавтоматический (трубка) режим введения образца.

b. 3-4 капли флуоросферы в колодце для стандартной 96-колодцевой пластины или глубокой пластины для режима инъекционного загрузки пластины.

5Запустите протокол контроля качества (QC) в соответствии с инструкциями в вашей платформе CytoFLEX (IFU).

Калибровка флуоресцентных микроволновых приборов CytoFLEXМеры предосторожности

1. Продукт представляет собой изделие в режиме реального использования, без дополнительной подготовки, для непосредственного использования.

2.Если раздельная упаковка, хорошо запечатанная, в течение 5 дней исчерпаны.

3.Флуоресцентные микросферы долго статичны, они естественным образом оседают. Обеспечить, чтобы флуоресцентные шары были полностью взвешены и размыты перед использованием.

Не используйте флуоресцентные шары, срок действия которых превышает срок действия на этикетке бутылки образца.

5.Продукция не замораживается в холодильном состоянии.

6.При работе с этим реагентом используйте хорошую лабораторную спецификацию (GLP).

7. Настоящий реагент содержит консервант, если происходит контакт кожи или глаз, промыть его водой своевременно и глубоко.

Целью отчета о калибровке проточного цитометра является регистрация подробной информации о всех процессах калибровки проточного цитометра. Доклад должен включать следующую информацию:

1. Дата и время

2. Данные калибровки жидкостной системы

3. Калибровочные данные лазерной системы

4. Данные калибровки оптических систем

5. Стандартные данные калибровки частиц

6. Данные калибровки шариков

Любые проблемы или аномалии, обнаруженные в ходе калибровки

8. Имя и подпись технического сотрудника, осуществляющего калибровку