Стволовые клетки человеческого зубного мозга

Свойства продукта:

Источник ткани: ткань пульпы

Технические характеристики: 5 × 105cells / T25 Клеточные бутылки

Описание клетки:

Стволовые клетки человеческого зубного мозгаВыделение из синовиальной ткани; Пуллюлярная ткань находится внутри зубной полости. Форма полости пульпы примерно похожа на форму тела зуба, большая полость в коронке, называемая миелоидной камерой, более тонкая полость в корне зуба, называемая корневой трубкой, с небольшими отверстиями в кончике корня, называемая корневым отверстием. Пуллюлярная ткань состоит в основном из нервов, кровеносных сосудов, лимфатических и соединительных тканей, а также зубоподобных клеток, расположенных в периферии зубного мозга, роль которых заключается в создании зубной сущности. Зубной мозг имеет различные патологические изменения из - за различного действия возбудителей и разной сопротивляемости организма, которые клинически проявляются в ряде различных симптомов и признаков. После длительного периода гиперемия пульпы превращается в острое воспаление пульпы. Интерцеллюлярные стволовые клетки (mesenchymal stem cells, MSCs) происходят из мезобластной ткани эмбрионального периода, обладает сильным потенциалом самовоспроизводства и многонаправленной дифференциации, обладает способностью целенаправленно дифференцировать различные конечные клетки, такие как жировые клетки, костные клетки, хрящевые клетки и мышечные клетки. Использование MSCs для восстановления повреждений хряща имеет хорошие перспективы применения и в настоящее время способно отделять и готовить интерцельные стволовые клетки от костного мозга, жира, слизистой оболочки, костей, мышц и других тканей, а также из амниотической воды, пуповины и пуповинной крови.

Описание методологии:

Лабораторное отделение компании с использованием метода переваривания коллагеназы, клонирования с низкой плотностью разбавления, общее количество клеток около 5×10? Cells / Бутылка.

Контроль качества:

Лаборатория компании отделена иммунофлуоресценцией CD90, чистота до 90% и не содержит ВИЧ - 1, HBV, HCV, микоплазмов, бактерий, дрожжей и грибов и так далее.

Воспитание информации:

Культурная среда: содержит FBS, добавки для роста, Penicillin, Streptomycin и т.д.

Частота смены жидкости: каждые 2 - 3 дня

Характеристики роста: стенки

Клеточная форма: фибробласт

Характеристика передачи: может передаваться около 3 - 5 поколений

Пищеварительная жидкость: 0,25%

Условия культивирования: газовая фаза: воздух, 95%; CO2，5%

Как заморозить клетки?

Метод замораживания и хранения 1: охлаждающая трубка помещается при температуре 4°C 30 ~ 60 минут → (20°C 30 минут *) → - 80°C 16 ~ 18 часов (или на ночь) → резервуар жидкого азота vaporphase для долгосрочного хранения.

Второй способ замораживания и хранения: охлаждающая трубка помещается в программируемый охладитель с установленной процедурой ниже 1 - 3 °C в минуту до - 80 °C, а затем помещается в резервуар для жидкого азота vapor phase для долгосрочного хранения. 20°C не может превышать 1 час, чтобы предотвратить слишком большие кристаллы льда, вызывая массовую гибель клеток, или пропустить этот шаг непосредственно в холодильник - 80°C, но выживаемость немного ниже.

Операция культивирования:

1) Реанимационные клетки: замороженные трубки, содержащие 1 мл клеточной суспензии, быстро размораживаются и размораживаются в водяной ванне при температуре 37°C, добавляя 4 мл питательной среды, смешанной равномерно. Центрифугирование в течение 4 минут в условиях 1000 RPM, удаление очищающей жидкости, добавление 1 - 2 мл питательной среды после дутья. Затем все клеточные суспензии добавляются в бутылку для культивирования на ночь (или клеточная суспензия добавляется в чашку Петри 10 см, добавляется около 8 мл питательной среды, культивируется на ночь). На следующий день поменяйте жидкость и проверьте плотность клеток.

2) Клеточная транскрипция: если плотность клеток достигает 80% - 90%, можно проводить культуру транскрипции.

1. Выбросить культуру верхней очистки и промыть клетки 1 - 2 раза с помощью PBS, который не содержит ионов кальция и магния.

2. Добавьте 1 мл пищеварительного раствора (0,25% Trypsin - 0.53 мм EDTA) в питательную бутылку, поместите в инкубатор 37°C для переваривания в течение 1 - 2 минут, а затем под микроскопом наблюдайте пищеварение клетки, если большая часть клетки округлится и выпадает, быстро возвращайте консоль, постучите несколько раз в питательную бутылку и добавьте небольшое количество питательной среды, чтобы прекратить пищеварение.

3. Нажмите 6 - 8 мл / бутылку, чтобы добавить питательную среду, мягко выровнять и высосать, в условиях 1000RPM центрифугировать в течение 4 минут, отбросить очищающую жидкость, добавить 1 - 2 мл питательной жидкости после дутья равномерно.
Разделите клеточную суспензию в новую чашку или бутылку, содержащую 8 мл питательной среды, в пропорции 1: 2.

