HEC - 1 - B Раковые клетки эндометриальной железы человека

Название продукта:HEC - 1 - B Раковые клетки эндометриальной железы человека

Торговая марка: Шанхайская научно - исследовательская биология
Количество клеток: 1x10 ^ 6 cells
Активность клеток 95% (Viability by Trypan Blue Exclusion)
Клеточная передача: 1: 4 ~ 1: 6 передача; Смена жидкости 2 - 3 раза в неделю
Условия роста: газовая фаза: воздух, 95%; углекислыйгаз, 5%; Температура: 37°C
Тестирование клеток: клетки не содержат ВИЧ - 1, HBV, HCV, микоплазмов, бактерий, дрожжей и грибков
Условия культивирования: DMEM (с высоким содержанием сахара) + 10% FBS + 1% P / S; 37°C, 5% CO2
Метод передачи: рекомендуется 1: 2 - 13: 3 Смена жидкости один раз в два дня
Условия замораживания: замораживание клеток без сыворотки крови
Условия замораживания: 90% FBS + 10% DMSO
Замораживание клеток: замораживание жидкого азота

Клетки после обработки.

Клетки, выращенные в бутылках с культурой в хорошем состоянии, заполнены питательной жидкостью и запечатаны в бутылках - это способ транспортировки клеток. Получив клетку обратно в свою лабораторию, откройте внешнюю упаковку и используйте75% алкоголь распыляет всю бутылку для дезинфекции и помещает в ультрачистую станцию, строго стерильную работуСтационарное размещение инкубатора2 - 4 часа. Подзеркальное наблюдение: не превышаетПри конвергенции 80% питательный раствор в бутылке может бытьСбор в центрифужную трубку, добавление6 мл питательной среды, помещенной37°C, 5% культивирование инкубаторов CO2; При более чем 80 - процентной конвергенции, в зависимости от ситуации передачи или замораживания, конкретные действия см. шаги клеточной культуры.（Обратите внимание на отправку герметичной бутылки для культивирования, помещенной в коробку для культивирования помните, что крышка бутылки для культивирования отвинчивается, после передачи рекомендуется бутылка с питательной средой внутри оригинальной бутылки, а другая бутылка с собственной питательной средой)

HEC - 1 - B Раковые клетки эндометриальной железы человекаЭтапы воспитания

I. СОДЕРЖАНИЕРеанимационные клетки: СодержитЗамораживающая трубка для клеточной суспензии 1 мл быстро размораживается и размораживается в водяной ванне при температуре 37 ° C, добавляя 5 мл питательной среды, смешанной равномерно. Центрифугирование в течение 5 минут в условиях 1000 RPM, удаление очищающей жидкости, добавление4 - 6 мл питательной среды после дутья. Затем добавьте всю клеточную суспензию в бутылку для культивирования на ночь (или добавьте клеточную суспензию)В чашке 6 см), культивировать ночлег. На следующий день поменяйте жидкость и проверьте плотность клеток.

II.Клеточная транскрипцияЕсли плотность клеток достигает80% - 90%, можно проводить культуру передачи.

a）、 Для клеток, прикрепленных к стенке, транскрипция может ссылаться на следующие методы:

1. Выбросить культуру верхней очистки и промыть клетки 1 - 2 раза с помощью PBS, который не содержит ионов кальция и магния.

2. Добавьте 1 - 2 мл пищеварительного раствора (0,25% Trypsin - 0.53 мм EDTA) в культурную бутылку, поместите в инкубатор 37°C, чтобы переварить 1 - 2 мин, а затем под микроскопом, чтобы наблюдать пищеварение клетки, если большая часть клетки округлена и выпадает, быстро возвращайте консоль, постучите несколько раз в культурную бутылку и добавьтеСвыше 5 млБ10% Сыворотка.Культурная среда прекращает пищеварение.

3. Аккуратно вдувайте клетки, высасывайте после отсоса, центрифугируйте 8 - 10 минут в условиях 1000 RPM, выбрасывайте очищающую жидкость, добавьте 1 - 2 мл питательной жидкости и выдувайте равномерно.

Добавляйте питательную жидкость в 5 - 6 мл / бутылку, и клеточную суспензию в новую чашку или бутылку, содержащую 5 - 6 мл питательной жидкости, в пропорции 1: 2.

b）、 Для суспензионных клеток передача может ссылаться на следующие методы:

Метод 1: Собирайте клетки, центробежные 8 - 10 минут в условиях 1000 RPM, выбрасывайте очищающую жидкость, добавьте 1 - 2 мл питательной жидкости и выдувайте ее равномерно, клеточную суспензию в новую чашку или бутылку, содержащую 8 мл питательной среды в пропорции от 1: 2 до 1: 5.

Метод 2: Можно выбрать половину способа обмена жидкости, после того, как половина питательной среды будет выброшена, оставшиеся клетки будут подвешены, а клеточная суспензия будет разделена в новую чашку Петри, содержащую 8 мл питательной среды, или в бутылку в пропорции от 1: 2 до 1: 3.

ПС:Если клиент получает2 мл трубчатых клеток, после получения клетки, с 75% алкоголя распыляет всю трубку для дезинфекции и помещает в ультрачистый стол или сейф, строгая стерильная работа; Перенесите клетки трубки в бутылку T25 или6 см чашка Петри, добавьте около 5 мл питательной среды смешивается, поместите в инкубатор на ночь после культивирования, чтобы увидеть плотность клеток: если плотность не превышает 80%, обмен жидкости продолжает культивироваться, в зависимости от ситуации, передавая или замораживая. Если плотность превышает 80%, может быть проведена прямая передача (метод там же).

III.Клеточная заморозка:(Примечание: Метод замораживания клеток без сыворотки крови см. в нашем отделе)

1) Клетки растут, чтобы покрыть бутылкуПри 80% площади выбрасывайте питательную жидкость из бутылки с культурой 25cm2 и промывайте клетки PBS один раз;

2 Добавить0.25% пищеварительной жидкости около 1 мл в бутылку для культивирования, наблюдение под перевернутым микроскопом, после того, как клетка отступает и круглая, добавьте питательную жидкость, чтобы прекратить пищеварение, мягко вдувая клетку, чтобы она выпала, а затем переместите суспензию в 15 мл центробежной трубки, 1000 rpm центрифуга 5 мин;

3. Перегрузить суспензионные клетки с соответствующим количеством замороженной жидкости и поместить их в трубку замораживания;

Во - первых, поместить клеточную замороженную трубку- 20°C 1.5h, затем переместите его в - 80°C

Некоторые из этих клеток являются следующими: