- Электронная почта
- Телефон
-
Адрес
Шанхайский район Сунцзян, шоссе Синьцзи, 518, зона развития Цаохэцзин, Сунцзянский высокотехнологичный парк, здание 2
Шанхайская научно - исследовательская биотехнологическая компания с ограниченной ответственностью
Шанхайский район Сунцзян, шоссе Синьцзи, 518, зона развития Цаохэцзин, Сунцзянский высокотехнологичный парк, здание 2
HBL - клетки меланомы человека
Название продукта:HBL - клетки меланомы человека
Торговая марка: Шанхайская научно - исследовательская биология
Срок поставки: спот
Количество клеток: 1x10 ^ 6 cells
Активность клеток 95% (Viability by Trypan Blue Exclusion)
Клеточная передача: 1: 4 ~ 1: 6 передача; Смена жидкости 2 - 3 раза в неделю
Условия роста: газовая фаза: воздух, 95%; углекислыйгаз, 5%; Температура: 37°C
Тестирование клеток: клетки не содержат ВИЧ - 1, HBV, HCV, микоплазмов, бактерий, дрожжей и грибков
Условия культивирования: DMEM (с высоким содержанием сахара) + 10% FBS + 1% P / S; 37°C, 5% CO2
Метод передачи: рекомендуется 1: 2 - 13: 3 Смена жидкости один раз в два дня
Условия замораживания: замораживание клеток без сыворотки крови
Условия замораживания: 90% FBS + 10% DMSO
Замораживание клеток: замораживание жидкого азота
Клеточная культура
Перевозка сухого льда: сразу после получения клетки необходимо перейти на хранение жидким азотом, или краткосрочное замораживание в холодильнике при температуре 80°C, или прямое восстановление.
Перевозка при комнатной температуре: сразу же после получения клетки, пожалуйста, удалите бутылку с культурой клетки из коробки и следуйте следующим действиям для передачи культуры
Клеточная передача: плотность клеток до 80 - 90%, можно проводить культуру передачи
Процедуры работы клеток в бутылке
Для клеток, культивируемых стенками, перед отправкой мы заполняем питательную среду всей бутылкой, чтобы уменьшить выпадение клеток, прикрепленных к стенке, во время транспортировки продукта.
1. После получения клетки обратите внимание на наблюдение, есть ли загрязнение. Поместите питательную бутылку под перевернутый микроскоп, чтобы тщательно проверить, является ли она мутной или бактериальной. Поскольку во время транспортировки есть удары, и некоторые клетки также чувствительны к изменениям температуры, могут быть некоторые клетки, которые падают и плавают, эти клетки все еще живые клетки, не выбрасывайте, могут быть центробежным обогащением для последующего использования.
Для клеток, прикрепленных к стенке, в среде шкафа биобезопасности вакуумным насосом удаляется избыток питательной среды в питательной бутылке до остаточного 5 - 8 мл, а затем в соответствии с питательной средой выбирается подходящее содержание CO2 в инкубаторе с постоянной температурой 37°C для культивирования, отвинчивается крышка бутылки. Если клетки уже покрыты бутылками, передайте их немедленно.
Для взвешенных клеток, в среде шкафа биобезопасности, переносить клетки из бутылки с культурой в центрифужную трубку, 150 г центрифуги в течение 5 минут, после удаления, продувать клетки 5 мл питательной среды, переносить в новую бутылку с культурой, а затем помещать в термостат с соответствующим содержанием CO2 37°C для культивирования.
Процедуры замораживания клеток
Примечание: Чтобы обеспечить высокую живучесть клеток, размораживайте культуры сразу после получения продукта.
1. Поместите охлаждающую трубку в водяную ванну с температурой 37°C, чтобы качаться взад и вперед и быстро оттаивать. Чтобы избежать загрязнения, убедитесь, что отверстие для замерзания находится над поверхностью воды. Оттепель требуется быстро, около 1 минуты.
2.Как только жидкость в трубке замораживания расплавляется, немедленно извлекается, поверхность трубки замораживания вытирается с помощью спиртового распыления. Начиная с этого шага, последующая операция должна быть завершена в шкафу биобезопасности.
3. Переместить жидкость из замороженной трубки в центрифужную трубку, содержащую 5 мл законченной среды, 150 г центрифуги в течение 5 минут и удалить ее вакуумным насосом.
Восстановление взвешенных клеток с использованием питательных сред и их перенос в новые бутылки. Чтобы обеспечить выживаемость при восстановлении клеток, используйте питательную среду после подогрева водяной ванны при температуре 37°C.
Клетки культивируются в инкубаторах с постоянной температурой 37°C, содержащих подходящий CO2.
Стенная клеточная культура
1. Высасывайте и выбрасывайте питательную среду в бутылке для культивирования и добавляйте увлажнитель PBS один раз.
Добавьте 1 мл 0.25 (w / v) раствор Trypsin - EDTA и поместите его в инкубатор при температуре 37°C, пока клетка не оторвется от стенки и не отделится. Этот процесс занимает около 3 - 5 минут.
Добавьте 2 мл полной питательной среды, чтобы нейтрализовать протеазу поджелудочной железы, и слегка вдувайте, чтобы сдуть клетки с поверхности бутылки и рассеять клетки.
Собирайте клеточную суспензию в 15 мл центробежной трубки, 150 г центрифуги в течение 5 минут и удаляйте ее вакуумным насосом. Возьмите достаточное количество питательной среды, чтобы перегрузить клетки и переместить их в новую культурную бутылку.
Передача суспензионных клеток может быть основана на следующих методах:
I. Метод прямой передачи
1. До тех пор, пока взвешенные клетки не вырастут до 80 - 90% (клеточная суспензия становится желтой), они могут передаваться;
2. Высасывание клеточной суспензии соломинкой 1 / 2 ~ 1 / 3;
3. Добавьте достаточное количество свежих питательных сред и продолжайте культивировать.