3) Замораживание клеток: Когда клетки растут в хорошем состоянии, может проводиться замораживание клеток. Следующие бутылки T25;

1. Когда клетки замораживаются, после удаления питательной среды, после очистки PBS добавляется 1 мл, после того, как клетки становятся круглыми и выпадают, добавляется 1 мл сывороточной питательной среды, чтобы прекратить пищеварение, можно использовать счетчик кровяных телец.

4min 1000rpm центрифуга удаляется. Добавьте 1 мл сывороточной суспензии, добавьте сыворотку и DMSO в соответствии с количеством клеток, слегка перемешайте, конечная концентрация DMSO составляет 10%, плотность клеток не менее 1x106 / мл, каждая замороженная трубка замораживает 1 мл клеточной суспензии, обратите внимание, что замороженная трубка хорошо идентифицирована.

3. Поместить криогенную трубку в программный охладитель, поместить в холодильник - 80 градусов и через 2 часа перевести в жидкий азот для хранения. Запишите расположение замороженной трубки, чтобы получить ее в следующий раз.

Экспериментальный отчет:

Продукция предназначена только для научных исследований:

I. Разделение и культивирование:

В стерильных условиях удалите ткань предсердия у крыс с СД возрастом 1 - 3D, затем очистите этот блок ткани 2 раза с помощью PBS, после чего он составит около 1 мм3;

2. Добавить в тканевые блоки пищеварительную жидкость фермента 4 мл (0,1% и 0,1% коллагеназы типа I), перемешать 10s, переварить 10 мин при температуре 37°C, а затем продувать капельницами в одноклеточную суспензию, естественным осаждением и собирать очищение, с питательной средой, содержащей 10°S, чтобы прекратить переваривание после размещения 4°C;

3. Оставшаяся ткань добавляется 3 - 4 мл ферментативного пищеварительного раствора, смешивается 10s, после переваривания 37°C 10 мин, в соответствии с вышеуказанным методом сбора очищения и прекращения пищеварения после размещения 4°C, повторяйте этот шаг 2 - 3 раза, пока ткань не переваривается;

4. фильтровать клеточный пищеварительный раствор с помощью сита из нержавеющей стали 200 подкласса, 1200 р / мин центрифуги 10 мин, отбросить верхнюю очистку, осадочные клетки с 10% FBS DMEM / F12 питательной среды, смешанной подвеской, вакцинированной в 25cm2 питательной бутылке, помещенной в 37 ° C, 5% CO2 культивируемой коробки;

5. После дифференциального наклеивания стенки на 1h высасывается питательная среда, которая вводится в соответствии с экспериментальными потребностями в 6 - пористой пластине для продолжения культивирования.
ii. иммунофлуоресцентная идентификация:
Когда клетки предсердной мышцы вырастают до 80% слияния, выбрасывайте питательную среду, промывайте клетки теплой PBS 2 раза по 10 мин каждый, а затем закрепляйте клетки 15 мин 4% полиформальдегидом при комнатной температуре;

2. PBS промывает клетки 2 раза по 10 мин каждый, а затем при 4°C с 0,1% проницаемой мембраны Triton X - 100 15 мин;

PBS промывает клетки 2 раза по 10 мин каждый, а затем закрывает клетки на 30 мин 4% BSA при комнатной температуре;

Разбавить альфа - актин - антиген в масштабе 1: 100 и поместить его на ночь в инкубационные клетки в холодильнике при температуре 4°C;

5. PBS промывает клетки 3 раза, по 10 мин каждый, разбавляет анти - альфа - actin дианти в масштабе 1: 150, помещает 1 ч при 37°C;

Промыть 3 раза по 10 минут с помощью PBS, а затем посмотреть изображение и сфотографировать его под перевернутым флуоресцентным микроскопом.
Антитела ангиотензина II

Ангиотензин II - рецептор 1 антитела

Ангиогенные антитела - 1

Ангиогенные белки 2 антитела

Человеческий CC - хемокинг - рецептор 5 (CCR5) Тест - набор elisa Бесплатная замена

Человеческий CC - хемоциклический рецептор 2 (CCR2) Тест - набор Elisa

Человеческий CC - хемокинг - рецептор 1 (CCR1) Тест - набор Elisa

Человеческий CC хемокинг 7 (CCL7 / MCP3 / SCYA6 / SCYA7) Тест - набор elisa

Человеческий CC хемофактор 5 (CCL5 / D17S136E / SCYA5) Набор для тестирования elisa бесплатно

Набор для обнаружения белка 17A (IL - 17A) elisa для мышей

Набор для обнаружения белка 17B (IL17B) elisa у мышей

Набор для обнаружения белка 17C (IL17C) elisa у мышей

Набор для обнаружения белка 17F (IL17F) elisa у мышей