II. Центробежная передача (в случае обнаружения фрагментов клеток)
Перенос клеточной суспензии в центрифужную трубку;
2.150 г центрифуг 5 мин, сбрасывание верхней жидкости;
3. Использование свежих питательных сред для тяжелой суспензии клеток;
4. Соломинка поглощает соответствующее количество клеточной суспензии, загружает в новую бутылку для культивирования, а затем добавляет соответствующее количество свежей среды для продолжения культивирования.
Операция замораживания клеток
1.1000 rpm центрифуг удаляется в течение 5 минут. Добавьте 1 мл сывороточной суспензии, добавьте сыворотку и DMSO в соответствии с количеством клеток, слегка перемешайте, конечная концентрация DMSO 10%, плотность клеток не менее 1 x 106 / мл, каждая криогенная трубка замораживает 1 мл клеточной суспензии, обратите внимание, что криогенная трубка хорошо маркирована;
Поместите трубку замораживания в программный охладитель, поместите ее в холодильник - 80°C и переведите в хранилище жидкого азота не менее чем через 2 часа
Клиенты нашей компании, пожалуйста, проконсультируйтесь.
BT - 474 / HR (клеточная резистентность к гексетину при раке молочной железы человека)
LAD2 (человеческие гипертрофические клетки)
HEC1B (клеточная линия эндометриального рака)
Эпителиальные клетки слизистой оболочки полости рта человека
L2 - эпителиальные клетки легких крыс
IEC - 6 (склеротические эпителиальные клетки кишечника крыс)
U251 Клетки глиомы человека
LN - 229 Клетки глиомы человека (идентифицированы правильно)
CG4 Клетки - предшественники малоотростковых глий у крыс
TR146 Клетки фосфорного рака пищевода человека
C28 / I2 (нормальные хрящевые клетки человека)
H9c2 (2 - 1) (клетки сердечной мышцы крыс)
LHCN - M2 Человеческие скелетные мышечные клетки
HMC - 1 Антропогенный штамм
RSC96 Клетки Шерванга у крыс (род идентифицирован правильно)
Эпителиальные клетки легких мышей (MLE - 12)
BEAS - 2B - клетки бронхиального эпителия человека
Фибробласты десен человека; HGF-1
Раковые клетки яичников человека; Клетки SK - OV - 3
Межжировые стволовые клетки мышей
Эмбриональные стволовые клетки мышей
Фибробласты кожи человека
SCL-1; Клетки рака кожи человека (идентифицированы STR)
Caki - 2 - клетки рака почек человека
Tramp - C1 (эпителиальные клетки рака предстательной железы у мышей)
sNF02.2 Клетки (номер ATCC: ys3821) Человеческие нейрофибромы 1 типа
CAL - 120 - Клетки рака молочной железы человека
Клетки рака толстой кишки у мышей, CT26
HEL 299 - Нормальные волокнистые клетки плода
SW1463 (клетки рака прямой кишки человека)
DU4475 - Клетки рака молочной железы человека
ARH - 77 - Клетки лейкемии человека
ECC10 - Клетки рака желудка человека
HMCB - клетки меланомы человека
HPAF - II - клетки рака поджелудочной железы человека
HT29 / 219 - Клетки рака толстой кишки человека
HuH - 1 Клетки рака печени человека
J82 - Раковые клетки мочевого пузыря человека
К - 562 клетки лейкемии человека
Caki - 1 клетки рака почек человека
3T3 - L1 Эмбриональные фибробласты мышей
AU565 - Клетки рака молочной железы у людей
BDCM - клетки лейкемии человека
BEL7404 - Клетки рака печени человека
BFTC - 905 - Раковые клетки мочевого пузыря человека
BT - 549 - Клетки рака молочной железы у человека
BxPC - 3 - клетки аденокарциномы поджелудочной железы человека
COLO 201 - Клетки рака толстой кишки человека
CCK - 81 - клетки рака толстой кишки человека
CT26.WT - Клетки рака толстой кишки у мышей
Daoy - клетки миелобластомы человека
HCC1187 - Клетки рака молочной железы человека
HEC - 1 - A Клетки рака матки человека
HT115 - Клетки рака толстой кишки человека
HuH - 7 - клетки рака печени человека
KMS - 21BM - множественная миелома человека
KMS - 26 - клетки множественной миеломы человека
KNS - 42 Полиморфные клетки эмалевой опухоли человеческого мозга
LU99 - Клетки немелкоклеточного рака легких человека
M059J Полиморфные клетки эмалевой опухоли мозга человека
MDA - MB - 157 Клетки рака молочной железы у людей
MOLM - 16 - Клетки лейкемии человека
RPMI 8226 - множественные клетки миеломы человека
SCH - клетки рака желудка человека
SNU - 1041 - чешуйчатые раковые клетки головы и шеи человека
SNU - 1750 - Клетки рака желудка у человека
SNU - 407 - Клетки рака толстой кишки человека
SUIT - 2 - Раковые клетки поджелудочной железы человека
SW837 - Клетки рака прямой кишки человека
TE - 9 - чешуйчатые раковые клетки пищевода человека
TUHR14TKB - клетки рака почек человека
UACC - 3199 Клетки рака молочной железы у людей
AGS - клетки рака желудка человека
BT - 20 - человеческие клетки рака молочной железы
COV362 - Раковые клетки яичников человека
NCI - H28 (клетки злокачественной мезотелиомы человека)
SK - ES - 1 (клетки саркомы Ювена человека)
SNU - 878 (клетки рака печени человека)
TGBC1TKB (рак желчного пузыря человека и клетки внепеченочного желчного протока)